基于miRNA高通量测序探讨芪玄抑甲宁改善格雷夫斯病小鼠甲状腺功能亢进的作用机制

目的基于微小RNA(miRNA)高通量测序技术,探讨芪玄抑甲宁通过调控miRNA改善格雷夫斯病(GD)甲状腺功能亢进的作用机制。方法将雌性BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、甲巯咪唑组和芪玄抑甲宁组,前期应用重组腺病毒(Ad-TSHR289)免疫造模成功后,芪玄抑甲宁组灌胃芪玄抑甲宁50 g/(kg·d)进行干预,观察各组小鼠血清中三碘甲腺原氨酸(T_(3))、甲状腺素(T_(4))、促甲状腺激素(TSH)水平及甲状腺组织病理形态,并对对照组、模型组和芪玄抑甲宁组小鼠甲状腺组织进行miRNA测序。结果与模型组比较,芪玄抑甲宁干预4周后,小鼠血清T_(3)、T_(4)显著降低(P<0.05,P<0.01),TSH升高(P<0.05);小鼠甲状腺滤泡大小形状比较均一,排列疏松,胶质含量相对丰富。与对照组比较,模型组共筛选出171个差异表达miRNA,其中99个miRNA下调、72个miRNA上调;与模型组比较,芪玄抑甲宁组共筛选出127个差异表达miRNA,其中61个miRNA下调、66个miRNA上调。差异表达miRNA的q RT-PCR验证结果显示,三组小鼠甲状腺组织miR-128-3p、miR-144-3p、miR-363-3p、miR-215-5p和miR-30a-5p表达与miRNA测序结果基本一致。差异表达miRNA靶基因的富集结果显示,基因本体(GO)功能主要富集于对生长因子的反应、神经元细胞体、染色质结合、DNA转录因子结合、RNA聚合酶Ⅱ结合等方面;京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路主要富集于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、转化生长因子β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)、甲状腺激素信号通路等途径。结论miR-128-3p、miR-144-3p和miR-363-3p可能是芪玄抑甲宁治疗格雷夫斯病甲状腺功能亢进的作用靶点。

基于网络药理学结合动物实验探究芪玄抑甲宁治疗格雷夫斯病的作用机制

目的 通过网络药理学与动物实验探究芪玄抑甲宁治疗格雷夫斯病(GD)的作用机制。方法 应用中药系统药理学数据库与分析平台和化学专业数据库查筛芪玄抑甲宁的活性成分及其靶点,从Genecards、在线人类孟德尔遗传数据库等中查筛GD相关靶点;将药物与疾病共有靶点导入STRING平台构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并筛选核心靶点;使用Cytoscape 3.8.2软件绘制“药物-活性成分-靶点”网络图并筛选核心成分;应用Metascape平台对核心靶点进行富集分析。选取6周龄SPF级体重(20±2)g的雌性BALB/c小鼠40只,其中10只设为正常对照组,其余30只均用重组腺病毒Ad-TSHR-289免疫3次构建GD模型。将造模成功的小鼠采用随机数字表法分为GD模型组、甲巯咪唑组、芪玄抑甲宁组,每组8只。芪玄抑甲宁组灌胃芪玄抑甲宁50 g/kg,甲巯咪唑组灌胃甲巯咪唑片3.75 mg/kg,正常对照组、GD模型组灌胃同体积的饮用水,1次/d。连续给药4周后,采用酶联免疫吸附试验检测四组血清血管内皮生长因子(VEGF)含量,免疫组织化学染色法检测四组甲状腺组织血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)的表达量。结果 共得到芪玄抑甲宁活性成分63种,靶点281个,GD靶点1 489个,药物与疾病共有靶点124个。PPI获得信号转导和转录激活因子3、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1、VEGFA等21个核心靶点。药物-靶点分析得到木犀草素、山柰酚、槲皮素、熊果酸、β-谷甾醇等18种核心成分。GO分析获得炎症反应、血管新生、血管形态发生等954项,KEGG分析获得MAPK、PI3K/AKT、VEGF等92条通路。动物实验显示,GD模型组血清VEGF和甲状腺组织PECAM-1表达量高于正常对照组,且芪玄抑甲宁组低于GD模型组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论 芪玄抑甲宁可能通过调控MAPK、PI3K/AKT、VEGF等信号通路产生抑制血管新生的作用治疗GD。

甲宁为主治疗甲状腺功能亢进症的临床与实验研究

为探讨以甲宁为主加小剂量他巴唑治疗甲状腺功能亢进症(简称甲亢)的临床疗效、作用机理,对治疗组41例和他巴唑对照组30例进行临床观察及动物实验,结果治疗组总有效率95.12％,对照组有效率83.3％,治疗组明显优于对照组(P<0.05)。实验研究表明,甲宁有调整免疫功能,改善能量代谢,降低耗氧量,降低甲亢小鼠三碘甲状腺原氨酸(T_3)、甲状腺素(T_4)水平。急性毒理和临床观察均表明该药安全无毒。

星点设计-响应面法优选芪玄抑甲宁的提取工艺

目的:优选芪玄抑甲宁方中有效成分的提取工艺。方法:以浸泡时间、加水量、提取时间和提取次数为自变量,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、哈巴苷和迷迭香酸得率为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,采用星点设计-响应面法选取最佳工艺,并进行预测分析。结果:最佳提取工艺条件为浸泡时间74.4min,加水量为13.56倍,提取时间1.165h,提取次数2次,在此条件下,芪玄抑甲宁中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、哈巴苷、迷迭香酸含量总和的最大估计值为0.36,与预测值相符。结论:该方法简便合理,稳定,可预测性较好。

甲宁方治疗肝阳上亢、血瘀痰凝型甲状腺功能亢进症31例临床观察

[目的]观察甲宁方对肝阳上亢、血瘀痰凝证甲状腺功能亢进症的治疗效果。[方法]将临床诊断为甲状腺功能亢进症,中医证属肝阳上亢、血瘀痰凝证的患者31例纳入治疗组,给予甲宁方治疗,8周为1个疗程,进行治疗前后对照比较。[结果]甲宁方能有效改善患者三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺激素(T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH)等指标,治疗前后比较有显著性差异(P<0.05)。并且有促进甲状腺刺激抗体(TSAb)转阴的作用。[结论]临床观察表明甲宁方治疗肝阳上亢、血瘀痰凝证甲状腺功能亢进症疗效满意并具有改善甲状腺功能,调节免疫的作用,且无明显不良反应。

甲宁对实验性自身免疫性甲状腺炎的治疗作用

目的:观察甲宁(三棱、莪术、柴胡、五味子、穿山甲、何首乌、夏枯草、野菊花、女贞子)对自身免疫性甲状腺炎的治疗作用。方法:采用猪甲状腺球蛋白多次免疫注射法造成大鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)动物模型,这些动物模型分别用甲宁、雷公藤甲素给予治疗。实验结束后对大鼠甲状腺组织做病理学检查,留取血清做甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)的测定。结果:甲宁各剂量组及雷公藤甲素组的TGAb、TPOAb水平明显低于模型组(P<0.001),甲状腺淋巴细胞浸润程度明显较模型组轻(P<0.01或0.001)。结果表明甲宁和雷公藤甲素均能降低EAT大鼠的自身免疫反应,且甲宁大剂量组的效果较雷公藤甲素更明显。结论:甲宁对自身免疫性甲状腺炎有明显的治疗作用。

芪玄抑甲宁治疗甲亢的主要药效学研究

目的:研究芪玄抑甲宁对甲亢的治疗作用。方法:检测芪玄抑甲宁各剂量组对甲亢大鼠外观行为及体质量、甲状腺激素水平以及组织病理学改变等指标的变化。结果:芪玄抑甲宁各剂量组能显著降低甲亢大鼠血清中三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)的水平并使促甲状腺激素(TSH)的水平升高,并且可以显著改善甲亢大鼠的组织病理样的变化。结论:芪玄抑甲宁对甲亢大鼠具有良好的治疗效果。

HPLC法测定甲宁胶囊中黄芪甲苷的含量

目的:测定甲宁胶囊中黄芪甲苷的含量,以控制该制剂的质量。方法:以黄芪甲苷为指标,采用高效液相色谱法对制剂中的黄芪甲苷进行含量测定。结果:黄芪甲苷在0.248～1.24mg范围内线性关系良好,r=0.9996,平均回收率为96.43%,RSD=1.55%。结论:采用本法测定甲宁胶囊中黄芪甲苷的含量,方法简便、快速、重现性好,适用于该制剂的质量控制。

芪玄抑甲宁对Graves病模型药效学研究

目的：探讨芪玄抑甲宁对Graves病动物模型的药效学作用。方法：胫前肌注重组腺病毒复制Graves病动物模型,给药后观察小鼠外观行为,酶标仪检测实验小鼠血清中血清游离甲状腺素（FT4）和促甲状腺激素受体抗体（TRAb）的含量变化,并取甲状腺组织用于病理学检查。结果：芪玄抑甲宁对小鼠的外观行为、甲状腺组织病理具有改善作用,并对血清中FT4、TRAb均有回调作用。结论：芪玄抑甲宁对Graves病动物模型具有良好的治疗效果。

中药甲宁对自身免疫性甲状腺炎治疗作用的实验研究

目的研究中药甲宁对自身免疫性甲状腺炎治疗作用。方法用0.05%碘化钠和福氏佐剂抗原乳剂进行造模,2周后加强免疫,以后每周加强免疫1次,至第6周结束[1-3]。正常对照组不做任何处理。各药物组即①-④组免疫后第3周开始灌胃给药,1次/d,均按每100g体质量1ml容积给药,⑤、⑥组大鼠给与等容生理盐水。第10周结束实验。取血（3ml）,分离血清冻存（-80℃）,测定甲状腺球蛋白抗体（TGAb）,甲状腺微粒体抗体（TPOAb）。测量的甲状腺的重量指数。甲状腺组织进行病理检查。结果组织学示雷公藤组及甲宁大、中、小剂量组甲状腺病变程度均较模型组轻,差异有统计学意义（P〈0.05）。模型组大鼠重量及重量指数高于正常对照组和各给药组,差异有统计学意义。但各给药组之间差异无统计学意义。模型组大鼠血清TGAb、TPOAb水平明显高于正常组（P〈0.001）,而各给药组大鼠升高不明显。结论表明甲宁、雷公藤对大鼠自身免疫性甲状腺炎有治疗作用。并且甲宁大剂量组的治疗效果明显优于雷公藤组（P〈0.05）,中、小剂量组差异无统计学意义。

甲宁胶囊治疗甲状腺功能亢进症合并白细胞减少临床研究

目的:观察甲宁胶囊对甲状腺功能亢进症(GD)合并白细胞减少气阴两虚、痰火挟瘀型患者血常规的影响。方法:将65例患者随机分为两组,对照组32例,予以足量他巴唑及维生素B4、鲨酐醇治疗。治疗组33例,予以甲宁胶囊合小剂量他巴唑治疗,观察甲宁胶囊对两组患者血常规的影响差异。结果:与同组治疗前比较,两组在改善白细胞(WBC)、中性粒细胞(GRAN)、淋巴细胞(LYM)、单核细胞(MON)数值上均有显著性差异(分别为P<0.05、P<0.01);两组间比较,治疗后治疗组WBC、GRAN、MON数值改善优于对照组(P<0.05);治疗前后两组红细胞(RBC)、血小板(PLT)数值虽有一定变化,但两组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:甲宁胶囊能改善GD合并白细胞减少气阴两虚、痰火挟瘀型患者的白细胞生成及分布,提高抗甲状腺激素药物治疗效果。

“麦多收”小麦种衣剂2.4%甲宁混剂的药效试验

试验结果表明 :“麦多收”小麦种衣剂 2 .4%甲宁混剂对种子发芽有一定的抑制作用 ,但发芽不滞后 ,且对幼苗的生长产生了良好的促进作用 ,并能有效地防治某些病虫害 ,增产效果显著 。

修拇趾甲宁长勿短,免伤甲沟

日常生活中,人们对脚趾的损伤一般不以为然,总是认为过几天就会好。但小毛病也可能变成大问题,比如当脚趾甲锋利的边缘长进旁边的皮肤褶皱里,就会造成疼痛和不适,尤其是伤口感染时,更会让人疼痛难当。这种情况多半是患上了嵌甲性甲沟炎。

达格列净与二甲双胍、甘精胰岛素联合治疗对老年2型糖尿病患者血糖水平、胰岛素指标的影响

目的探讨达格列净与二甲双胍、甘精胰岛素联合治疗老年2型糖尿病的效果。方法将80例老年2型糖尿病患者随机分为两组。两组均采用二甲双胍治疗,在此基础上对照组采用甘精胰岛素治疗,观察组采用达格列净联合甘精胰岛素治疗。比较两组的血糖水平、胰岛素相关指标、不良反应发生率。结果治疗后,观察组血糖水平低于对照组,胰岛素相关指标优于对照组(P<0.05)。观察组不良反应发生率为15.00%,与对照组的12.50%比较无统计学差异(P>0.05)。结论达格列净与二甲双胍、甘精胰岛素联合治疗老年2型糖尿病的效果较好,可强化患者血糖调控,改善胰岛功能,安全可靠,临床价值显著。

小剂量利妥昔单抗联合甲泼尼龙序贯治疗视神经脊髓炎谱系疾病疗效观察

目的探讨小剂量利妥昔单抗联合甲泼尼龙序贯治疗视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)的临床疗效。方法选取医院2017年1月至2020年6月收治的NMOSD患者112例,随机分为观察组和对照组,各56例。两组患者均予注射用甲泼尼龙琥珀酸钠静脉冲击治疗(1000μg/d)3~5 d,逐渐减至125 mg/d,后改为口服甲泼尼龙片48 mg/d(继续减量至4 mg/d维持或停用);观察组患者加用利妥昔单抗注射液100 mg静脉滴注,每周1次,连续治疗4周,6~12个月重复使用。结果治疗后,观察组患者年复发率、扩展残疾状态量表(EDSS)评分均显著低于对照组(P<0.05),外周血T淋巴细胞CD_(3)^(+)和CD_(4)^(+)水平及CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)均显著高于对照组(P<0.05),血清白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均显著低于对照组(P<0.05)。两组患者治疗后的天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、血尿素氮、血清肌酐水平均无显著改变(P>0.05)。观察组与对照组不良反应发生率相当(7.14%比12.50%,P>0.05)。结论小剂量利妥昔单抗联合甲泼尼龙序贯治疗NMOSD,能有效改善患者的病情及机体炎症状况,提高免疫功能。

二甲戊灵、扑草净与丙炔氟草胺的配比筛选及在油莎豆田的应用效果

为探索和论证二甲戊灵、扑草净与丙炔氟草胺三者复配的合理性及三者复配制剂对油莎豆Cyperus esculentus var.sativus田杂草的防效和对油莎豆的安全性,本试验依据除草剂室内活性测定标准并借鉴除草剂防治大豆田杂草田间药效试验准则,进行了一系列试验。结果表明,二甲戊灵、扑草净与丙炔氟草胺三者联合作用对稗草Echinochloa crus-galli、苘麻Abutilon theophrasti、藜Chenopodium album 3种杂草表现为相加或增效作用,当三者混配比例为30∶30∶1时联合作用为增效,为最佳比例。此比例下的36.6%二甲戊·扑·丙炔SC对油莎豆田一年生杂草有较好的防效,试验有效剂量在1647.0~1921.0 g/hm^(2)范围内,对油莎豆出苗、生长较安全;施药后40 d对一年生杂草的防效为91.3%~97.7%。由此可见,二甲戊灵、扑草净与丙炔氟草胺三者联合研制新药剂具有可行性,能扩大杀草谱和应用范围,可用于油莎豆田杂草防控,适宜用量1647.0~1921.0 g/hm^(2)。

射干止咳胶囊体内外抗甲型H1N1流感病毒作用初探

目的初步探讨射干止咳胶囊对甲型H1N1流感病毒的体内外抗病毒作用。方法通过细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)结合MTT法考察射干止咳胶囊体外抑制甲型H1N1流感病毒活性的作用;采用小鼠滴鼻法感染甲型H1N1流感病毒为模型,观察射干止咳胶囊对甲型H1N1流感病毒的体内抗病毒作用。结果体外抗病毒试验结果显示,射干止咳胶囊对甲型H1N1流感病毒的最高抑制率为11.86%,提示在攻毒剂量为100TCID_(50)的条件下,射干止咳胶囊在体外对甲型H1N1流感病毒的抑制作用不明显。小鼠滴鼻感染5LD_(50)的甲型H1N1流感病毒,射干止咳胶囊低、中、高剂量组小鼠的死亡率分别为30%、10%、30%,死亡保护率达50%、70%、50%,平均生存天数分别为13 d、14 d、13 d,说明各给药组对攻毒小鼠具有较好的死亡保护作用。结论射干止咳胶囊体外抗甲型H1N1流感病毒的作用不显著,但射干止咳胶囊各剂量组对甲型H1N1流感病毒攻毒致小鼠死亡却具有明显的保护作用。

澳洲坚果新害虫——脊胸露尾甲生物学习性观察

在云南省西双版纳澳洲坚果种植区发现为害澳洲坚果的新害虫——脊胸露尾甲,为准确掌握其生物学习性,在室内以澳洲坚果果仁为食料饲养该虫,观察各虫态形态、成虫交配习性、产卵习性,测定卵孵化率及各虫态存活率。结果表明,脊胸露尾甲发育经历卵、幼虫、蛹、成虫4个虫态,其中幼虫分为3个龄期,随着龄期增长,幼虫体长、体宽和头壳宽度逐渐增加。成虫羽化后不会立即交配,交配前期(4.65±0.04)d,交配时长不等,初次交配时长(13.78±0.29)min,雄成虫存在争夺交配权行为。雌成虫产卵前期(8.65±0.03)d,初次产卵量(1.94±0.06)粒,一天中15:00—18:00产卵量/h最高;雌成虫对产卵位置具有选择性,背光面着卵率极显著高于向光面。卵孵化率随着相对湿度增加而不断提高。常规饲养条件下,卵、1龄幼虫、2龄幼虫、3龄幼虫、蛹的存活率分别为(86.50±0.69)%、(83.31±2.99)%、(94.85±0.71)%、(97.09±1.46)%、(98.77±1.23)%。