苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法现行耐药折点判断凝固酶阴性葡萄球菌甲氧西林耐药性的评价

目的评价苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法现行耐药折点在判断凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)甲氧西林耐药性中的准确性。方法苯唑西林(1μg)和头孢西丁(30μg)纸片扩散法测定149株临床分离的CNS对甲氧西林的耐药性,量取两种纸片的抑菌环直径。对苯唑西林组分别以≤14mm、≤15mm、≤16mm、≤17mm(CLSI/NCCLS2004标准)为耐药折点,对头孢西丁组分别以≤21mm、≤22mm、≤23mm、≤24mm(CLSI/NCCLS2004年标准)为耐药折点,与mecA基因检测结果比较,评价两种纸片扩散法在各折点对耐甲氧西林CNS判断的敏感性和特异性。结果与mecA基因检测结果比较,苯唑西林纸片扩散法在不同的耐药折点判断耐甲氧西林表皮葡萄球菌的敏感性分别为52.3%、75.0%、90.9%、100%,特异性都为100%,判断耐甲氧西林非表皮葡萄球菌CNS的敏感性分别为66.7%、79.0%、90.1%、97.5%,特异性分别为100%、100%、100%、94.4%;头孢西丁纸片扩散法在不同耐药折点判断耐甲氧西林表皮葡萄球菌的敏感性分别为45.5%、70.1%、90.9%、100%,特异性都为100%,判断耐甲氧西林非表皮葡萄球菌CNS的敏感性分别为83.6%、91.8%、97.3%、100%,特异性都为100%。结论苯唑西林和头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林CNS的现行耐药折点标准在判断表皮葡萄球菌和非表皮葡萄球菌CNS的甲氧西林耐药性中都有很高的敏感性和特异性,适用于CNS对甲氧西林耐药性的判断。对于非表皮葡萄球菌CNS,头孢西丁纸片扩散法较苯唑西林纸片扩散法结果更可靠。

多重PCR系统的建立及其在社区型甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌中PVL噬菌体分型中的应用

目的从基因组型和表型两方面解析从医院环境中分离出的社区型甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(MRSA),对携带杀白细胞素(PVL)基因的MRSA中的PVL溶原噬菌体进行分型。方法聚合酶链式反应(PCR)解析菌株所携带的SCCmec基因岛型及PVL毒素基因;凝固酶试验测定菌株的凝固酶型;设计8组PCR反应组合检测PVL溶原噬菌体型。结果 36株菌株所携带的SCCmec基因岛分型多样化。携带Ⅳc型SCCmec的菌株占多数,为16株(44.4%),其次为携带Ⅱ型SCCmec的菌株,为10株(27.8%)。各菌株所携带的SCCmec型别与菌株的凝固酶分型高度一致。经多重PCR检测,6株PVL阳性菌株所携带的PVL噬菌体型分别为φ108PVL型(3株),φ2958PVL型(1株)和φSa2mw型(2株)。结论院内分离的社区型MRSA的基因型和表型多样化,PVL噬菌体分型的多重PCR系统具有可应用性,应用此系统对鉴别具有异构六角形头部和伸长形头部的PVL溶原噬菌体有意义。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床调查及耐药性分析

目的分析武警广东总队医院2010～2012年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染分布及耐药情况,为指导临床合理用药提供参考依据。方法对武警广东总队医院2010年1月～2012年12月临床送检各类标本中分离到的184株MRSA,按照标本种类、科室分布、药物耐药性等进行分析。结果医院感染MRSA较多科室为骨外科、ICU、神经外科,分别占19%、17%、12.5%;184株MRSA主要标本来源为伤口分泌物、痰液,分别占29.9%、21.7%;MRSA除对万古霉素、利奈唑胺敏感外,对大环内酯类、氨基糖苷类、喹诺酮类等呈现不同耐药性,对青霉素、红霉素的耐药性为100%。结论掌握医院MRSA感染的分布及特征,监测其耐药性,有利于采取措施控制医院内MRSA的流行和指导临床用药。

多重聚合酶链反应用于检测、鉴定耐甲氧西林葡萄球菌的研究

目的建立一种快速的多重聚合酶链反应(PCR)方法,用于检测葡萄球菌对甲氧西林的耐药性,同时对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌的种进行鉴定。方法对临床分离的武汉地区金黄色葡萄球菌80株,表皮葡萄球菌70株,其余凝固酶阴性葡萄球菌60株,提取其基因组DNA,针对金黄色葡萄球菌独有的femA基因,表皮葡萄球菌的种特异性序列,决定葡萄球菌对甲氧西林耐药性的mecA基因,和细菌共有的16srRNA基因的保守序列设计四对引物,同时加入PCR体系中对相应片段进行扩增。结果在210株葡萄球菌中,mecA基因检测结果与苯唑西林敏感试验结果的一致率为96.2%。mecA基因阳性但苯唑西林敏感的5个菌株,通过由低到高浓度的苯唑西林筛选培养后,均表现出耐药性。mecA基因阴性但苯唑西林耐药的3个菌株,经过对阿莫西林-克拉维酸敏感性试验后,被证明是β-内酰胺酶的高产株。结论此多重PCR方法不仅可以对临床分离葡萄球菌菌株的甲氧西林耐药性作出判断,同时还可以对金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌做出种的鉴定,是一种高效、敏感、特异性高的检测技术。

应用DNA探针检测甲氧西林耐药葡萄球菌

目的建立一种快速检测葡萄球菌和甲氧西林耐药葡萄球菌的斑点杂交技术。方法设计金黄色葡萄球菌nuc基因、甲氧西林耐药mecA基因、葡萄球菌tuf基因的特异引物,用聚合酶链反应合成其特异DNA探针,并用生物素标记,分别与固定在硝酸纤维素膜上的标准菌株和临床分离株模板DNA杂交,观察其敏感性和特异性。结果3对引物分别扩增出270bp、310bp、370bp3种DNA探针,均具有高度特异性。50株金黄色葡萄球菌tuf、nuc基因均为阳性,mecA基因阳性者22株。30株表皮葡萄球菌tuf基因均为阳性,nuc基因均为阴性,mecA基因阳性者9株。而其他非葡萄球菌与3种DNA探针杂交结果均为阴性。该方法可检测出1ng细菌DNA。结论斑点杂交技术检测耐甲氧西林葡萄球菌快速、有效,具有较高的应用价值。

甲氧西林耐药溶血性葡萄球菌的基因多态性研究

目的应用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对甲氧西林耐药溶血性葡萄球菌(MRSH)进行基因多态性研究。方法对81株MRSH通过RAPD技术进行扩增,电泳条带采用SPSS13.0软件分析,根据树状图分型。结果81株MRSH通过RAPD技术可产生相对固定的6条电泳带,经遗传相关系数分析后可分为8型,其中A型占70.37%,而10株血培养阳性的MRSH中有9株为A型。结论通过RAPD分型研究,可以了解MRSH基因流行型的特性,为该菌的感染控制提供分子流行病学依据。

耐甲氧西林葡萄球菌的耐药状况分析

目的分析耐甲氧西林葡萄球菌的耐药状况，了解葡萄球菌耐药的流行病学特征。方法对251株临床分离的葡萄球菌进行耐药性检测，分析其药敏试验结果。结果251株葡萄球菌中，金黄色葡萄球菌162株，其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin—resistant Staphylococcus aureus，MRSA）62株，阳性率为38．3％；凝固酶阴性葡萄球菌89株，其中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（methici Uinresistant coagulase negative Staphylococcus，MRCNS）63株，阳性率为70．8％；所有菌株对万古霉素均敏感。结论耐甲氧西林葡萄球菌对抗生素的耐药状况较为严重；未分离出万古霉素耐药株。

万古霉素治疗耐甲氧西林葡萄球菌感染高龄患者61例疗效分析

近年来，由于广谱抗生素的广泛应用，医院内获得性感染，特别是耐甲氧西林葡萄球菌感染的发生率明显升高，给临床治疗带来一定困难，尤其是80岁以上高龄患者发生此类感染更增加了治疗的难度。万古霉素的问世，为临床控制耐甲氧西林葡萄球菌感染提供了有力武器，但其有一定的肾毒性，使其应用受到了限制。笔者自2004年以来应用万古霉素治疗了61例耐甲氧西林葡萄球菌感染高龄患者，对其疗效和不良反应进行了观察，现分析报道如下。

烧伤创面耐甲氧西林葡萄球菌的分布及其β-内酰胺酶测定

目的 了解烧伤创面耐甲氧西林葡萄球菌 (MRS)的分布和耐药特征及其产 β-内酰胺酶情况 ,为临床合理用药治疗 MRS感染 ,提供实验室依据。方法 在 1997～ 2 0 0 0年期间 ,从烧伤创面中分离检测出 6 6株 MRS,用纸片扩散法测定其对 16种抗生素的耐药性 ,并用硝噻吩纸片测定 β-内酰胺酶 ;以 WHONET- 4软件分析处理试验数据 ,与同期烧伤创面分离的对甲氧西林敏感的葡萄球菌 (MSS)作比较分析。结果 MRS占感染烧伤创面葡萄球菌的 71.7% ,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA) 38株 ,占 MRS的 5 1.6 % ;耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌 (MRCNS)共 2 8株 ,分别是耐甲氧西林表皮葡萄球菌 (MRSE) 13株、耐甲氧西林溶血葡萄球菌 (MRSH) 10株、其他 5株 ;MRS均产 β-内酰胺酶 ,对 16种抗生素的耐药率明显高于 MSS。结论 临床医生应重视 MRS感染 ,严格区分 MRS与 MSS合理用药 ;治疗 MRS感染首选万古霉素。

猪群中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的高流行率

荷兰研究人员最近从猪农及其猪上分离到耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus,MRSA)。为了评估MRSA在荷兰猪群中的流行情况,作者检测了9家屠宰场的540头猪,这些屠宰场2005年度的生猪屠宰量占荷兰当年总屠宰量的63%。作者发现,在所测猪群中有209头(占39%)猪的鼻腔中携带MRSA。全部54个检测组(每组10头猪)中44组(81%)携带了MRSA,每个组来自不同的猪场,并且所有屠宰场均被污染。所有MRSA分离株均属于同一个菌群--多位点序列(Multi-Locus Sequence,MLS)398型和与之密切相关的spa基因型(主要是t001、t008和t1254)。发现了金黄色葡萄球菌染色体基因盒(Staphylococcal Chromosome Cassette,SCCmec)的三个型:Ⅲ(3%),Ⅳa(39%)和Ⅴ(57%)。44株(每组1株)对四环素均有耐药性,由此提示猪场普遍使用了四环素类抗生素。其中,同时耐红霉素和克林霉素的分离株占23%,同时耐卡那霉素、庆大霉素和托普霉素的分离株占36%,耐复方新诺明的仅1株,无耐环丙沙星和其它几种抗生素的菌株。各屠宰场间MRSA阳性猪比例显著不同,各试验组间也不相同,表明猪场的猪具有高MRSA流行率,而且屠宰场内存在高交叉感染率。

3144株临床分离细菌和念珠菌的分布及耐药性分析

目的了解本院临床分离细菌和念珠菌的分布特征和耐药性,为合理使用抗生素提供依据。方法大多数分离细菌的鉴定和药敏试验利用BD Phoenix仪,少数利用手工鉴定和K-B法。念珠菌利用显色平板进行分离和鉴定,K-B法测药敏。结果3144株细菌和念珠菌中前6位的种类及百分比为白色念珠菌12.02%、铜绿假单胞菌11.10%、大肠埃希菌9.64%、金黄色葡萄球菌7.09%、表皮葡萄球菌6.36%和肺炎型肺炎克雷伯菌6.14%。G-杆菌中耐药率较低的为亚安培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率为44.2%和43.5%。G+球菌耐药率较低的为万古霉素、替考拉宁、呋喃妥因、阿米卡星、氯霉素、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌对甲氧西林耐药率分别为52.1%和65.1%。念珠菌对两性霉素B和制菌霉素的耐药率均为0。结论本院临床分离肠杆菌科各种细菌产ESBLs水平、非发酵菌耐药率和葡萄球菌对甲氧西林耐药率均较高,应加强抗生素的合理使用。

临床分离4 364株细菌的分布特征和耐药性变迁分析

目的了解2003-2005年分离的4364株细菌的分布特征及耐药性变迁,为合理使用抗菌药物提供依据。方法大多数分离细菌的鉴定和药敏试验利用BD Phoenix仪,少数利用手工鉴定和K-B法药敏试验。数据分析用WHONET 5.0软件。结果葡萄球菌对万古霉素和替考拉宁的敏感率一直为100%,对其他抗菌药物的耐药率大多逐年上升,甲氧西林耐药率也逐年上升,金黄色葡萄球菌从40.8%上升到61.6%,表皮葡萄球菌从69.7%上升到79.8%。G-杆菌合计,大多数抗菌药物的耐药率逐年升高,耐药率一直低于30%的为美洛培南、亚安培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦和头孢他啶。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌体外产ESBLs的检出率一直居高不下,为29.5%～45.5%。结论本院肠杆菌科产ESBLs比例、葡萄球菌甲氧西林耐药率和非发酵菌碳青霉烯类耐药率均较高,应加强抗菌药物的合理使用和采取有效的隔离措施以降低耐药率及多重耐药菌的扩散。

768株葡萄球菌耐药性分析

目的掌握本院葡萄球菌对常用抗菌药物耐药情况,指导临床合理使用抗菌药物。方法采用回顾性方法统计分析本院2007年6月至2009年6月两年间葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药情况。结果两年间共分离出葡萄球菌768株,其中金黄色葡萄球菌(SAU)413株,占53.8%,耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)179株,占43.3%;凝固酶阴性葡萄球菌(CON)355株,占46.2%,耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCON)201株,占56.6%。葡萄球菌对庆大霉素、克林霉素、四环素、红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、环丙沙星、左氧氟沙星的总体耐药率在53.0%～80.0%,复方新诺明42.9%～44.0%,利福平在11.0%～14.0%,无耐药的有万古霉素和替考拉宁。MRSAU的耐药性高于SAU,MRCON的耐药性高于CoN。结论本院分离的葡萄球菌以SAU为主,葡萄球菌耐药以耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)为主,万古霉素是治疗MRS感染的首选药物。

2007年江门地区下呼吸道感染病原菌的耐药性分析

目的了解江门地区部分医院下呼吸道感染病原菌分布及对抗菌药物的耐药情况。方法用回顾性调查的方法对培养分离的1 591株病原菌,从种类、药物敏感性方面进行汇总和分析。结果以革兰阴性杆菌为主,占62.7%;其中铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌分列前3位;超广谱β-内酰胺酶(extendspectrumβ-lactamases,ESBLs)表型确证试验ESBL检出率:大肠埃希菌为53.4%(62/116),肺炎克雷伯菌为30.6%(48/157)。革兰阳性球菌占16.7%,耐甲氧西林金色葡萄球菌(Methicillin-resistant S.aureus,MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(Methicillin-resistant coagulase-negative Staphylococci,MRCNS)检出率分别为72.0%(90/125)和82.5%(80/97);未发现耐万古霉素葡萄球菌。真菌占20.6%。结论本次研究中肠杆科细菌产ESBL水平、非发酵菌的耐药率和耐甲氧西林葡萄球菌的检出率均较高。临床医师应根据药敏结果正确合理地使用抗生素。

2011-2015年安徽省铜陵市人民医院金黄色葡萄球菌耐药性分析

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）是医院感染和社区感染的重要病原菌之一,该菌分布广泛、感染力强,常常引起皮肤、呼吸道严重感染及败血症、脓毒血症等严重感染。β-内酰胺类抗菌药物是治疗敏感型金黄色葡萄球菌感染疾病的首选用药。

Ⅱ期翻修治疗凝固酶阴性葡萄球菌假体周围感染的临床观察

目的 :探讨Ⅱ期翻修治疗凝固酶阴性葡萄球菌假体周围感染失败的危险因素。方法 :回顾2005年1月至2015年6月就诊的57例因凝固酶阴性葡萄球菌造成的髋、膝关节假体周围感染而行Ⅱ期翻修患者,平均年龄(61.3±11.9)岁。根据甲氧西林是否耐药分为甲氧西林敏感(MSCo N)组及甲氧西林耐药(MRCo N)组,其中MSCo N组患者25例(9膝16髋,男12例,女13例),MRCo N组患者32例(11膝21髋,男14例,女18例);随访至少2年,比较两组炎症指标、窦道发生率和症状持续时间,以及Ⅱ期翻修治疗后再感染或持续感染率。结果:MSCo N组和MRCo N组分别经过(81.7±38.3)个月及(65.9±33.8)个月的随访,各治疗成功23例和27例,两组差异无统计学意义(P=0.643)。既往有手术史患者比无手术史患者失败的可能性高4.04倍[OR=4.04,95%CI(0.62,26.5)]。既往有窦道的患者比无窦道的患者失败的可能性高4.26倍[OR=4.26,95%CI(0.7,25.9)]。结论:在治疗甲氧西林耐药与敏感的凝固酶阴性葡萄球菌引起的假体周围感染方面,Ⅱ期翻修能取得良好的效果。甲氧西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌引起的假体周围感染并非Ⅱ期翻修治疗失败的危险因素,窦道及既往手术史可能是Ⅱ期翻修治疗失败的原因。

头孢噻利的药理作用和临床应用进展

头孢菌素类药物具有抗菌作用强，耐青霉素酶、耐β内酰胺酶、临床疗效高、毒性低、过敏反应较青霉素少等优点，因而曾被临床广泛使用。但随着广谱抗生素特别是β内酰胺类抗生素的应用增加，临床上需要有针对革兰阳性菌和革兰阴性菌的强效广谱抗生素。第四代头孢菌素除有第三代头孢菌素的特征外，还有区别于第三代头孢菌素的某些特点，如抗菌谱更广、对β内酰胺酶更稳定、血药浓度高、可透过血脑屏障等。

某院近3年住院患者痰液中病原菌的主要种类及耐药性分析

目的了解本院2006-2008年住院患者痰液中病原菌的主要种类和耐药性,为合理使用抗菌药物提供依据。方法大多数分离细菌的鉴定和药敏试验利用BD Phoenix仪,少数利用手工鉴定和K-B法进行药敏试验。念珠菌利用显色平板分离和鉴定,采用K-B法进行药敏试验。数据分析用WHONET5.4软件。结果住院患者痰液中细菌以铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌为主,念珠菌属以白色念珠菌为主。痰液中G-杆菌耐药率一直较低的为亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率为56.0%～69.0%和59.7%～68.1%。痰液中G+球菌对万古霉素和替考拉宁的敏感率一直为100%,其他抗菌药物的耐药率均较高。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌甲氧西林耐药率居高不下,为68.0%～71.6%和85.8%～90.0%。念珠菌属对两性霉素B和制菌霉素的耐药率均为0。结论住院患者痰液中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs水平、非发酵G-杆菌碳青霉烯类耐药率和葡萄球菌属甲氧西林耐药率均不断增高或居高不下,应加强抗菌药物的合理使用,以降低耐药率;采取有效的隔离措施可以防止多重耐药菌的扩散。

老年患者中段尿、血液和痰液中病原菌种类及耐药性分析

目的了解本院近3年老年患者中段尿、血液和痰液中分离细菌念珠菌主要种类及耐药性,为临床合理使用抗生素提供信息。方法大多数分离细菌的鉴定和药敏试验利用BD Phoenix仪,少数利用手工鉴定和K-B法药敏试验。念珠菌利用显色平板分离和鉴定,K-B法药敏试验。数据分析用WHONET5.4软件。结果老年患者中段尿中以大肠埃希菌、白色念珠菌和肺炎克雷伯菌为主,血液中以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌为主,痰液中以白色念珠菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌为主。中段尿、血液和痰液中大肠埃希菌产ESBLs比例分别为39.5%、34.0%和60.4%。痰液中金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌甲氧西林耐药性分别为71.4%、88.5%和90.0%。中段尿和血液中G-杆菌耐药率较低的为亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦和头孢他啶,痰液中为头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南。中段尿、血液和痰液中G+球菌,除万古霉素和替考拉宁敏感率为100.0%,其他抗生素的耐药率均较高。念珠菌对两性霉素B和制菌霉素的耐药率均为0.0%。结论本院老年患者中段尿、血液和痰液中念珠菌属构成比、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs比例、非发酵G-杆菌碳青霉烯类耐药率、葡萄球菌属甲氧西林耐药率均较高,应加强抗生素的合理使用。