新的甲状腺自身抗原钠/碘同向转运体与甲状腺疾病

甲状腺钠 /碘同向转运体 (NIS)是主要存在于甲状腺细胞的一种糖化膜蛋白 ,它在甲状腺激素合成中起重要作用。目前人NIS(hNIS)与鼠NIS(rNIS)的分子结构及其cDNA序列已经明确 ,并发现NIS异常与许多甲状腺疾病有关 ,近年更发现NIS是一种新的甲状腺自身抗原 ,与自身免疫性甲状腺病的发生密切相关。对NIS研究有着诱人的临床应用前景。

人甲状腺过氧化物酶抗原决定簇基因在E.coli细胞中的表达

目的:探索在E.coli BL21中表达hTPO抗原决定簇片段(AA568～AA874)。方法:将hTPO抗原决定簇基因(1702～2622,编号相对于起始密码子)连接到表达型载体pGEX-4T-3,构建重组表达质粒。然后转化E.coli BL21,IPTG诱导表达。表达产物采用亲和层析方法纯化,SDS-PAGE法测定其分子质量,ELISA法鉴定免疫学活性,考马斯亮蓝染色法定量。结果:成功地表达了hTPO抗原决定簇基因。纯化的GST-hTPO融合蛋白分子质量为61.4 ku,hTPO片段分子质量为37.6 ku。以此作为抗原按ELISA法分别与TPOAb阳性血清或阴性血清反应,结果表明GST-hTPO及hTPO片段均与TPOAb特异性结合。纯化的GST-hTPO产量为10 mg/L培养基;hTPO片段产量为1.2 mg/L培养基。结论:利用基因工程技术可获得高纯度的GST-hTPO融合蛋白及hTPO片段,产物具有良好的免疫学活性。

甲状腺素抗体的制备

文章选用了二种酯化条件,将L-3,5,3’,5’-四碘甲腺氨酸酯化成L-3,5,3’,5’-四碘甲腺氨酸甲酯。用此甲酯半抗原和牛血清白蛋白偶联,合成了甲状腺素免疫原。经免疫兔子获得了抗体。抗体的滴度为1:3200—14000,亲和常数为3.5×10~9l^2·mol^(-1),在L-3,5,3’-三碘甲腺氨酸过量L-3,5,3’,5’-四碘甲腺氨酸碘标记物100—1000倍时交叉反应值>0.0001。

免疫转印技术一次检测Graves病患者多种自身抗体的探讨

以免疫转印技术检测64例Graves病、14例桥本病、68例其它甲状腺病、34例类风湿性关节炎和70例健康献血员的血清抗甲状腺抗原的特异性抗体。Graves病（46．9％～59．4％）和桥本病患者（42．9％～92．8％）血清可检出分子量为54、52、50、37、36和28ku多肽成分的抗体；Graves病患者（62．5％～92．2％）血清还可检出分子量为59、45、27、14和13ku多肽成分的抗体；献血员血清仅4．3％～8．6％可检出54、52、50和37ku的低滴度抗体；其它甲状腺病和类风湿性关节炎患者血清未测出上述抗体。免疫转印技术还可同时观察患者血清中多种自身抗体，对Graves病的诊断和研究有一定价值。

Graves病甲亢和CD40基因单核苷酸多态性的相关性

目的:探讨CD40基因5′非翻译区域C/T多态性和Graves病(GD)甲亢发病的相关性。方法:采用序列特异性聚合酶链式反应-限制性内切酶酶切长度多态性(PCR-RFLP)方法分析106例GD甲亢患者和106例正常对照者CD40基因5′非翻译区域C/T多态性。结果:GD甲亢患者CC基因型明显高于正常对照组(49.1%vs32.1%),C等位基因频率明显高于正常对照组(63.7%vs50.5%)。结论:CD40基因5′非翻译区域的C等位基因和GD甲亢相关。

复发性自然流产与甲状腺自身抗体相关性研究

复发性自然流产（recurrent spontaneous abortion,RSA）是育龄期妇女的常见疾病,≥2次的自然流产患者约占育龄期妇女的5％,而≥3次的自然流产占1％～2％.引起RSA的病因复杂,包括染色体异常、子宫解剖异常、感染因素、内分泌异常、免疫功能紊乱等.有研究表明,自身免疫因素所致的流产在RSA中占20％.自身免疫因素是指从患者体内检出自身抗体,如抗心磷脂抗体、抗精子抗体、抗子宫内膜抗体等.甲状腺球蛋白（thyroglobulin,Tg）是甲状腺素合成的主要物质,甲状腺过氧化物酶（thyroid peroxidase,TPO）是甲状腺微粒体的主要抗原成分,是参与甲状腺素合成的关键酶,TPO与Tg均属于甲状腺自身抗原,TPO抗体（TPOAb）与Tg抗体（TgAb）是常用的反映甲状腺自身免疫状态的特异指标.