甲宁为主治疗甲状腺功能亢进症的临床与实验研究

为探讨以甲宁为主加小剂量他巴唑治疗甲状腺功能亢进症(简称甲亢)的临床疗效、作用机理,对治疗组41例和他巴唑对照组30例进行临床观察及动物实验,结果治疗组总有效率95.12％,对照组有效率83.3％,治疗组明显优于对照组(P<0.05)。实验研究表明,甲宁有调整免疫功能,改善能量代谢,降低耗氧量,降低甲亢小鼠三碘甲状腺原氨酸(T_3)、甲状腺素(T_4)水平。急性毒理和临床观察均表明该药安全无毒。

星点设计-响应面法优选芪玄抑甲宁的提取工艺

目的:优选芪玄抑甲宁方中有效成分的提取工艺。方法:以浸泡时间、加水量、提取时间和提取次数为自变量,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、哈巴苷和迷迭香酸得率为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,采用星点设计-响应面法选取最佳工艺,并进行预测分析。结果:最佳提取工艺条件为浸泡时间74.4min,加水量为13.56倍,提取时间1.165h,提取次数2次,在此条件下,芪玄抑甲宁中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、哈巴苷、迷迭香酸含量总和的最大估计值为0.36,与预测值相符。结论:该方法简便合理,稳定,可预测性较好。

甲宁方治疗肝阳上亢、血瘀痰凝型甲状腺功能亢进症31例临床观察

[目的]观察甲宁方对肝阳上亢、血瘀痰凝证甲状腺功能亢进症的治疗效果。[方法]将临床诊断为甲状腺功能亢进症,中医证属肝阳上亢、血瘀痰凝证的患者31例纳入治疗组,给予甲宁方治疗,8周为1个疗程,进行治疗前后对照比较。[结果]甲宁方能有效改善患者三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺激素(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH)等指标,治疗前后比较有显著性差异(P<0.05)。并且有促进甲状腺刺激抗体(TSAb)转阴的作用。[结论]临床观察表明甲宁方治疗肝阳上亢、血瘀痰凝证甲状腺功能亢进症疗效满意并具有改善甲状腺功能,调节免疫的作用,且无明显不良反应。

甲宁对实验性自身免疫性甲状腺炎的治疗作用

目的:观察甲宁(三棱、莪术、柴胡、五味子、穿山甲、何首乌、夏枯草、野菊花、女贞子)对自身免疫性甲状腺炎的治疗作用。方法:采用猪甲状腺球蛋白多次免疫注射法造成大鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)动物模型,这些动物模型分别用甲宁、雷公藤甲素给予治疗。实验结束后对大鼠甲状腺组织做病理学检查,留取血清做甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)的测定。结果:甲宁各剂量组及雷公藤甲素组的TGAb、TPOAb水平明显低于模型组(P<0.001),甲状腺淋巴细胞浸润程度明显较模型组轻(P<0.01或0.001)。结果表明甲宁和雷公藤甲素均能降低EAT大鼠的自身免疫反应,且甲宁大剂量组的效果较雷公藤甲素更明显。结论:甲宁对自身免疫性甲状腺炎有明显的治疗作用。

甲宁方对甲状腺刺激抗体作用下FRTL细胞TGmRNA、TPOmRNA的影响

目的:观察甲宁方对甲状腺刺激抗体(TSAb)作用下Fisher大鼠甲状腺细胞系(FRTL细胞)甲状腺球蛋白基因(TGmRNA)、甲状腺过氧化物酶基因(TPOmRNA)表达的影响,探讨该方治疗格雷夫斯病(Graves)的可能机理。方法:用Graves病患者血清经聚乙二醇4000处理获得的TSAb粗提物,用MTT法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察甲宁方对TSAb作用下FRTL细胞生长和TGmRNA、TPOmRNA表达的影响。结果:TSAb阳性血清粗提物促进FRTL细胞生长,模型组与正常组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。甲宁方各浓度组对TSAb阳性血清粗提物刺激下的FRTL细胞生长均有抑制作用,并随甲宁方浓度增加抑制加强,其中高浓度甲宁方组与模型组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。甲亢灵片也可抑制TSAb阳性血清粗提物刺激下的FRTL细胞生长,但与模型组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。模型组FRTL细胞在TSAb阳性血清粗提物作用下,TGmRNA、TPOmRNA表达均较正常组增加,TGmRNA约增加1.8倍,TPOmRNA约增加1.7倍,提示TSAb可上调FRTL细胞TGmRNA、TPOmRNA表达。中、高浓度甲宁方组FRTL细胞TGmRNA表达较模型组低,高浓度甲宁方组可明显抑制FRTL细胞TPOmRNA表达的上调作用,说明甲宁方可抑制TSAb诱导的FRTL细胞TGmRNA、TPOmRNA表达。甲亢灵片也可抑制TSAb诱导的FRTL细胞TGmRNA、TPOmRNA表达,但作用不及中、高浓度甲宁方。结论:甲宁方可抑制Graves病的自身抗体TSAb对甲状腺细胞生长的刺激,推测抑制TGmRNA、TPOmRNA可能是甲宁方临床降低三碘甲状腺原氨酸(T_3)、甲状腺素(T_4)的主要机理之一。

HPLC法测定甲宁胶囊中黄芪甲苷的含量

目的:测定甲宁胶囊中黄芪甲苷的含量,以控制该制剂的质量。方法:以黄芪甲苷为指标,采用高效液相色谱法对制剂中的黄芪甲苷进行含量测定。结果:黄芪甲苷在0.248～1.24mg范围内线性关系良好,r=0.9996,平均回收率为96.43%,RSD=1.55%。结论:采用本法测定甲宁胶囊中黄芪甲苷的含量,方法简便、快速、重现性好,适用于该制剂的质量控制。

芪玄抑甲宁治疗甲亢的主要药效学研究

目的:研究芪玄抑甲宁对甲亢的治疗作用。方法:检测芪玄抑甲宁各剂量组对甲亢大鼠外观行为及体质量、甲状腺激素水平以及组织病理学改变等指标的变化。结果:芪玄抑甲宁各剂量组能显著降低甲亢大鼠血清中三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)的水平并使促甲状腺激素(TSH)的水平升高,并且可以显著改善甲亢大鼠的组织病理样的变化。结论:芪玄抑甲宁对甲亢大鼠具有良好的治疗效果。

基于网络药理学结合动物实验探究芪玄抑甲宁治疗格雷夫斯病的作用机制

目的 通过网络药理学与动物实验探究芪玄抑甲宁治疗格雷夫斯病(GD)的作用机制。方法 应用中药系统药理学数据库与分析平台和化学专业数据库查筛芪玄抑甲宁的活性成分及其靶点,从Genecards、在线人类孟德尔遗传数据库等中查筛GD相关靶点;将药物与疾病共有靶点导入STRING平台构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并筛选核心靶点;使用Cytoscape 3.8.2软件绘制“药物-活性成分-靶点”网络图并筛选核心成分;应用Metascape平台对核心靶点进行富集分析。选取6周龄SPF级体重(20±2)g的雌性BALB/c小鼠40只,其中10只设为正常对照组,其余30只均用重组腺病毒Ad-TSHR-289免疫3次构建GD模型。将造模成功的小鼠采用随机数字表法分为GD模型组、甲巯咪唑组、芪玄抑甲宁组,每组8只。芪玄抑甲宁组灌胃芪玄抑甲宁50 g/kg,甲巯咪唑组灌胃甲巯咪唑片3.75 mg/kg,正常对照组、GD模型组灌胃同体积的饮用水,1次/d。连续给药4周后,采用酶联免疫吸附试验检测四组血清血管内皮生长因子(VEGF)含量,免疫组织化学染色法检测四组甲状腺组织血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)的表达量。结果 共得到芪玄抑甲宁活性成分63种,靶点281个,GD靶点1 489个,药物与疾病共有靶点124个。PPI获得信号转导和转录激活因子3、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1、VEGFA等21个核心靶点。药物-靶点分析得到木犀草素、山柰酚、槲皮素、熊果酸、β-谷甾醇等18种核心成分。GO分析获得炎症反应、血管新生、血管形态发生等954项,KEGG分析获得MAPK、PI3K/AKT、VEGF等92条通路。动物实验显示,GD模型组血清VEGF和甲状腺组织PECAM-1表达量高于正常对照组,且芪玄抑甲宁组低于GD模型组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论 芪玄抑甲宁可能通过调控MAPK、PI3K/AKT、VEGF等信号通路产生抑制血管新生的作用治疗GD。

基于miRNA高通量测序探讨芪玄抑甲宁改善格雷夫斯病小鼠甲状腺功能亢进的作用机制

目的基于微小RNA(miRNA)高通量测序技术,探讨芪玄抑甲宁通过调控miRNA改善格雷夫斯病(GD)甲状腺功能亢进的作用机制。方法将雌性BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、甲巯咪唑组和芪玄抑甲宁组,前期应用重组腺病毒(Ad-TSHR289)免疫造模成功后,芪玄抑甲宁组灌胃芪玄抑甲宁50 g/(kg·d)进行干预,观察各组小鼠血清中三碘甲腺原氨酸(T_(3))、甲状腺素(T_(4))、促甲状腺激素(TSH)水平及甲状腺组织病理形态,并对对照组、模型组和芪玄抑甲宁组小鼠甲状腺组织进行miRNA测序。结果与模型组比较,芪玄抑甲宁干预4周后,小鼠血清T_(3)、T_(4)显著降低(P<0.05,P<0.01),TSH升高(P<0.05);小鼠甲状腺滤泡大小形状比较均一,排列疏松,胶质含量相对丰富。与对照组比较,模型组共筛选出171个差异表达miRNA,其中99个miRNA下调、72个miRNA上调;与模型组比较,芪玄抑甲宁组共筛选出127个差异表达miRNA,其中61个miRNA下调、66个miRNA上调。差异表达miRNA的q RT-PCR验证结果显示,三组小鼠甲状腺组织miR-128-3p、miR-144-3p、miR-363-3p、miR-215-5p和miR-30a-5p表达与miRNA测序结果基本一致。差异表达miRNA靶基因的富集结果显示,基因本体(GO)功能主要富集于对生长因子的反应、神经元细胞体、染色质结合、DNA转录因子结合、RNA聚合酶Ⅱ结合等方面;京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路主要富集于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、转化生长因子β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)、甲状腺激素信号通路等途径。结论miR-128-3p、miR-144-3p和miR-363-3p可能是芪玄抑甲宁治疗格雷夫斯病甲状腺功能亢进的作用靶点。

芪玄抑甲宁对Graves病模型药效学研究

目的：探讨芪玄抑甲宁对Graves病动物模型的药效学作用。方法：胫前肌注重组腺病毒复制Graves病动物模型,给药后观察小鼠外观行为,酶标仪检测实验小鼠血清中血清游离甲状腺素（FT4）和促甲状腺激素受体抗体（TRAb）的含量变化,并取甲状腺组织用于病理学检查。结果：芪玄抑甲宁对小鼠的外观行为、甲状腺组织病理具有改善作用,并对血清中FT4、TRAb均有回调作用。结论：芪玄抑甲宁对Graves病动物模型具有良好的治疗效果。

中药甲宁对自身免疫性甲状腺炎治疗作用的实验研究

目的研究中药甲宁对自身免疫性甲状腺炎治疗作用。方法用0.05%碘化钠和福氏佐剂抗原乳剂进行造模,2周后加强免疫,以后每周加强免疫1次,至第6周结束[1-3]。正常对照组不做任何处理。各药物组即①-④组免疫后第3周开始灌胃给药,1次/d,均按每100g体质量1ml容积给药,⑤、⑥组大鼠给与等容生理盐水。第10周结束实验。取血（3ml）,分离血清冻存（-80℃）,测定甲状腺球蛋白抗体（TGAb）,甲状腺微粒体抗体（TPOAb）。测量的甲状腺的重量指数。甲状腺组织进行病理检查。结果组织学示雷公藤组及甲宁大、中、小剂量组甲状腺病变程度均较模型组轻,差异有统计学意义（P〈0.05）。模型组大鼠重量及重量指数高于正常对照组和各给药组,差异有统计学意义。但各给药组之间差异无统计学意义。模型组大鼠血清TGAb、TPOAb水平明显高于正常组（P〈0.001）,而各给药组大鼠升高不明显。结论表明甲宁、雷公藤对大鼠自身免疫性甲状腺炎有治疗作用。并且甲宁大剂量组的治疗效果明显优于雷公藤组（P〈0.05）,中、小剂量组差异无统计学意义。

甲宁胶囊治疗甲状腺功能亢进症合并白细胞减少临床研究

目的:观察甲宁胶囊对甲状腺功能亢进症(GD)合并白细胞减少气阴两虚、痰火挟瘀型患者血常规的影响。方法:将65例患者随机分为两组,对照组32例,予以足量他巴唑及维生素B4、鲨酐醇治疗。治疗组33例,予以甲宁胶囊合小剂量他巴唑治疗,观察甲宁胶囊对两组患者血常规的影响差异。结果:与同组治疗前比较,两组在改善白细胞(WBC)、中性粒细胞(GRAN)、淋巴细胞(LYM)、单核细胞(MON)数值上均有显著性差异(分别为P<0.05、P<0.01);两组间比较,治疗后治疗组WBC、GRAN、MON数值改善优于对照组(P<0.05);治疗前后两组红细胞(RBC)、血小板(PLT)数值虽有一定变化,但两组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:甲宁胶囊能改善GD合并白细胞减少气阴两虚、痰火挟瘀型患者的白细胞生成及分布,提高抗甲状腺激素药物治疗效果。

“麦多收”小麦种衣剂2.4%甲宁混剂的药效试验

试验结果表明 :“麦多收”小麦种衣剂 2 .4%甲宁混剂对种子发芽有一定的抑制作用 ,但发芽不滞后 ,且对幼苗的生长产生了良好的促进作用 ,并能有效地防治某些病虫害 ,增产效果显著 。

修拇趾甲宁长勿短,免伤甲沟

日常生活中,人们对脚趾的损伤一般不以为然,总是认为过几天就会好。但小毛病也可能变成大问题,比如当脚趾甲锋利的边缘长进旁边的皮肤褶皱里,就会造成疼痛和不适,尤其是伤口感染时,更会让人疼痛难当。这种情况多半是患上了嵌甲性甲沟炎。

二甲双胍通过NLRP3炎症小体通路对皮肤角质形成细胞增殖和凋亡的双向调节研究

背景扁平苔藓是一种皮肤-黏膜慢性炎症性疾病。因其病因不明,许多患者治疗效果欠佳,严重影响生活质量,有必要深入研究扁平苔藓的发病机制,为其药物筛选提供新靶点。目的探讨二甲双胍通过NLRP3炎症小体通路对皮肤角质形成细胞增殖和凋亡的调控作用。方法实验时间为2020—2023年。体外实验以人永生化角质形成细胞株HaCaT为研究对象,分为4组:对照组、脂多糖(LPS)组(5μg/mL)、二甲双胍组(Met组:10 mmol/L)、LPS与二甲双胍联合组(LPS+Met组:LPS 5μg/mL刺激2 h后,再给予二甲双胍10 mmol/L处理)。体内实验以BALB/c小鼠为研究对象,利用咪喹莫特涂抹小鼠背部皮肤诱导了银屑病样皮炎模型,并制备了二甲双胍乳膏进行治疗,将小鼠随机分为3组:对照组、咪喹莫特组(IMQ组)、咪喹莫特与二甲双胍联合组(IMQ+Met组),每组10只;对照组小鼠于背部涂抹凡士林,IMQ组小鼠于背部涂抹咪喹莫特软膏,IMQ+Met组小鼠于背部涂抹IMQ软膏12 h后再涂抹二甲双胍乳膏;1次/d,连续7 d。采用细胞增殖试剂盒(CCK-8)和流式细胞术检测二甲双胍对HaCaT细胞增殖和凋亡的影响;采用Western Blotting、酶联免疫吸附实验(ELISA)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)活性实验检测二甲双胍处理HaCaT细胞后NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体通路的蛋白表达情况及活性水平;最后采用皮肤组织切片苏木素-伊红(HE)染色和免疫组化检测二甲双胍对咪喹莫特诱导银屑病小鼠皮炎的抗炎效果。结果CCK-8实验结果显示:LPS组、Met组、LPS+Met组HaCaT细胞48 h存活率均低于对照组,而LPS+Met组HaCaT细胞48 h存活率高于LPS组(P<0.05)。流式细胞术结果显示:LPS组、Met组HaCaT细胞48 h G2/M期细胞、细胞凋亡比例均高于对照组,而LPS+Met组HaCaT细胞48 h G2/M期细胞、细胞凋亡比例低于LPS组(P<0.05)。Western Blotting结果显示:LPS组、Met组HaCaT细胞NLRP3炎症小体通路Caspase-1 p40、Caspase-1 p20、白介素(IL)-1β、IL-18蛋白表达均高于对照组,而LPS+Met组HaCaT细胞NLRP3炎症小体通路Caspase-1 p40、Caspase-1 p20、IL-1β、IL-18蛋白表达低于LPS组(P<0.05)。ELISA实验结果显示:LPS组、Met组HaCaT细胞NLRP3炎症小体通路IL-1β、IL-18水平、Caspase-1相对活性均高于对照组,而LPS+Met组HaCaT细胞NLRP3炎症小体通路IL-1β、IL-18水平、Caspase-1相对活性低于LPS组(P<0.05)。皮肤组织切片HE染色显示:IMQ+Met组小鼠二甲双胍涂抹明显改善了咪喹莫特对皮肤的损害。免疫组化结果显示:IMQ+Met组小鼠则显著降低了NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18的表达。结论二甲双胍通过NLRP3炎症小体通路双向调节皮肤角质形成细胞的增殖和凋亡,并能够改善咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠的皮肤损害,有望为二甲双胍临床上用于治疗扁平苔藓提供理论依据。

乌帕替尼治疗20甲营养不良一例

20甲营养不良(twenty-nail dystrophy,TND)是一种病因不明的甲损害,累及所有指/趾甲,可能由遗传因素及免疫系统异常而诱发。本病目前尚缺乏标准的治疗方案,传统治疗往往起效慢,不良反应明显。本文报道JAK-STAT抑制剂乌帕替尼治疗TND有效一例,患者口服乌帕替尼片15 mg/d,6个月后甲全部新生,减量至15 mg/2d;治疗8个月后,所有甲基本恢复正常。

黄芪甲苷在糖尿病肾病中的保护作用及机制研究进展

糖尿病肾病(DN)作为糖尿病主要的微血管并发症之一,已成为目前终末期肾病患者死亡的主要原因之一。DN的发病机制复杂,主要涉及炎症、氧化应激、细胞凋亡等。目前临床关于DN的治疗主要是控制血糖,但并不能完全阻止DN的发展。黄芪甲苷是黄芪中提取的天然产物,具有多种生物活性,包括抗炎症反应、抗氧化应激、抗细胞凋亡以及抗肾脏纤维化等。因此,深入了解黄芪甲苷的肾脏保护机制,可以为DN的治疗提供新思路。

功能化自组装胶束增强氨甲环酸在皮肤色素沉着治疗中的作用

背景:氨甲环酸局部给药可用于改善皮肤色素沉着,但氨甲环酸极性大,局部给药时难以突破皮肤角质层屏障和细胞膜,皮下蓄积不易达到有效治疗浓度。目的:设计功能化自组装胶束,增强氨甲环酸抗皮肤色素沉着作用。方法:采用植物多酚衍生物表没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯与二甲双胍作为载体材料,通过氢键与静电作用自组装包载氨甲环酸,制备具有协同对抗色素沉着活性和增强药物渗透性能的载药自组装胶束;检测载药自组装胶束的纳米特性及稳定性,评价载药自组装胶束体外经皮渗透性能,考察载药自组装胶束的生物安全性和细胞水平效应。结果与结论:①载药自组装胶束的平均粒径为(176.27±5.23)nm,多分散系数为0.23±0.02,Zeta电位为(-25.67±0.98)mV,具有良好的稳定性,载药自组装胶束中氨甲环酸、二甲双胍质量浓度分别为(20.03±0.12),(6.67±0.08)mg/mL,载药自组装胶束对氨甲环酸和二甲双胍的载药量分别为(19.97±0.12)%,(6.65±0.08)%;②体外透皮实验结果显示,与氨甲环酸比较,载药自组装胶束具有更高的单位皮肤面积透过量和皮内贮留量,能渗透并扩散至皮肤更深层部位;③MTT检测结果显示,含氨甲环酸50-250μg/mL的载药自组装胶束对小鼠成纤维细胞与小鼠皮肤黑色素瘤细胞均无毒性作用,含氨甲环酸500μg/mL的载药自组装胶束对小鼠皮肤黑色素瘤细胞有轻微毒性作用;含氨甲环酸50-500μg/mL的载药自组装胶束未引发溶血反应,具有良好的生物安全性;④体外细胞培养结果显示,含氨甲环酸500μg/mL的载药自组装胶束可显著抑制小鼠皮肤黑色素瘤细胞的酪氨酸酶活性及黑色素释放,并且抑制作用强于单独的氨甲环酸溶液与二甲双胍溶液。结果表明,功能化自组装胶束能协同氨甲环酸抑制酪氨酸酶活性、减少黑色素合成,增强氨甲环酸抗皮肤色素沉着效应。