继发性甲状旁腺功能亢进症患者维生素D受体和钙敏感受体的免疫组化研究

目的通过研究维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)和钙敏感受体(calciumsensingreceptor,CaSR)在继发性甲状旁腺功能亢进症(Secondary hyperparathyroidism,SHPT)患者甲状旁腺组织中的表达,探讨VDR和CaSR与SHPT甲状旁腺组织病理改变的关系。方法用免疫组化的方法计数CaSR和VDR阳性细胞,比较其在不同程度SHPT中甲状旁腺组织及正常甲状旁腺组织的阳性表达。结果 VDR阳性细胞表达几乎存在于所有主细胞的细胞核,呈黄褐色,胞膜和胞浆不着色。SHPT组较对照组明显下调,分别为(39.0±19.7)%和(78.0±2.5)%,差异有统计学意义(P<0.01)。SHPT弥漫性增生组、结节性增生组和腺瘤样增生组表达分别为57.1%、(31.0±6.7)%和(23.0±2.1)%,差异有统计学意义(P<0.01)。CaSR阳性细胞表达主要定位于主细胞的胞膜和胞浆,呈黄褐色。SHPT组较对照组明显下调,分别为(48.0±17.9)%和(79.0±1.0)%,差异有统计学意义(P<0.01)。弥漫性增生组、结节性增生组和腺瘤样增生组的CaSR表达分别为51.0%、(47.0±9.8)%和(29.0±10.1)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 VDR和CaSR表达均随甲状旁腺组织增生的程度增高而下调。VDR和CaSR的表达下调可能是活性维生素D治疗无效的病理基础。上调VDR和CaSR表达水平以及进一步激活受体功能是内科治疗SHPT的研究方向。

甲状旁腺素和维生素D受体基因多态对糖尿病患者骨密度的影响

目的探讨甲状旁腺素（PTH）基因多态性与中国北方汉族人糖尿病患者骨密度的关系，联合分析维生素D受体（VDR）基因和PTH基因多态性与骨密度的相关性。方法选自青岛市内分泌糖尿病医院1998年1月～2002年1月住院的糖尿病患者，运用聚合酶链反应限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术检测了1型糖尿病（T1DM）组54例，2型糖尿病（T2DM）组104例，健康对照（CON）组102例，260例中国北方汉族人PTH基因多态性；采用双能x线吸收法骨密度仪（DEXA）测量骨密度。结果校正年龄和BMI后，1型糖尿病组腰椎、股骨颈骨密度低于对照组（P〈0．05）；2型糖尿病组与对照组相比，骨密度差异无显著性（P〉0．05）；甲状旁腺素（BSTBI位点）基因型和等位基因分布频率在1型糖尿病组、2型糖尿病组与对照组间差异无显著性（P〉0．05）；在对照组及2型糖尿病组，BB基因型者腰椎（L24）和股骨颈部位骨密度显著高于Bb／bb基因型（P〈0．05）；在1型糖尿病组，BB基因型仅腰椎L：。部位骨密度高于Bb／bb基因型（P〈0．05）；联合VDR基因多态（ApaI酶切位点）分析结果表明，Bbaa基因型在腰椎和股骨颈骨密度低于其他基因型（P〈0．05）。结论糖尿病患者PTH基因多态性（BSTB1位点）可能是预测骨量减少、骨质疏松易感性的遗传标志。联合VDR基因多态（ApaI酶切位点）有助于识别糖尿病患者发生骨质疏松的高危人群。

维生素D受体基因多态性与散发性特发性甲状旁腺功能减退症的相关性

目的探讨维生素D受体(VDR)基因3′端BsmⅠ、ApaⅠ和TaqⅠ多态性与散发性特发性甲状旁腺功能减退症(SIH)的相关性,评价其与SIH患者生化指标及病情严重程度的关系。方法应用聚合酶链反应—限制性内切酶片段长度多态性分析(PCR-RFLP)确定106例SIH患者VDR基因型,测定血Ca、P、AKP、PTH水平,24 h尿Ca、P排量;记录患者智力减退、记忆力下降、癫痫发作、白内障和颅内钙化情况。结果VDR基因3′端多态性位点各等位基因频率如下:b 0.943,B 0.057,a 0.712,A 0.288,t 0.041,T 0.958,不同基因型患者生化指标和临床表现差异均无统计学意义(P>0.05)。结论VDR基因3′端多态性与SIH生化指标及病情严重程度无相关性。

维生素D受体(VDR)基因多态性与PTH研究进展

低转运性骨病为终末期肾病透析患者最常见的骨病类型之一,其重要特征为甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)水平低下。PTH相对不足、活性维生素D的过度应用及甲状旁腺切除术等医源性因素、高龄、糖尿病、酸中毒等多种因素均为低转运性骨病可能的病因。研究显示,PTH水平与维生素D受体(vitamin Dreceptor,VDR)基因多态性有关。VDR具有四个多态性位点,其中Bsm I位点多态性与血液透析患者PTH水平相关,"B"等位基因可能为血液透析患者血PTH水平低下的原因之一。

维生素D受体基因多态性对尿毒症甲状旁腺功能的影响

目的 :评价维生素D受体 (VDR)基因多态性对尿毒症患者继发性甲状旁腺功能亢进 (SHPT)的影响。方法 :10 6例尿毒症维持性血液透析患者采用聚合酶链反应———限制性片段长度 (PCR RFLP)方法分析VDR基因Apa Ⅰ位点多态性 ,有ApaⅠ酶切位点的等位基因为a ,无酶切位点者定为A。 结果 :10 6例患者VDR基因ApaⅠ多态性频率分别为AA 17%、Aa 5 4 7%、aa 2 8 3%。aa基因组患者血清iPTH水平 (339 8± 35 7 4ng/L)明显高于AA基因组 (15 1 9± 16 7 3ng/L ,P <0 0 5 )和Aa基因组患者 (191 5± 16 9 8ng/L ,P <0 0 5 )。aa基因组患者骨钙素水平 (36 2± 5 6 0 μg/L)明显高于AA基因组 (9 2± 6 1μg/L ,P <0 0 5 )和Aa基因组患者 (15 3± 2 1 6 μg/L ,P <0 0 5 )。三组间血钙、磷、镁均无明显差别 ,但aa基因组降钙素水平明显低于Aa基因组 (30 2± 17 6ng/Lvs 73 2± 6 8 3ng/L ,P <0 0 1)。 结论 :a等位基因患者易产生严重的SHPT。

Nutrition Journal|补充维生素D对代谢功能障碍相关脂肪性肝病患者肝纤维化因子、维生素D受体和肝纤维化microRNA的影响:一项探索性随机临床试验

来自德黑兰医科大学的Ebrahimpour-Koujan等进行了一项双盲安慰剂对照临床试验,旨在研究补充维生素D对代谢功能障碍相关脂肪性肝病(MASLD)患者血清维生素D受体、纤维化因子和纤维化microRNA水平的影响。46例MASLD患者在性别和BMI匹配后随机分配接受4000 IU/d维生素D或安慰剂,持续12周。测量体质量、身高和腰围。在基线和试验结束时测定血清纤维化microRNA、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、透明质酸、维生素D、维生素D受体、甲状旁腺激素、空腹血糖、血清空腹胰岛素、血脂谱、ALT和AST。使用HOMA-IR和QUICKI方程计算胰岛素抵抗和胰岛素敏感性。

特发性甲状旁腺功能减退症的维生素D受体基因多态性

目的探讨特发性甲状旁腺功能减退症(简称特发甲旁减)维生素D受体(VDR)基因3'端多态性分布。方法应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析确定106例特发甲旁减患者VDR基因型。结果VDR基因3'端各多态性位点基因分布符合Hardy-Weinberg群体遗传学定律,与健康志愿者无显著差异(P>0.05),不同基因型特发甲旁减患者身高、体重、BMI和发病年龄无显著差异(P>0.05)。结论未发现中国特发甲旁减患者VDR基因3'端多态性与健康志愿者差异有显著性,不同VDR基因型患者发病年龄及BMI差异无显著性。

维生素D受体基因多态性对尿毒症伴继发性甲状旁腺功能亢进的影响

目的 评价维生素D受体 (VDR)基因多态性对尿毒症伴继发性甲状旁腺功能亢进( 2°HPT)严重程度的影响。方法 对 1 0 6例尿毒症维持性血液透析患者采用聚合酶链反应———限制性片段长度 (PCR RFLP)方法分析VDR基因Apa I位点多态性 ,有ApaI酶切位点的等位基因规定为a ,没有者规定为A。结果 1 0 6例患者VDR基因ApaI多态性频率分别为AA 1 7%、Aa54 .7%、aa 2 8.3%。aa基因组患者血清iPTH浓度 [( 339.8± 357.4) pg/ml]明显高于AA基因组[( 1 51 .9± 1 6 7.3) pg/ml]和Aa基因组患者 [( 1 91 .5± 1 6 9.8) pg/ml],两组比较差异有显著性 ( P <0 .0 5)。aa基因组患者骨钙蛋白浓度 [( 36 .2± 56 .0 )ng/ml]明显高于AA基因组 [( 9.2± 6 .1 )ng/ml]和Aa基因组患者 [( 1 5.3± 2 1 .6 )ng/ml],两组比较差异有显著性 ( P <0 .0 5)。三组间血钙、磷、镁及一般情况均无明显差别 ,但aa基因组降钙素浓度明显低于Aa基因组 [( 30 .1 6± 1 7.59)vs( 73.2 2± 6 8.2 6 ) pg/ml,P <0 .0 1 ]。结论 a等位基因患者较非a等位基因患者易产生严重的 2°HPT。

维生素D受体基因多态性与慢性肾衰继发性甲状旁腺功能亢进的关系

目的 探讨维生素D受体 (VDR)基因B/b多态性与慢性肾功能衰竭 (CRF)继发性甲状旁腺功能亢进的关系。方法 慢性肾衰患者 10 1例 ,分为二组 :①高全段甲状旁腺素 (iPTH)组 5 8例 ,iPTH >6 0pmol/L ;②低iPTH组 4 3例 ,iPTH <12pmol/L。正常健康对照 10 0例。采用限制性片段长度 (RFLP)方法分析VDR基因多态性 ,同时检测血清碱性磷酸酶 (ALP)、Ca2 +、P3 -、Mg2 +。结果 维生素D基因型的分布在慢性肾衰高iPTH组BB型 5例 ( 8.8% ) ,Bb型 2 0例 ( 35 .1% ) ,bb型 32例 ( 5 6 .1% ) ;低iPTH组BB型 10例 ( 2 2 .7% ) ,Bb型 19例 ( 4 3.2 % ) ,bb型 15例 ( 34.1% )。正常人群与CRF患者BB、Bb、bb基因型及B、b等位基因分布无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;而CRF高iPTH组与低iPTH组相比 ,BB基因型和B等位基因的频率明显减低 (P <0 .0 5 ) ;bb基因型和b等位基因的频率明显升高 (P <0 .0 5 )。

维生素D3通过增强肝组织维生素D受体活性阻断JAK/STAT3通路减轻高胆固醇血症小鼠幽门螺杆菌感染相关胃炎

目的 探讨维生素D3(VD3)能否通过降低血脂抑制Janus激酶/信号转导子与转录激活子3(JAK/STAT3)信号通路从而减轻幽门螺杆菌(Hp)感染。方法 建立高胆固醇小鼠模型和Hp感染小鼠模型,采用VD3灌胃8周。采用实时定量PCR检测小鼠肝组织维生素D受体(VDR)、胰岛素诱导基因2(Insig-2)及小鼠胃组织胃泌素的mRNA表达,Western blot法检测胃组织JAK、STAT3、环加氧酶2(COX2)蛋白的表达,生化分析法检测小鼠血清胆固醇水平,ELISA检测各组小鼠血清白细胞介素6(IL-6)及IL-8水平,HE染色小鼠肝组织及胃组织的病变情况。结果 高胆固醇组及高胆固醇联合Hp感染组小鼠在灌胃VD3后,小鼠肝组织VDR、Insig-2的水平明显上升,胃泌素水平表达降低;胃组织JAK、STAT3及COX2蛋白的表达降低,血清中胆固醇水平降低,IL-6水平无明显变化,IL-8水平降低;与对照组相比,高胆固醇联合Hp感染组肝细胞气球样变减少,胃组织炎症减轻,胆固醇组、Hp感染组胃组织炎症也减轻。结论 VD3通过增强肝组织VDR的活性,阻断JAK/STAT3信号通路,抑制炎症因子表达减轻胃炎的程度。

维生素D受体基因多态性对慢性肾功能不全患者骨密度和甲状旁腺功能的影响

维生素D受体基因(VDR)位于人类第12号染色体上,该基因全长约4605个碱基对,基因转录产物为VDR蛋白.活性维生素D3与靶器官上的VDR结合后,在转录水平改变靶器官上特定蛋白质表达水平,产生不同的生物效应,可影响骨密度(BMD)及血液中甲状旁腺激素含量.我们观察了VDR基因多态性对慢性肾功能不全患者BMD和甲状腺功能的影响,现报告如下.

靶向维生素D受体的miRNA的筛选及其对继发性甲状旁腺功能亢进患者甲状旁腺激素分泌的影响

目的探讨靶向维生素D受体(VDR)基因的miRNA及其对继发性甲状旁腺功能亢进甲状旁腺激素(PTH)分泌的影响。方法用胶原酶消化法提取、分离和培养出继发性甲状旁腺功能亢进的甲状旁腺组织的原代细胞;运用生物信息学方法及全转录组测序的方法筛选得到靶向VDR的miRNA,双荧光素酶报告基因实验验证筛选出的miRNA与VDR的靶向关系;qRT-PCR及Western blotting检测过表达或抑制miRNA后的对VDR mRNA水平及蛋白水平和对PTH分泌的影响;qRT-PCR和免疫组织化学分别验证部分miRNA、VDR mRNA和蛋白水平的表达差异。结果成功培养得到甲状旁腺原代细胞;筛选并验证了hsamiR-149-5p、hsa-miR-221-5p、hsa-miR-222-3p、hsa-miR-29a-5p、hsa-miR-301a-5p、hsa-miR-873-5p、hsa-miR-93-3p均与VDR存在靶向关系;筛选并验证的7个miR中,过表达hsa-miR-149-5p、hsa-miR-301a-5p PTH分泌增加。hsa-miR-149-5p在继发性甲状旁腺功能亢进中高表达(P=0.046),VDR mRNA(P=0.0267)和蛋白水平表达均下降。结论hsa-miR-149-5p、hsa-miR-301a-5p可能通过下调VDR基因的表达促进继发性甲状旁腺功能亢进患者PTH的分泌。

两种维生素D受体激动剂治疗尿毒症继发性甲状旁腺功能亢进的疗效比较

目的:比较两种维生素D受体激动剂治疗尿毒症继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)的临床效果。方法:将2021年3月—2022年3月收治的98例尿毒症SHPT患者按随机数字表法分为对照组和观察组,各49例。两组均接受维持性血液透析治疗,对照组予以骨化三醇注射液治疗,观察组予以帕立骨化醇注射液治疗,比较两组总体疗效和治疗前后生化指标、相关症状及用药安全性。结果:观察组治疗总有效率为95.92%,相较于对照组的83.67%,明显更高(P<0.05);治疗后,观察组血清全段甲状旁腺激素(iPTH)、磷(P)水平相较于对照组,改善更明显(P<0.05),两组血清钙(Ca)水平比较无明显差异(P>0.05);治疗后,观察组甲状旁腺体积、视觉模拟评分法(VAS)评分、12条目瘙痒严重程度评估量表(12-PSS)评分相较于对照组下降更明显(P<0.05);观察组用药后不良反应发生率为6.12%,与对照组的20.41%比较,明显更低(P<0.05)。结论:相较于骨化三醇注射液,帕立骨化醇注射液能更有效降低尿毒症SHPT患者iPTH及P水平,促进症状改善,效果更为确切,且安全性更为良好,具有更高推广价值。

聚合酶链反应限制性片段长度多态性（PCR—EFLP）分析维生素D受体（VDR） …

聚合酶链反应限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）分析维生素Ｄ受体（ＶＤＲ）基因型可以早期预测骨质疏松，为探讨便捷、可靠的实验条件供一般临床实验室使用，本文对比常规ＰＣＲ效果、不同ＮＤＡ模板量对ＰＣＲ和限制性内切酶酶切结果的影响。结果显示：热启动消除了引物错配和二聚体形成的机遇，使特异性条带大量扩增；模板量控制在２００～８００ｎｇ最佳，可避免太低不出现扩增条带，太高造成某些结果的误判。据此认为：

特发性高钙尿症患者维生素D受体基因多态性研究及其临床意义

目的 :探讨维生素D受体 (VDR)等位基因多态性与特发性高钙尿症的关系 ,并分析其临床意义。方法 :筛选 36例特发性高钙尿症患者 ,采用PCR -RFLP法检测其VDR基因的Taq1、Apa1、FokⅠ多态性 ,并分析其与特发性高钙尿症的相关性。结果 :特发性高钙尿症组与健康组之间 ,启动子FokⅠ等位基因各基因型频率存在显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,基因型为ff型者 2 4h尿钙含量显著高于同组的其它基因型 (P <0 .0 5 )。Apa1、Taq1基因多态性在两组之间并无显著差异。结论 :特发性高钙尿症与VDR基因启动子Fok1等位基因多态性有关 ,而与VDR基因Apa1和Taq1多态性无关 ,ff型等位基因有可能成为特发性高钙尿症的遗传标志基因。

维生素D受体在乳腺癌组织中的表达

目的:研究维生素D受体(VDR) 在乳腺癌组织中的表达, 探讨维生素D受体与乳腺癌各病理类型之间的关系。方法: 采用免疫组化S-P法对60例乳腺癌组织及25例乳腺良性肿瘤组织进行维生素D受体标记。结果: 4种病理类型的乳腺癌组织中VDR的表达有显著性差异(P<0. 05)。结论: 维生素D及其类似物可能成为一种广谱抗癌药物用于肿瘤的治疗。

维生素D_3联合5-氟尿嘧啶对人食管癌Eca-109细胞移植瘤VDR表达的影响

探讨维生素D3、5-氟尿嘧啶单独与联合使用对人食管癌Eca-109细胞移植瘤维生素D受体(vitamin Dreceptor,VDR)的作用.随机分为对照组(C)、预处理组(PT)、维生素D3组(V)、5-氟尿嘧啶组(F)、预处理+5-氟尿嘧啶组(PT+F)、维生素D3+5-氟尿嘧啶组(V+F).体外培养人食管癌Eca-109细胞,BALB/c裸鼠皮下荷瘤,2.5μg/kg1,25-(OH)2维生素D3、25 mg/kg 5-氟尿嘧啶单独与联合腹腔注射,观察瘤体生长情况,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹技术(Western blot)检测裸鼠瘤体组织VDR mRNA与蛋白的表达.研究发现1,25-(OH)2维生素D3、5-氟尿嘧啶均能抑制裸鼠移植瘤的生长,PT、V、F、PT+F、V+F组瘤体体积与C组比较差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR与Western blot结果显示经1,25-(OH)2维生素D3单独与联合5-氟尿嘧啶使用后瘤体组织中VDR mRNA和蛋白表达升高,且联合用药更为显著(P<0.05).结果表明1,25-(OH)2维生素D3、5-氟尿嘧啶均能抑制人食管癌Eca-109细胞移植瘤的生长,两药联合应用具有协同作用,其机制可能与上调VDR基因与蛋白表达有关.

吉林汉族人群维生素D受体基因多态性对糖尿病氧化应激的影响

目的测定吉林地区2型糖尿病(T2DM)患者维生素D受体(VDR)Bsml位点基因型和等位基因频率及尿液中8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)水平并探讨其与氧化应激的相关性。方法选取吉林地区在吉林省人民医院内分泌科门诊及住院的T2DM患者150例为T2DM组,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测VDR Bsml位点基因型和等位基因频率,根据VDR Bsml位点基因是否携带B等位基因型分为BB+Bb组、bb组。收集体检中心健康体检者100例为正常对照组,所有研究对象分别测定空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、糖化血红蛋白(HbA1c),采用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测尿液8-OHdG水平。结果与正常对照组及T2DM组携带bb基因型患者比较,T2DM携带BB+Bb基因型患者尿8-OHdG水平均显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论中国吉林地区汉族人群T2DM VDR Bsml位点B等位基因者更易加重氧化应激发生。

维生素D受体在乳腺癌进展过程中的RNA表达情况及其意义

目的本实验采用Real-time PCR的方法分别检测了VDR在72例乳腺疾病中RNA水平,探讨VDR是否为乳腺癌疾病进展过程中的一个作用点,并能否作为治疗乳腺癌的新的分子靶点提供一定的依据。方法本实验用Real-time PCR的方法检测VDR在18例腺病、18例原位癌、18例浸润性导管癌及其他类型癌(大汗腺癌、粘液癌、髓样癌、腺样囊腺癌、小叶癌、导管内乳头状癌各3例)中RNA水平的变化。结果腺病组VDR的RNA水平高于癌(浸润性导管癌及其他类型癌,P<0.05),浸润性导管癌组VDR的RNA水平较其他癌(原位癌、大汗腺癌、粘液癌、髓样癌、腺样囊腺癌、小叶癌、导管内乳头状癌)低差异有统计学意义(P<0.05)。结论 VDR在不同种类的乳腺癌发展过程中起着不尽相同的作用,且有可能是乳腺癌疾病进展过程中的一个作用点,并且作为治疗乳腺癌可能的新分子靶点提供了一定的依据。

活性维生素D3通过VDR/mTOR途径调节高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖、纤维化和自噬

目的研究活性维生素D3(VD3)对高糖介导的系膜细胞增殖、纤维化及自噬水平的影响及其相关作用机制。方法体外培养HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞,转染小干扰RNA(siRNA)沉默细胞中维生素D受体(VDR),反转录PCR和Western blot实验检测干扰效率;将培养系膜细胞分为正常葡萄糖培养组、高糖组、高糖联合VD3组、敲低VDR后高糖联合VD3组、高糖联合VD3和mTOR激活剂MHY1485组;噻唑蓝(MTT)法和乙炔基脱氧尿苷(EdU)法检测系膜细胞增殖,ELISA检测纤连蛋白(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(Col1)和Ⅳ型胶原蛋白(Col4)的分泌水平,透射电镜检测各组系膜细胞自噬体数量变化,免疫荧光细胞化学染色检测系膜细胞中自噬标志分子微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达,Western blot法检测系膜细胞纤维化相关蛋白转化生长因子β1(TGF-β1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和P62蛋白的表达以及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)磷酸化水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。结果转染si-VDR后HBZY-1细胞中VDR mRNA和蛋白表达水平明显下调;与正常糖组相比,高糖组、高糖联合VD3组、敲低VDR后高糖联合VD3组和高糖联合VD3和mTOR激活剂MHY1485组系膜细胞的增殖能力、细胞因子FN、Col1和Col4的表达水平均显著增加,且细胞中p-mTOR、TGF-β1、α-SMA、P62的蛋白表达水平均显著增加,而LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显降低,自噬体数量显著降低;其中高糖联合VD3组较高糖组、敲低VDR后高糖联合VD3组、高糖联合VD3和mTOR激活剂MHY1485组的上述检测指标的变化趋势明显降低,后三组无明显差异。结论抑制VDR的表达或提高mTOR活化水平能有效抵消活性VD3抑制高糖介导的系膜细胞增殖及纤维化水平增加和自噬水平降低的效应。