自主研制四极杆-线形离子阱质谱仪测定血清中甲氨蝶呤

本研究基于自主研制的QLIT-6610MD液相色谱-四极杆-线形离子阱-质谱联用仪,建立了准确测量血清中甲氨蝶呤的同位素稀释质谱法。采用甲醇沉淀血清样品的蛋白后测定上清液。通过基质匹配标准曲线定量,在10~5000μg/L浓度范围内,甲氨蝶呤的线性系数R^(2)>0.9990,定量限为10μg/L,质控品精密度优于6.94%,血清样本添加回收率为86.39%~97.84%,变异系数(CV)≤8.04%。应用QLIT-6610MD与AB QTRAP 6500+液相色谱-质谱联用仪同时测定70例临床血清样本,并采用Pearson系数与BLand-ALtman法进行比较。结果表明,2台仪器所测结果一致,QLIT-6610MD可达到三重四极杆质谱仪定量测定血清中甲氨蝶呤的水平,能够满足临床诊断需求,为临床质谱分析提供了一种新的国产仪器选择。此外,本研究还初步探讨了多级碎裂技术(MSn)测定血清中甲氨蝶呤的可能性,为后续研究奠定基础。

416例异位妊娠患者行甲氨蝶呤单次注射的治疗结局及影响因素分析

目的探讨甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)单次注射治疗异位妊娠的结局及相关影响因素。方法回顾性分析2019年1月至2022年12月在复旦大学附属妇产科医院住院的416例异位妊娠患者,均行MTX单次注射,用药当天记为第1天,在用药第4天和第7天复查血β-人绒毛膜促性腺激素(β-human chorionic gonadotrophin,β-hCG)。与第4天相比,第7天血β-人绒毛膜促性腺激素下降<15%为治疗失败,纳入失败组;第7天血β-hCG下降>15%,为初始治疗有效,继续随访直至β-hCG下降至正常水平,纳入成功组。收集两组患者基线信息和治疗结局,并分析与治疗结局相关的影响因素。结果失败组纳入70例,成功组纳入346例。失败组中用药前β-hCG上升人数比例显著高于成功组(55.2%vs.35.8%,P=0.007),用药前β-hCG下降人数比例显著低于成功组(43.1%vs.63.6%,P=0.007)。失败组单核细胞计数显著低于成功组[(0.43±0.13)×10^(9)/L vs.(0.47±0.17)×10^(9)/L,t=-2.001,P=0.047)]。两组用药前β-hCG、β-hCG变化速度、白蛋白、血肌酐、白细胞计数、中性粒细胞计数、血小板平均体积、中性粒细胞-淋巴细胞比值、血小板-淋巴细胞比值、淋巴细胞-单核细胞比值的差异均无统计学意义。Logistic回归分析表明治疗结局与用药前β-hCG变化方式和单核细胞计数有关,用药前β-hCG下降(OR=2.313,95%CI:1.222~4.379,P=0.010)和单核细胞计数≥0.6×10^(9)/L(OR=4.018,95%CI:1.207~13.378,P=0.023)对治疗结局有显著影响。结论用药前β-hCG下降和单核细胞计数≥0.6×10^(9)/L是MTX单次注射成功治疗异位妊娠的独立影响因素。

甲氨蝶呤(MTX)联合米非司酮治疗异位妊娠临床疗效

目的探讨甲氨蝶呤(MTX)联合米非司酮治疗异位妊娠临床疗效。方法选取我院2012年1月至8月收治的异位妊娠产妇150例随机分为两组,对照组75例,采用甲氨蝶呤(MTX)单次治疗,观察组75例,采用甲氨蝶呤(MTX)联合米非司酮治疗。对血β-HCG水平与B超进行定时检测,同时密切观察、记录患者用药后的症状与一般情况。结果对照组治愈率72.15%,观察组治愈率88.92%,两组比较差异有统计学意义(P】0.05);两组患者在用药一周后进行复查血β-HCG,两组下降率比较差异有统计学意义(P】0.05);观察组甲氨蝶呤(MTX)联合米非司酮治疗异位妊娠在包块缩小、患者症状消失时间、HCG转阴时间与患者住院时间均优于使用甲氨蝶呤(MTX)单次治疗组。结论甲氨蝶呤(MTX)联合米非司酮治疗异位妊娠临床疗效确切,值得临床推广与应用。

聚酰胺-胺(PAMAM)树状大分子对甲氨蝶呤的包合及缓释研究

以甲氨蝶呤 (MTX)为模型药物 ,研究了 G5 .0 PAMAM树状大分子对其包合和释放 ,并用 1 3C NMR对 PAMAM-MTX包合物进行了表征 .UV-Vis研究结果表明 ,1个 G5 .0 PAMAM树状大分子能包合 2 7个MTX分子 ,体外释放研究表明 ,在 3 7℃ ,p H=7.4的 1 0 mmol/LTris-HCl缓冲溶液中 G5 .0 PAMAM树状大分子对 MTX具有明显的缓释作用 .

多药耐药性基因1/P糖蛋白(mdr1/P-gp)高表达与类风湿性关节炎患者甲氨蝶呤耐药有关

目的研究类风湿性关节炎(RA)患者甲氨蝶呤(MTX)耐药性与外周血单个核细胞(PBMC)多药耐药性基因1/P糖蛋白(mdr1/P-gp)的表达的相关性。方法根据符合纳入标准的RA患者依据服用MTX后28个关节疾病活动度评分(DAS28)的情况,将RA患者分为MTX敏感组及耐药组,健康人群为正常对照组。采用实时定量PCR检测mdr1 mRNA的表达,流式细胞术检测PBMC的P-gp的水平及功能,比较mdr1/P-gp在各组中的表达情况。结果与正常对照组相比,MTX敏感组及MTX耐药组P-gp表达及功能增强;与MTX敏感组相比,MTX耐药组mdr1 mRNA水平增加,且P-gp表达及功能增强。结论 RA患者mdr1/P-gp高表达与MTX耐药相关。

局部注射甲氨蝶呤治疗不同超声表现剖宫产切口妊娠疗效初探

目的探讨超声引导下局部注射甲氨蝶呤(MTX)治疗不同超声表现的剖宫产术后子宫瘢痕妊娠(CSP)的疗效。方法选择2012年1月至2018年1月在上海中医药大学附属曙光医院确诊剖宫产后CSP患者49例,年龄23~42岁,平均年龄30.7岁;孕5~11周,平均孕周5.8周。根据超声表现,将剖宫产后CSP分为孕囊注射组(26例)和局部注射组(23例)。在超声引导下经腹部对孕囊注射组切口区孕囊进行抽液,注入MTX治疗,对局部注射组切口区混合性回声进行局部MTX注射治疗,比较两组治愈率,治疗后血人绒毛膜促性腺激素(HCG)下降及病灶体积变化情况。结果孕囊注射组治愈率为84.62%(22/26例),局部治疗组治愈率为69.57%(16/23例);两组比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。比较两组治疗前及治疗后第3、7、14、28天血HCG变化情况,虽然各检测点,孕囊注射组血HCG下降幅度均快于局部注射组(P <0.05),但两组下降率差异无统计学意义(P> 0.05)。治疗前和治疗后第14天,两组病灶体积比较,差异有统计学意义(P <0.05);治疗后第7、28天差异无统计学意义(P> 0.05)。两组病灶体积都在治疗后第7天达高峰,后逐渐缩小,第14天局部注射组明显缩小。结论局部注射MTX对孕囊型及混合型CSP的治疗均是有效的,可以作为临床保守治疗CSP安全、可靠的方法。

甲氨蝶呤在多壁碳纳米管膜修饰电极上的电化学行为及其测定

目的:制作多壁碳纳米管(MWNT)膜修饰电极,并研究甲氨蝶呤(MTX)在该修饰电极上的电化学行为及其测定。方法:循环伏安法和线性扫描伏安法。结果:与裸玻碳电极(GCE)相比,MWNT 膜修饰电极能显著提高 MTX 的氧化峰电流,峰电流与 MTX 的浓度在2.5×10^(-7)～1.0×10^(-5) mol·L^(-1)范围内有良好的线性关系,富集120 s 检出限为1.2×10^(-7)mol·L^(-1)。5.0×10^(-6) mol·L^(-1)MTX 溶液平行测定10次的 RSD 为4.9%,平均回收率为99.5%。结论:MWNT 膜对 MTX 的电化学氧化有明显的催化作用,本法是一种可靠、快捷、灵敏的检测方法,可以用于 MTX 的含量测定。

脱氧腺苷拮抗甲氨蝶呤对炎性骨破坏的抑制作用

目的:研究脱氧腺苷(dAdo)对甲氨蝶呤(MTX)抑制炎性骨破坏作用的影响。方法:用大鼠的全骨髓细胞培养体系(WBMCs)来评价破骨细胞形成。在佐剂诱发的关节炎大鼠试验模型中,利用TRAP染色和μCT来评价dAdo对甲氨蝶呤治疗骨破坏的影响。结果:全骨髓细胞培养系中,dAdo消除了MTX对破骨细胞形成的抑制作用。在关节炎大鼠试验模型中,dAdo显著的抑制了MTX对破骨细胞的抑制作用,拮抗了甲氨蝶呤对炎症性骨破坏的治疗作用。结论:在一些骨破坏疾病过程中,dAdo的聚集可能是甲氨蝶呤疗效不良的原因之一。

大剂量甲氨蝶呤治疗儿童白血病血药浓度与副反应的研究

目的探讨大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)3·0g/m2与5·0g/m2(按体表面积计)应用后24、44、68h的血药浓度变化与临床毒副反应相关性,以提高急性淋巴细胞白血病治疗效果。方法观察15例急性淋巴细胞白血病住院患儿,接受大剂量MTX共50例次,按ALL危险度分为为两组,低危治疗组接受MTX剂量为3·0g/m2为Ⅰ组;中高危治疗组接受MTX剂量为5·0g/m2为Ⅱ组;观察临床出现MTX毒副反应的时间及程度,观察每个病例毒副反应出现程度与MTX血药浓度关系,两组毒副反应程度比较,进行统计学分析。结果①25例次接受MTX3·0g/m2患儿用药24、44、68h血药浓度分别是(30·09±7·04)umol/L、(0·39±0·42)umol/L、(0·06±0·13)umol/L;25例次接受MTX5·0g/m2患儿用药24、44、68h血药浓度分别是(54·37±11·12)umol/L、(0·46±0·32)umol/L、(0·07±0·08)umol/L,两组统计学分析24hMTX血药浓度有显著性差异,Ⅱ组MTX血药浓度明显高于Ⅰ组(P<0·05);②两组MTX毒副反应比较差异无统计学意义(P>0·05),MTX严重毒副反应与MTX血药浓度具有相关性,MTX浓度超过危险域值(44hMTX血药浓度>1umol/L;68hMTX血药浓度>0·1umol/L),临床毒副反应相对较重,均大于Ⅱ度以上,且持续时间较长。结论甲氨蝶呤临床给药剂量增加,其稳态血药浓度亦增高,毒副反应出现程度与中毒浓度呈相关性,在可靠的MTX血药浓度监测情况下提高MTX给药剂量是安全的,MTX血药浓度监测能可靠指导临床治疗,MTX出现中毒浓度时,可及时调整LV用量和次数,减少MTX严重及不可逆性毒副反应程度,保证ALL患儿按时开始下一疗程化疗,提高ALL患儿治疗效果。

甲氨蝶呤、米非司酮联合宫腔镜电切术在剖宫产术后子宫瘢痕妊娠治疗中的应用

目的:探讨甲氨蝶呤(MTX)、米非司酮联合宫腔镜电切术在剖宫产术后子宫瘢痕妊娠(CSP)治疗中的应用价值。方法:回顾性分析收治的18例阴道彩超确诊早期CSP,按治疗手段的不同分两组。第Ⅰ组采用MTX囊内注射、静脉滴注配伍米非司酮口服12例,1周后行B超监测下清宫术,第Ⅱ组采用甲氨蝶呤囊内注射、静脉滴注配伍米非司酮口服治疗,1周后在B超下行宫腔镜电切术+清宫术6例,根据治疗后阴道流血量、血β-HCG、阴道彩超及住院时间比较两组的疗效。结果:治疗后1周阴道流血量、血β-HCG均明显下降,Ⅱ组血β-HCG下降百分比较Ⅰ组明显,Ⅱ组住院天数较Ⅰ组短,无一例并发症出现。结论:MTX、米非司酮联合宫腔镜电切术治疗剖宫产术后瘢痕妊娠较单一使用药物治疗更有效。

甲氨蝶呤与抗人成骨肉瘤单克隆抗体F(ab′)_2片段偶联物的体外抗肿瘤作用

目的:研制一种以单抗F(ab′)2片段为基础的抗肿瘤导向药物。方法:制备出抗人成骨肉瘤单克隆抗体F(ab′)2片段与甲氨蝶呤(MTX)偶联物F(ab′)2-MTX、间接偶联物McAb-HSA-MTX、直接偶联物McAb-MTX,并进行体外靶细胞结合实验、细胞增殖抑制实验。结果:F(ab′)2、McAb、F(ab′)2-MTX、McAb-HSA-MTX、McAb-MTX均保持了与靶细胞MG-63的免疫反应性;细胞增殖抑制实验中,F(ab′)2-MTX、McAb-HSA-MTX、McAb-MTX、MTX的半抑制浓度(IC50)分别为(0.67±0.110)μg/L、(2.55±0.114)μg/L、(2.71±0.1452)μg/L、(5.51±1.529)μg/L,上述所有偶联物的杀伤活性明显大于游离MTX(P<0.05),F(ab′)2-MTX的杀伤活性明显大于McAb-HSA-MTX和McAb-MTX(P<0.01),F(ab′)2同抗体一样没有治疗作用。结论:F(ab′)2-MTX具有比MTX及McAb-MTX、McAb-HSA-MTX更强的体外抗肿瘤作用。

中药宫外孕2号方与甲氨蝶呤联合治疗胎盘植入的疗效观察

植入性胎盘的发生有多种原因,其主要原因是由于剖宫产或人工流产术后引起子宫内膜层损伤或修复不全,以致绒毛侵入肌层从而造成胎盘植入.一般而言,胎儿娩出后胎盘难于自然娩出者应排除植入性胎盘的可能.近年来植入性胎盘的发生有上升趋势,足月产或中期妊娠引产中均有发生.我院于2009年10月至2011年10月采用中西医结合的方法,予中药宫外孕2号方与甲氨蝶呤注射液（MTX）联合治疗胎盘植入,取得了较好的临床疗效,现报告如下.

甲氨蝶呤治疗异位妊娠护理体会

该类甲氨蝶呤（MTX）用于异位妊娠的治疗的适用范围，主要用于早期异位妊娠，要求保存生育能力的年轻患者。一般认为符合下列条件，可采用此法：①输卵管妊娠包块直径小于3cm；②输卵管妊娠未发生破裂或流产；③无明显内出血；④血HCG小于2000u／L．MTX治疗机理是抑制滋养细胞增生，破坏绒毛，使胚胎组织坏死，脱落，吸收而免于手术。患者对发生异位妊娠无心理准备，患者角色转变障碍，害怕手术痛苦产生急于求成的心理，特别是未婚育者，心理压力大，担心影响生育、婚姻及家庭关系等。

口服米非司酮联合单次注射甲氨蝶呤治疗剖宫产术后瘢痕妊娠的临床分析

目的:探讨口服米非司酮联合单次注射化疗药物MTX后,行超声引导下清宫术,在剖宫产术后子宫瘢痕妊娠(CSP)治疗中的应用价值。方法:22例CSP患者,口服米非司酮100 mg,bid×5 d,于口服米非司酮第1天时,行单次肌注甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)50 mg/m2化疗,待血β-HCG下降至1 000 m IU/ml以下后,行超声引导下的刮宫术治疗。若初诊时血β-HCG已在1 000 m IU/ml以下,在口服米非司酮5 d后,复查阴道B超,发现子宫部分无血流或血流明显减少,血β-HCG不同程度下降,在阴道彩色超声监测下行刮宫术。结果:22例均获得成功,无1例大出血,所有患者刮宫术后每周复查1次血β-HCG,1个月后全部降至正常。术后约30 d月经均恢复正常,复查超声子宫肌层回声尚均匀,随访至2013年7月无患者再次妊娠。结论:口服米非司酮联合单次肌注化疗药物MTX后,行超声引导下刮宫术,能快速终止剖宫产瘢痕妊娠,有效防止子宫破裂、大出血等严重并发症,是保留子宫的一种安全有效的治疗方法。

甲氨蝶呤与米非司酮联合保守治疗异位妊娠的临床分析

目的:分析甲氨蝶呤与米非司酮联合保守治疗异位妊娠的效果。方法:对2005年1月～2007年1月我院收治的符合保守治疗条件的异位妊娠患者164例,采用随机分组的方法,比较联合用药和单一用药的疗效。结果:联合用药治疗总有效率为97.0%,单一用米非司酮治疗的总有效率为77.3%。结论:甲氨蝶呤与米非司酮联合保守治疗异位妊娠疗效显著,经济实用,安全可靠,值得临床推广。

甲氨蝶呤联合米非司酮及中药保守治疗异位妊娠的疗效观察

目的观察甲氨蝶呤(MTX)联合米非司酮及中药保守治疗异位妊娠的疗效,比较中西医结合与西医单纯治疗的临床效果差异。方法选取2011年10月-2013年1月共收治的符合保守治疗的44例异位妊娠,其中对照组22例,采用MTX+米非司酮治疗,治疗组22例,在对照组的基础上加用中药治疗。结果对照组痊愈率和患侧输卵管造影通畅率分别为(81%)、(50%),治疗组痊愈率和患侧输卵管造影通畅率分别为(86%)、(77.27%)。两组痊愈率比较差异无统计学意义(P>O.05)。但治疗组血β-hCG转阴时间、平均住院时间、包块消失时间较对照组缩短,患侧输卵管造影通畅率治疗组明显高过对照组,差异具有统计学意义(P<O.05)。结论 MTX联合米非司酮及中药保守治疗异位妊娠,临床疗效确切,值得临床推广。

甲氨蝶呤联合米非司酮辅助腹腔镜胚胎吸出术治疗异位妊娠的疗效及对患者性生活质量的影响

目的探讨腹腔镜胚胎吸出术前肌注甲氨蝶呤(MTX)联合术后服用米非司酮(MFP)治疗异位妊娠(EP)的疗效及对其性生活质量的影响。方法采用随机抽签法将符合纳入标准的144例患者分为对照组和试验组,每组72例。纳入者均选择腹腔镜胚胎吸出术进行治疗,同时对照组术后口服MFP,试验组术前局部肌注MTX,术后口服MFP。对比两组手术时间、住院时间、包块消失时间、输卵管通畅率及PEP发生率;比较两组术后14 dβ-HCG水平及术后1年性生活质量和再妊娠率。结果与对照组相比,试验组手术时间、住院时间及包块消失时间均明显更短,术后输卵管通畅率明显更高,PEP发生率更低(P<0.05);术后14 d试验组血清β-HCG水平低于对照组(P<0.05);术后随访1年,试验组患者性生活频率、性唤起时间、高潮时间、性生活满意度评分及再妊娠率均优于对照组(P<0.05)。结论腹腔镜胚胎吸出术中,术前肌注MTX联合术后服用MFP治疗EP效果显著,可有效促进输卵管通畅,控制PEP发生率,提高患者性生活质量。

甲氨蝶呤联合中药治疗非破裂型宫外孕的疗效

目的观察甲氨蝶呤(MTX)联合中药治疗非破裂型宫外孕的疗效。方法选取医院收治的非破裂性宫外孕患者113例,均给予甲氨蝶呤(MTX)联合中药治疗,分析治疗效果。结果经治疗,97例患者治愈(85.84%),11例(9.73%)患者2次注射MTX;4例(3.54%)出现骨髓抑制,6例(5.31%)出现口腔黏膜溃疡及胃肠道反应等。结论给予非破裂型宫外孕患者MTX联合中药治疗,将患者的痛苦程度降低,疗效较高,虽有不良反应的发生,但发生率较低;重要的是此种治疗方式可将患者的生育功能保留,非常适用于未育女性患者,值得在临床上应用。

桂枝茯苓汤联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠疗效观察

目的观察采用桂枝茯苓汤联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠的效果。方法纳入90例异位妊娠患者,随机分为3组各30例,A组服用甲氨蝶呤,B组服用桂枝茯苓汤,C组采用桂枝茯苓汤联合甲氨蝶呤治疗,观察3组的治疗效果及附件包块变化情况。结果 3组治愈率整体比较,差异有统计学意义(P<0.05)。C组的治愈率与A组、B组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。3组附件包块治疗有效率整体比较,差异有统计学意义(P<0.05)。C组的有效率与A组、B组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论桂枝茯苓汤联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠,在降低β-HCG、症状改善、缩小包块方面均有较好效果,且副反应少、经济、方便。

米非司酮联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠的效果及对血HCG水平的影响

目的探讨米非司酮联合甲氨蝶呤(MTX)治疗异位妊娠(EP)的临床疗效及对血HCG水平的影响。方法选取我院收治的EP 86例,随机分为对照组和观察组,各43例。观察组予以米非司酮联合MTX治疗,对照组单用米非司酮治疗。比较两组患者的临床效果。结果治疗后,两组患者血HCG均逐渐下降,且观察组各时间点血HCG水平明显低于对照组(P<0.05);治疗10 d后,两组妊娠包块直径较治疗前显著缩小,且观察组明显小于对照组(P<0.05);观察组血HCG降至正常时间及妊娠包块消失时间明显短于对照组(P<0.05)。观察组治愈率为93.02%,明显高于对照组的74.42%(P<0.05);两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论米非司酮联合MTX治疗EP具有疗效好、起效快、安全性高、使用简便等优势。