血清促甲状腺激素受体抗体(TRAb)测定在甲状腺疾病临床诊断中的应用价值

探究血清促甲状腺激素受体抗体(TRAb)测定在甲状腺疾病临床诊断中的应用价值。方法 选择我院2022年1月-2023年1月期间的70例甲状腺疾病患者作为研究对象,将其作为研究组,选择同期的70例健康体检者作为本研究的对照组,研究组中70例甲状腺疾病患者给予血清促甲状腺激素受体抗体(TRAb)测定,对比两组的实验室检测指标以及研究组治疗前后的血清TRAb含量、阳性率及强阳性率。结果 研究组中70例甲状腺疾病患者的各项实验室检测指标分别为:T3(6.34±1.26)nmol/l,FT3(9.26±1.34)pmol/l,T4(214.28±11.24)nmol/l,FT4(13.29±2.14)pmol/l。明显高于对照组中70例甲状腺疾病患者的实验室检测指标T3(2.15±0.38)nmol/l,FT3(5.02±1.69)pmol/l,T4(113.86±10.58)nmol/l,FT4(6.98±2.41)pmol/l。差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,研究组中70例甲状腺疾病患者的血清TRAb含量为(4.24±1.31)μ/l,明显低于治疗前的血清TRAb含量(17.28±0.19)μ/l,,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,研究组中70例甲状腺疾病患者的阳性率为17.14%,明显低于治疗前70例甲状腺疾病患者的阳性率35.71%,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后,研究组中70例甲状腺疾病患者的强阳性率为2.83%,明显低于治疗前70例甲状腺疾病患者的强阳性率14.29%,差异具有统计学意义(P<0.05);结论 血清促甲状腺激素受体抗体(TRAb)测定能够为甲状腺疾病临床诊断提供十分重要的参考价值,值得在临床上广泛应用。

促甲状腺激素受体抗体磁微粒化学发光法的建立和初步临床应用评估

目的 建立检测人血清促甲状腺激素受体抗体(TRAb)的磁微粒化学发光法,并进行初步临床应用评估。方法 采用竞争法原理,建立基于异硫氰酸荧光素(FITC)-抗FITC系统的检测血清TRAb的磁微粒化学发光法,并对方法的空白限、检出限、线性区间、精密度、抗干扰能力进行评估。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估该方法的临床诊断效能。比较磁微粒化学发光法与电化学发光法和促甲状腺激素受体刺激性抗体(TSI)化学发光法的一致性。了解郑州地区健康成人血清TRAb的分布情况。结果 建立的磁微粒化学发光法的空白限为0.3 IU·L^(-1),检出限为0.7 IU·L^(-1),线性区间为1.0~50.0 IU·L^(-1);低、中、高水平样本的重复性分别为5.36%、2.54%和2.12%,中间精密度分别为8.13%、3.92%和3.50%。胆红素≤250 mg·L^(-1)、血红蛋白(Hb)≤1.0 g·L^(-1)、三酰甘油(TG)≤10.0 g·L^(-1)、FITC-Na≤500 ng·mL^(-1)对磁微粒化学发光法检测TRAb无干扰,甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、促甲状腺激素(TSH)、促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)对磁微粒化学发光法检测TRAb无交叉反应。ROC曲线分析结果显示,磁微粒化学发光法检测TRAb诊断毒性弥漫性甲状腺肿(GD)的曲线下面积为0.998,最佳临界值为1.92 IU·L^(-1),敏感性为99.07%,特异性为95.00%。磁微粒化学发光法与电化学发光法具有良好的相关性(r2=0.941,P<0.0001),2种方法的偏差为0.090IU·L^(-1),总符合率为96.24%,一致性好(kappa=0.925);与TSI化学发光法的相关性一般(r2=0.671,P<0.000 1),2种方法的偏差为-2.613 IU·L^(-1),总符合率为88.15%,一致性较好(kappa=0.763)。采用百分位数法初步建立TRAb的参考区间为≤1.60 IU·L^(-1)。结论 成功建立了检测血清TRAb的磁微粒化学发光法,检测性能较好,可满足临床需求。

人小胶质细胞中促甲状腺激素受体的表达、分布及活性观察

目的 探讨人小胶质细胞(HMC3)中促甲状腺激素受体(TSHR)的表达、分布及活性。方法 取人小胶质细胞HMC3,以人甲状腺细胞及肝细胞作为对照,采用逆转录聚合酶链式反应检测TSHRN mRNA表达,以验证TSHR mRNA转录物。通过Western blotting法和免疫荧光染色分析测定HMC3细胞中TSHR蛋白水平及分布。将HMC3细胞分为0、20、50、100、200 ng/mL促甲状腺激素受体刺激抗体(TSAb)组和阴性对照组,将各组细胞加入100μmol/L磷酸二酯酶抑制剂IBMX预孵育60 min,然后向TSAb组分别加入相应浓度的TSHR特异性抗体TSAb培养24 h。使用免疫测定试剂盒测定各组环磷酸腺苷(cAMP)水平,验证TSHR在HMC3细胞中的活性。结果 在HMC3细胞中检测到TSHR mRNA,其序列与人甲状腺细胞及肝细胞来源的mRNA相同。TSHR蛋白在HMC3细胞的细胞膜中表达。与0 ng/mL TSAb组相比,20 ng/mL TSAb组cAMP水平无统计学差异,50、100、200 ng/mL TSAb组cAMP水平增加,且高浓度组cAMP水平高于低浓度组(P<0.05或<0.01)。结论 TSHR在人小胶质细胞中存在并表达于细胞膜,且具有信号传导功能。

妊娠早期蜕膜甲状腺激素受体信号异常对蜕膜化进程的影响及其与流产发生的关联

目的评估自然流产患者蜕膜血管生成情况,并探讨自然流产患者蜕膜中甲状腺激素受体信号的表达改变。方法收集行人流术的孕妇蜕膜。以自然流产患者作为实验组,以社会因素行人流术的健康孕妇作为对照组,收集两组人群蜕膜组织。采用Western blot方法,检测蜕膜组织中甲状腺激素受体-α(THR-α)和THR-β的核转位情况,同时使用免疫组化法定位蜕膜组织中THR-α和THR-β的分布。Western blot测定蜕膜组织中Ⅱ型脱碘酶(DIO2)的蛋白表达水平,免疫荧光法定位DIO2在蜕膜组织分布并测定荧光强度。使用免疫组化,以CD34作为内皮标志物测定蜕膜血管密度。Western blot检测血管内皮生长因子受体(VEGFR-1)的蛋白表达水平。结果对照组与流产组在年龄、妊娠天数、TSH、T3、T4等基本资料中,差异均无统计学意义。Western blot结果提示THR-α和THR-β蛋白核转位置下降,同时蜕膜组织免疫组化染色结果表明自然流产患者蜕膜甲状腺激素受体核转位减少(P<0.05)。Western blot结果表明流产组DIO2蛋白表达较对照组下降,提示自然流产孕妇蜕膜中,甲状腺激素代谢受到影响;免疫荧光实验结果显示流产组DIO2的荧光强度较对照组减弱(P<0.05)。免疫组化法CD34标记蜕膜小血管的结果显示,在流产组中,CD34^(+)血管数量下降,差异有统计学差异(P<0.05)。Western blot结果提示流产组和对照组中VEGFR-1无明显变化,差异无统计学意义。结论蜕膜局部甲状腺激素受体信号异常可能导致蜕膜血管生成减少,从而参与自然流产的发生。

基于我国WS/T促甲状腺激素受体抗体检测方法的性能验证

目的 基于我国卫生行业标准(WS/T)对迈瑞高敏磁微粒化学发光法(CLIA)检测TRAb进行性能验证。方法 参照最新WS/T文件,以Roche Cobase 601电化学发光法(ECLIA)作为已验证的检测方法,对迈瑞CLIA的精密度、基于患者血清的正确度、线性、检出限、参考区间进行验证,评价迈瑞与Roche的诊断符合率。结果 迈瑞CLIA检测TRAb的批内CV为1.56%~4.60%,实验室内CV为1.65%~5.19%;与Roche ECLIA的实验室相对差值为-3.6%;在0.02~44.00IU/L范围内线性拟合方程Y=1.040X+0.636,线性系数R2=0.990;24个检出限临界值数据22个(91.7%)≤0.3IU/L;20个健康体检者血清TRAb检测结果仅1个超出参考区间≤1.9IU/L;与Roche ECLIA的诊断总符合率90%,阳性符合率75%,阴性符合率100%,Kappa检验值0.7826(P<0.001)。结论 迈瑞高敏磁微粒CLIA的精密度、基于患者血清的正确度、线性范围、检出限均符合厂家声明,参考区间经验证可转移至我实验室使用,与Roche的诊断符合率较好,该方法性能能满足本医院临床检验需求。

甲状腺激素受体相互作用物11基因变异所致软骨生成不全IA型家系遗传学分析

软骨生成不全IA型是一种罕见的致死性疾病,以常染色体隐性方式遗传,该疾病的发生与人14号染色体上甲状腺激素受体相互作用物11(TRIP11)基因变异有关。本研究采集了1例超声检查疑似致命性骨骼发育不良胎儿的流产皮肤组织及其父母的静脉血,通过提取基因组DNA,应用全外显子组测序技术对胎儿组织及其父母进行平行测序,对疑似致病变异用Sanger测序进行验证;并对以往报道基因检测结果进行文献复习,结合文献复习探讨该病的临床特点。结果发现了胎儿TRIP11检测到复合杂合变异c.790C>T(p.R264*)/c.589-2A>G,两位点分别来自父亲和母亲,符合常染色体隐性遗传。本研究报道的TRIP11基因复合杂合变异尚未见报道,拓宽了软骨生成不全1A型的基因变异谱,为该家庭的遗传咨询及产前诊断提供了重要的分子基础。

甲状腺激素受体相互作用因子13在泌尿生殖系统恶性肿瘤中的研究进展

来自中胚层的泌尿生殖系统恶性肿瘤非常常见,严重威胁人们的健康和生活质量。泌尿生殖系统肿瘤发病机制复杂多样。研究表明,甲状腺激素受体相互作用因子13(TRIP13)在人类多种恶性肿瘤组织中异常高表达,可通过诱导肿瘤细胞上皮-间充质转化或介导纺锤体装配检查点沉默抑制细胞凋亡,增强细胞增殖能力,以及干预DNA双链断裂非同源末端修复效率,诱导染色体不稳定性。本文对TRIP13在泌尿生殖系统恶性肿瘤中的研究进展及相关机制进行总结,为临床工作中相关肿瘤的诊疗及预后研究提供理论基础及研究方向。

文蛤甲状腺激素受体MmTR互作蛋白筛选及其对Aroclor 1254胁迫的转录响应研究

环境中存在的甲状腺干扰物(thyroid disrupting chemicals,TDCs)可影响生物体内甲状腺激素(thyroid hormone,THs)的合成、分泌、转运、代谢和作用等过程,干扰THs稳态,引起THs水平失衡。甲状腺激素受体(thyroid hormone receptors,TRs)是一种存在于细胞核内的DNA结合转录因子,属于配体依赖型核激素受体超家族。TRs可与甲状腺激素响应元件(thyroid hormone response elements,TREs)结合,调控其转录表达。TDCs可作为生物体内TRs的配基,竞争性地与TRs结合,进而激活甲状腺信号通路,调控机体的整个甲状腺信号通路基因的转录表达。为探究TDCs对海洋无脊椎动物体内甲状腺激素是否具有干扰效应及其机制,本文通过构建文蛤消化盲囊组织酵母双杂交cDNA文库和文蛤甲状腺激素受体TR基因的诱饵载体pGBKT7-MmTR,在文库内进行MmTR的互作蛋白筛选和鉴定。结果表明,文蛤消化盲囊酵母双杂交cDNA文库中,cDNA片段大小在0.5~2 kb之间,库容约>2×10^(6) cfu。重组质粒pGBKT7-MmTR诱饵载体无毒性和自激活活性,可应用于酵母双杂交系统。经文库筛选共得到36个阳性克隆子,测序获得30个阳性克隆片段。随机选取BIRC2_3与MmTR基因进行点对点验证,结果为阳性,推测所有结果真实可靠。经比对分析,MmTR的29个潜在互作蛋白,功能涉及生长与发育过程、蛋白质代谢与免疫调控过程、应激响应过程和转录调控过程。不同浓度Aroclor 1254胁迫下幼体及成体文蛤体内MmTR基因潜在互作蛋白基因的转录响应分析发现,大多数潜在互作蛋白基因会对低浓度(10 ng·L^(-1)和20 ng·L^(-1))的Aroclor 1254短时间(1 d)暴露产生转录上调响应,且在成体阶段相关基因的转录响应更强烈;与成体阶段相比,文蛤幼体阶段暴露于高浓度(2000 ng·L^(-1))的Aroclor 1254中,生长与发育、蛋白质代谢与免疫调控过程相关的MmTR潜在互作蛋白基因RSPH9、N23、ferritin、BHMT、SCC4、PSMB5具有更明显的上调表达趋势;在成体文蛤体内,未知蛋白基因和位置功能蛋白基因的表达更易受到Aroclor 1254胁迫的影响。本研究结果为深入研究TDCs对无脊椎动物甲状腺激素的作用奠定基础,并且对海洋环境的保护有重要意义。

益气养阴化痰祛瘀法对甲状腺机能亢进症激素抗体及氧化应激因子表达的影响

目的研究益气养阴化痰祛瘀法对甲状腺机能亢进症(Hyperthyroidism,简称甲亢)患者激素抗体和氧化应激因子表达的影响。方法选取2022年1月—2023年12月收治的76例甲亢患者,按照随机数字表法分组,对照组(38例)采用常规西药治疗,观察组(38例)在对照组基础上加用益气养阴化痰祛瘀方治疗;治疗2个月后对比两组临床疗效、中医证候积分、甲状腺功能(各项激素水平)、氧化应激因子、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)的表达。结果观察组治疗总有效率为94.74%(36/38),高于对照组(76.32%,29/38),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组主症积分、次症积分和舌脉积分均降低,观察组低于对照组;两组促甲状腺激素(TSH)上升,游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)下降(P<0.05),观察组改善高于对照组;两组超氧化物歧化酶(SOD)升高,观察组SOD水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论益气养阴化痰祛瘀法用于甲亢患者的治疗取得确切治疗成果,可以有效改善甲状腺功能,通过调控甲状腺激素水平、TRAb、TPOAb以及氧化应激因子的表达以改善病情,缓解症状。

人促甲状腺激素受体A亚单位蛋白在昆虫细胞体系中的分泌性表达

目的拟构建昆虫细胞分泌表达体系,在草地夜蛾卵巢细胞分泌性促甲状腺激素受体(thyroid stimulating hormone receptor,TSHR)A亚单位蛋白。方法将TSHR A亚单位蛋白(22-289)和绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)基因连接到质粒,并通过转化、蓝白斑筛选获得重组杆粒,将其转染入sf9昆虫细胞收获重组杆状病毒,扩增并测定滴度。最终通过蛋白印迹实验鉴定重组蛋白的表达并优化表达条件。结果在蛋白表达体系的构建过程中,PCR鉴定和测序均证实了重组质粒和重组杆粒序列的正确性。将重组杆粒转染入细胞后观察到病毒出芽迹象,空斑实验鉴定P1代病毒的滴度为2×10^(7) pfu/m。蛋白印迹显示重组蛋白分子质量为55 ku,主要在培养基中。蛋白表达的最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)为1,最佳感染时程为72 h。结论本研究构建了TSHR A亚单位的昆虫细胞杆状病毒表达体系,该体系能够外泌性表达分子质量为55 ku左右的蛋白TSHR 22-289,且蛋白能够成功的糖基化修饰。该系统为其工业化平台的建设及生产提供前期基础,也针对日后TSHR蛋白的研究和Graves病的病因预防提供了有用的工具。

糖皮质激素受体基因表达与亚急性甲状腺炎相关性分析

目的分析亚急性甲状腺炎与糖皮质激素受体(GR)基因表达的相关性。方法选取2018年4月至10月天津市第一中心医院收治的亚急性甲状腺炎患者60例,分为轻症组30例、重症组30例;同期20例健康体检者,设为对照组。采用RT-PCR方法测定各组患者GR基因表达水平,分析GR mRNA与亚急性甲状腺炎的相关性。结果疾病轻症、重症组GR-α的表达水平下降,GR-β表达水平升高(P<0.05);亚甲炎组内比较,重症组GR-α表达水平低于轻症组,GR-β表达水平高于轻症组(P<0.05)。Spearman分析显示,性别、年龄因素与病情严重程度无关;患者病程与亚急性甲状腺炎病情严重程度存在正相关;GR-αmRNA与患者病情严重程度存在负相关;GR-βmRNA与患者病情严重程度存在正相关。Logistic回归分析显示,GR-αmRNA、GR-βmRNA是亚急性甲状腺炎的影响因素。结论亚急性甲状腺炎的发生与发展中,GR基因表达起到重要作用。病情严重程度与GR-αmRNA、GR-βmRNA相关,可作为早期预测病情的重要指标。

促甲状腺激素受体抗体(TRAb)测定的临床价值

目的:探讨血清TRAb测定对甲状腺疾病的临床价值。方法:采用放射受体分析和放射免疫分析测定210例甲状腺疾病患者血清TRAb和T3、T4、TSH、FT3、FT4含量,以T3、T4、TSH、FT3、FT4含量为标准分为单纯性甲状腺肿组、甲减组、甲亢组、甲亢缓解组;以38例健康人血清中TRAb和T3、T4、TSH、FT3、FT4含量作为对照组。结果:单纯性甲状腺肿组血清TRAb含量与正常对照组无显著差异(P>0.05);甲亢组、甲减组血清TRAb含量明显高于正常对照组(P<0.001);甲亢缓解组血清TRAb含量与甲亢组差异显著(P<0.05),与正常组比较亦有显著性差异(P<0.05);血清TRAb含量与各组间T3、T4、TSH、FT3、FT4及TSH浓度之间无显著相关性(P>0.05)。结论:监测血清TRAb含量对甲状腺疾病的诊断、鉴别诊断、疗效观察、预后判断有重要的临床价值。

甲状腺激素受体(TR)基因突变及其下游通路与肿瘤相关研究进展

信号通路是研究肿瘤发生发展、预防及治疗的重要领域之一,现已证实MAPK和PI3K等通路是肿瘤发生发展的重要信号通路,甲状腺激素(TH)及其受体(TR)可以影响这些通路起到抑制癌细胞生长和转移的作用,并逐渐成为研究的热点。而研究发现多种肿瘤存在TR基因突变现象,TR基因突变影响了TH/TR调解下游通路的功能,并成为下游原癌基因激活的诱因。近年研究发现了TH/TR介导的β-连环蛋白(β-catenin)降解机制,不仅丰富了它们在肿瘤发生发展中的作用,并进一步为突变受体对下游原癌基因的持续激活提供了理论依据。相信随着对其下游通路研究的进一步深入,最终会指导临床,为肿瘤预防和分子靶基因治疗提供新的理论依据。

甲状腺激素受体TRαA基因在牙鲆不同变态发育阶段中的表达差异

为了探讨甲状腺激素受体TRαA基因在牙鲆不同变态发育阶段中的表达差异,以及甲状腺激素T4和硫脲处理对TRαA基因表达的影响,采用了半定量RT-PCR法测定牙鲆不同发育阶段头部甲状腺激素受体TRαA mRNA水平。结果显示,牙鲆不同变态发育阶段甲状腺激素受体TRαA基因表达存在明显差异,从受精卵到变态期TRαA表达量呈缓慢增加趋势,到24日龄出现第一个表达高峰,随后表达量下降,30日龄之后随日龄增加表达量又逐渐增加,至变态高峰期38日龄出现第二个表达高峰,而且高于第一个表达高峰,至成鱼表达量再次下降至较低水平。甲状腺激素T4处理组和硫脲处理组与同日龄正常组相比,TRαA的表达也有明显差异,在甲状腺激素T4处理组中TRαA表达降低,而在硫脲处理组中TRαA表达反而增高。甲状腺激素T4对变态期牙鲆TRαA基因转录可能有下降调节作用。

促甲状腺激素释放激素受体-1(TRH-R1)蛋白在大鼠出生后睾丸不同发育阶段的表达和定位

目的 研究促甲状腺激素释放激素受体- 1 (thyrotrophin releasing hormonereceptor- type 1, TRH- R1) 在大鼠睾丸出生后不同发育阶段的表达, 探讨其在生殖发育调节中的作用。方法 应用蛋白质免疫印迹杂交技术以及免疫组织化学ABC法检测TRH R1在8d、15d、20d、35d、60d和90d大鼠睾丸中的表达和定位, 并结合图像分析技术对免疫组化结果进行统计学分析观察其在发育过程中的变化。结果 免疫印迹杂交发现TRH R1蛋白表达于15d以后各阶段的大鼠睾丸; 而运用免疫组化在第8d即检测到TRH -R1的表达, 以后发育过程中的各个阶段均有阳性反应细胞, TRH- R1定位于大鼠睾丸的间质细胞; 免疫反应阳性物均位于胞膜和胞质, 胞核区为阴性; 图像分析结果表明, 随着大鼠睾丸的发育,TRH -R1表达量呈增多趋势, 且具有统计学差异(P<0. 01)。结论 本实验证明TRH- R1 在出生后8d大鼠的睾丸内即有表达, 并持续表达于其后各个发育阶段; TRH- R1定位于睾丸的间质细胞, 其表达量随着增龄变化呈增多趋势, 即同发育过程相关。

甲状腺疾病患者促甲状腺激素与甲状腺自身抗体情况分析

目的:分析甲状腺疾病患者促甲状腺激素与甲状腺自身抗体情况。方法:选取2022年1—12月泰安八十八医院收治的甲状腺功能减退症患者30例作为甲减组,桥本甲状腺炎(HT)患者30例作为HT组,毒性弥漫性甲状腺肿(GD)患者30例作为GD组;另选取健康体检者30例作为对照组。比较四组促甲状腺激素(TSH)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、促甲状腺激素受体抗体(TRAb)水平及阳性率。结果:四组TSH水平比较,甲减组<对照组<GD组、HT组,差异有统计学意义(P<0.05);GD组、HT组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。四组TGAb、TPOAb水平比较,对照组<GD组<甲减组<HT组,差异有统计学意义(P<0.05)。四组TRAb水平比较,甲减组高于对照组、GD组、HT组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组、GD组、HT组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。甲减组TSH阳性率高于对照组、GD组、HT组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组、GD组、HT组TSH阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。对照组TGAb、TPOAb阳性率低于GD组、甲减组、HT组,差异有统计学意义(P<0.05);GD组、甲减组、HT组TGAb、TPOAb阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。GD组TRAb阳性率高于对照组、HT组、甲减组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组、HT组、甲减组TRAb阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TSH、甲状腺自身抗体在不同甲状腺疾病患者及健康者中有所差异,可用于辅助诊断甲状腺疾病。

血清TPO-Ab、TG-Ab和TR-Ab在亚临床甲状腺功能减退合并妊娠期高血压中预测妊娠结局的临床价值

目的分析亚临床甲状腺功能减退(亚甲减)合并妊娠期高血压(妊高症)患者血清中甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)、甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)和促甲状腺激素受体抗体(TR-Ab)表达水平以及对妊娠结局的临床预测价值。方法选取2020年8月—2023年3月在西安西北妇女儿童医院建立生育档案、产检并生产的妊娠期亚甲减孕妇242例,根据是否合并妊高症可分为妊娠亚甲减组68例和亚甲减合并妊高组174例,另选取同时期正常妊娠孕妇242例作为正常妊娠组;采用电化学发光免疫分析法检测血清TPO-Ab、TG-Ab和TR-Ab表达水平;多因素Logistic回归分析妊娠期亚甲减合并高血压患者不良妊娠结局的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清TPO-Ab、TG-Ab和TR-Ab表达水平对亚甲减合并妊高症患者妊娠结局的预测价值。结果正常妊娠组、妊娠亚甲减组、亚甲减合并妊高组血清TPO-Ab、TG-Ab和TR-Ab表达水平依次显著升高(F/P=85.036/<0.001、26.675/<0.001、23.086/<0.001);正常妊娠组、妊娠亚甲减组、亚甲减合并妊高组促甲状腺激素(TSH)依次升高(F/P=85.052/<0.001);与良好妊娠结局患者比较,不良妊娠结局患者收缩压、舒张压、TSH、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、TPO-Ab、TG-Ab和TR-Ab表达水平显著升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著降低,差异均有统计学意义(t/P=3.852/<0.001、2.421/0.017、2.244/0.026、2.342/0.020、2.835/0.005、2.707/0.007、3.475/0.001、3.399/0.001、2.636/0.009、4.280/<0.001);收缩压、舒张压、TPO-Ab、TG-Ab、TR-Ab、TC和LDL-C升高是妊娠期亚甲减合并高血压患者不良妊娠结局的危险因素[OR(95%CI)=3.819(1.376~10.603)、3.235(1.198~8.739)、5.917(2.341~14.953)、9.043(2.924~27.965)、1.768(1.252~2.496)、2.534(1.085~5.921)、4.010(1.559~10.314)];血清TPO-Ab、TG-Ab和TR-Ab及三者联合预测妊娠期亚甲减合并高血压患者妊娠结局的AUC分别为0.723、0.701、0.735、0.837,三者联合优于各自单独预测效能(Z/P=2.317/0.021、2.764/0.006、2.107/0.035)。结论亚甲减合并妊高症患者血清中TPO-Ab、TG-Ab和TR-Ab表达水平显著升高,三者联合预测不良妊娠结局的价值更高,可作为妊娠结局预测的生物学指标。

hTRIP15对甲状腺激素受体功能的影响

目的确立人甲状腺激素受体相互作用蛋白15(hTRIP15)对甲状腺激素受体(TR)功能的影响。方法应用融合蛋白、蛋白体外翻译及谷胱苷肽S转移酶“拉下”(GSTpulldown)试验研究蛋白—蛋白的相互作用,凝胶阻滞(gelshift)试验检测蛋白-DNA的结合活性。结果经大肠杆菌表达hTRIP15融合蛋白或体外翻译TRα所显示的分子量与预测大小相吻合。hTRIP15及hTRIP15N末端均可与TRα相互作用;hTRIP15抑制TR与TR反应元件(TRE)结合,且增加hTRIP15剂量时更明显。结论提示hTRIP15作为共抑制因子调节TR对靶基因的转录,hTRIP15N端是TR结合功能域,而C端可能为调节功能域。

促甲状腺激素受体膜外区基因突变与毒性多结节性甲状腺肿的相关性研究

目的:探讨毒性多结节性甲状腺肿(TMG)促甲状腺激素受体(TSHR)膜外区基因突变情况。方法:将12例TMG患者手术切除的病变组织及其周围正常甲状腺组织行光镜检查,提取基因DNA,对TSHR膜外区行PCR、DNA测序。结果:12例TMG标本中发现3例存在膜外区基因突变(3/12,25%),其中1例为点突变,另2例为移码突变;对照组未见基因改变。结论:TSHR的膜外区基因突变可能在TMG发生中发挥一定作用。

牙鲆甲状腺激素受体TRαA蛋白的特征分析

属于核受体超家族成员的甲状腺激素受体TRαA在牙鲆骨骼肌和消化管上皮细胞中强烈表达,调节其组织特异性发育,在牙鲆变态中对其形态结构和生理功能变化起着重要的作用。为了预测TRαA蛋白的抗原表位、二级结构及三维结构,分析该基因的结构特征。我们以TRαA蛋白序列为基础,采用Garni-er-Robson方法、Chou-Fasman方法和Karplus-Schuhz方法预测TRαA蛋白质的二级结构;用Kyte-Dooht-tle方案预测蛋白质的亲水性;用Emini方案预测蛋白质的表面可能性;用Jameson-Wolf方案预测氨基酸的抗原性指数,利用PROSITE数据库在线网络服务器与SMART服务器、结合Cn3D软件分析牙鲆TRαA蛋白三维结构,为实验方法探索TRαA蛋白的抗原表位和制备多克隆抗体提供理论依据。