甲状腺激素受体相互作用物11基因变异所致软骨生成不全IA型家系遗传学分析

软骨生成不全IA型是一种罕见的致死性疾病,以常染色体隐性方式遗传,该疾病的发生与人14号染色体上甲状腺激素受体相互作用物11(TRIP11)基因变异有关。本研究采集了1例超声检查疑似致命性骨骼发育不良胎儿的流产皮肤组织及其父母的静脉血,通过提取基因组DNA,应用全外显子组测序技术对胎儿组织及其父母进行平行测序,对疑似致病变异用Sanger测序进行验证;并对以往报道基因检测结果进行文献复习,结合文献复习探讨该病的临床特点。结果发现了胎儿TRIP11检测到复合杂合变异c.790C>T(p.R264*)/c.589-2A>G,两位点分别来自父亲和母亲,符合常染色体隐性遗传。本研究报道的TRIP11基因复合杂合变异尚未见报道,拓宽了软骨生成不全1A型的基因变异谱,为该家庭的遗传咨询及产前诊断提供了重要的分子基础。

甲状腺激素受体相互作用因子13在泌尿生殖系统恶性肿瘤中的研究进展

来自中胚层的泌尿生殖系统恶性肿瘤非常常见,严重威胁人们的健康和生活质量。泌尿生殖系统肿瘤发病机制复杂多样。研究表明,甲状腺激素受体相互作用因子13(TRIP13)在人类多种恶性肿瘤组织中异常高表达,可通过诱导肿瘤细胞上皮-间充质转化或介导纺锤体装配检查点沉默抑制细胞凋亡,增强细胞增殖能力,以及干预DNA双链断裂非同源末端修复效率,诱导染色体不稳定性。本文对TRIP13在泌尿生殖系统恶性肿瘤中的研究进展及相关机制进行总结,为临床工作中相关肿瘤的诊疗及预后研究提供理论基础及研究方向。

甲状腺激素受体相互作用因子4基因多态性与阿尔茨海默病的相关性研究

目的 探索甲状腺激素受体相互作用因子4 （TRIP4）基因rs4776494多态性与阿尔茨海默病的相关性.方法 运用病例对照研究设计,收集安徽及周边地区77例拟诊为阿尔茨海默病患者和80例正常健康对照.通过聚合酶链反应（PCR）及测序的方法,比较病例组和对照组TRIP4rs4776494的等位基因及基因型频率的差异.并对每例研究对象进行简易精神状态检查表（MMSE）、临床痴呆评定量表（CDR）、痴呆伴精神行为异常（BPSD）量表检测.结果 TRIP4基因rs4776494的TT、CT和CC基因型在病例组和对照组中的频率公布[TT、CT、CC基因频率分别是AD组：57/77（74.02％）、18/77 （23.38％）、2/77（2.6％）;正常组：38/80（47.5％）、39/80（48.75％）、3/80（3.75％）]均差异有统计学意义（P＜0.01）.病例组中TRIP4基因携带者BPSD出现率明显高于非携带者（P＜0.05）.结论 TRIP4（rs4776494）T型等位基因是AD的风险基因.TRIP4基因可能在一定程度上促进了患者精神症状的发生.

甲状腺激素受体相互作用因子13在B细胞淋巴瘤组织中的表达及其临床意义

目的探讨甲状腺激素受体相互作用因子13(TRIP13)在B细胞淋巴瘤组织中的表达及其临床意义。方法选取2018年9月至2020年11月在嘉兴市第二医院就诊后进行淋巴结活检,并留取多余的新鲜淋巴结活检组织冻存的B细胞淋巴瘤患者44例为研究对象,参照2016年WHO对B细胞淋巴瘤分型诊断标准,将44例患者分为惰性淋巴瘤组20例和侵袭性淋巴瘤组24例。采用RT-PCR法检测B细胞淋巴瘤组织中TRIP13 mRNA表达水平,比较惰性淋巴瘤组和侵袭性淋巴瘤组TRIP13 mRNA表达水平。采用En Vision免疫组化染色法检测TRIP13蛋白表达情况。根据TRIP13免疫组化表达情况,将B细胞淋巴瘤患者分为TRIP13阴性组(0)和TRIP13阳性组(≥1+),比较两组患者性别、年龄、B细胞淋巴瘤分型情况、增殖指数(Ki-67)、乳酸脱氢酶、β2微球蛋白、白蛋白水平、T辅助细胞比例、活化CD4^(+)细胞比例、活化CD8^(+)细胞比例及CD4^(+)/CD8^(+)等临床特征;再根据TRIP13免疫组化表达强度,将TRIP13阳性患者分为TRIP13弱阳性组(1+)和TRIP13强阳性组(≥2+),比较两组患者上述临床特征。结果惰性淋巴瘤组和侵袭性淋巴瘤组TRIP13 mRNA表达水平分别为0.37(0.17,1.36)和0.69(0.28,1.15),两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。TRIP13阳性组患者TRIP13 mRNA表达水平、Ki-67水平及活化CD8^(+)细胞比例均高于TRIP13阴性组,T辅助细胞比例、活化CD4^(+)细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)均低于TRIP13阴性组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。TRIP13弱阳性组TRIP13 mRNA表达水平、Ki-67水平、活化CD8^(+)细胞比例均低于TRIP13强阳性组,活化CD4^(+)细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)均高于TRIP13强阳性组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论B细胞淋巴瘤组织中TRIP13阳性及强阳性与更高的Ki-67水平、活化CD8^(+)细胞比例及更低的活化CD4^(+)细胞比例有关,提示TRIP13阳性可能和肿瘤细胞增殖及免疫调控异常等发病机制有关。

miR-551在甲状腺癌患者中的表达及靶向ERBB4对SW579细胞移植瘤生长的影响

目的 探讨miR-551在甲状腺癌患者中的表达及靶向ERBB4对SW579细胞移植瘤生长的影响。方法 选取2019年1月-2022年3月于我院病理科采集并保存的甲状腺乳头状癌组织及其配对的癌旁组织100例。将SW579细胞随机分为Control组、miR-NC组、miR-551组和miR-551+pcDNA-ERBB4组。RTPCR检测甲状腺癌组织和细胞中miR-551表达,分析甲状腺癌组织中miR-551表达和临床病理特征相关性;CCK-8、Transwell法、流式细胞仪分别检测细胞增殖、侵袭和凋亡率;蛋白质印迹法检测细胞中ERBB4蛋白表达;荧光素酶活性基因报告检测miR-551和ERBB4靶向关系。建立裸鼠皮下移植瘤模型,分为miR-NC组和miR-551组,比较两组裸鼠肿瘤体积;TUNEL检测肿瘤组织细胞凋亡率。结果 甲状腺癌组织中miR-551表达低于癌旁组织(P<0.05)。与甲状腺上皮细胞相比(1.00±0.10),甲状腺癌细胞中miR-551表达(0.32±0.04)明显降低(P<0.05)。与Control组相比,miR-551组细胞中miR-551表达(1.28±0.13)和细胞凋亡率(25.72±1.78)明显增加,24 h、48 h细胞活力(分别为52.38±5.46、32.29±3.17)、细胞侵袭数目(81.06±6.32)和细胞中ERBB4蛋白(0.46±0.05)表达明显降低(P<0.05);与miR-551组相比,miR-551+pcDNA-ERBB4组细胞中miR-551表达和细胞凋亡率(7.69±0.82)明显降低,24 h、48 h细胞活力(分别为85.11±7.61、71.56±6.82)、细胞侵袭数目(136.82±7.54)和细胞中ERBB4蛋白表达(0.84±0.08)明显增加(P<0.05);与miR-NC组(1.00±0.10)相比,转染野生型ERBB4(ERBB4-WT)时miR-551组荧光素酶活性明显降低(0.34±0.04)(P<0.05);与miR-NC组相比,miR-551组裸鼠肿瘤体积明显减少,肿瘤组织中细胞凋亡率(51.62±4.31)明显升高(P<0.05)。结论 甲状腺癌组织中miR-551呈低表达,过表达miR-551可靶向调控ERBB4抑制甲状腺癌细胞增殖和侵袭,诱导甲状腺癌细胞凋亡。

高频彩超联合血清LAG-3 FGFR-4对甲状腺癌的诊断价值

目的:探讨血清淋巴细胞活化基因-3(LAG-3)、成纤维生长因子受体4(FGFR-4)在甲状腺癌(TC)中的表达,并联合高频彩超对TC的诊断价值。方法:选取2020年12月至2023年12月期间在本院收治的203例甲状腺病变患者为研究对象,根据病理学检查结果将其分为TC患者作为TC组(n=108),甲状腺良性病变患者为非TC组(n=95)。采用ELISA法测定血清LAG-3、FGFR-4表达水平;ROC曲线分析血清LAG-3、FGFR-4对TC的诊断效能;四格表法分析高频彩超联合血清LAG-3、FGFR-4水平对TC的诊断效能。结果:与甲状腺未分化癌相比,甲状腺乳头状癌、甲状腺滤泡状癌、甲状腺髓样癌血清LAG-3水平显著升高,血清FGFR-4水平显著降低(P<0.05)。与非TC组相比,TC组血清LAG-3水平显著降低,血清FGFR-4水平显著升高(P<0.05)。TC组PSV、RI水平显著高于非TC组(P<0.05)。高频彩超联合血清LAG-3、FGFR-4诊断TC的准确率为86.70%,敏感度为96.30%,特异度为75.79%。其中,三项联合诊断的敏感度高于高频彩超、血清LAG-3、FGFR-4单独诊断(P<0.05)。结论:TC患者的血清LAG-3水平显著降低,血清FGFR-4水平显著升高,高频彩超联合血清LAG-3、FGFR-4对TC具有更高的诊断效能。

成髓细胞瘤转录因子第2亚型和甲状腺激素受体相互作用蛋白6在胃癌组织的表达及其临床意义

目的:探讨成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)和甲状腺激素受体相互作用蛋白6(TRIP6)的表达与胃癌临床病理因素和预后之间的关系。方法:选取大庆市龙南医院(齐齐哈尔医学院第五附属医院)和广东医科大学附属医院2018年11月至2022年11月病理资料完整的105例胃癌组织标本和对应癌旁组织标本,应用免疫组织化学方法检测上述胃癌组织和对应癌旁组织中MYBL2和TRIP6表达水平,采用χ^(2)检验进行相关分析。结果:胃癌组织中MYBL2表达率明显高于对应癌旁组织中MYBL2表达率[74.29%(78/105)比32.38%(34/105)],差异有统计学意义(χ^(2)=37.041,P<0.01)。MYBL2表达水平与胃癌患者TNM分期、淋巴结转移明显相关(χ^(2)=6.881、5.735,P<0.05),MYBL2表达水平与胃癌患者年龄、组织学分化程度、性别无明显相关(χ^(2)=0.008、0.037、0.059,P>0.05)。胃癌组织中TRIP6表达率明显高于对应癌旁组织中TRIP6表达率[66.67%(70/105)比27.62%(29/105)],差异有统计学意义(χ^(2)=32.124,P<0.01)。TRIP6表达水平与胃癌患者组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显相关(χ^(2)=4.952、6.983、6.217,P<0.05),TRIP6表达水平与胃癌患者年龄、性别无明显相关(χ^(2)=0.179、0.175,P>0.05)。结论:胃癌组织中MYBL2和TRIP6表达水平升高,MYBL2和TRIP6参与胃癌的发生、发展过程,MYBL2和TRIP6可以作为预测胃癌患者预后的生物学指标。

雌激素受体β基因多态性与血脂水平的研究

目的:探讨中国人群雌激素受体β(ERβ)基因多态性的分布情况及其与血脂水平的关系。方法:采用PCR-RFLP技术检测湖北地区131例正常人的ERβ基因RsaI和AluI酶切多态性,同时检测血脂水平。结果:分析ERβ基因RsaI和AluI两个酶切位点的基因多态性,分别以Rr型、aa型最多,而以RR型、AA型最少,其分布在男女组间无显著性差异(P>0.05)。ERβRsaI和AluI不同基因型间血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、apoAI、apoB水平均有一定差异,但无统计学意义(P>0.05)。结论:ERβ基因RsaI和AluI酶切多态性可能不影响人群的血脂水平。

促甲状腺激素受体与TTF-1、Pax-8在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的探讨促甲状腺激素受体(TSHR)、甲状腺特异性转录因子-1(TTF-1)、成框基因8编码的转录因子(Pax-8)在甲状腺乳头状癌(PTC)、桥本氏病(HT)合并甲状腺乳头状癌、结节性甲状腺肿(NG)与正常甲状腺组织中的表达及意义。方法收集2018年9月至2019年6月在某院内分泌科确诊并在甲状腺外科行手术治疗的甲状腺组织,包括单纯PTC 16例、HT合并PTC 24例,NG 32例及癌旁正常甲状腺组织40例。将术中获得的甲状腺组织进行脱水、透明、包埋处理,分别行TSHR、TTF-1、Pax-8的免疫组织化学染色,显微镜下观察染色结果。采用χ^2检验进行多组间率的比较,差别有统计学意义时采用χ^2分割做两两比较。结果1)TSHR、TTF-1在甲状腺组织的强阳性表达在4组间的差别均有统计学意义(P<0.001,P=0.004),Pax-8在甲状腺组织的强阳性表达在4组间的差别无统计学意义(P=0.642)。2)调整检验水准α′=0.008,进一步两两比较发现:TSHR在PTC组的强阳性表达低于在NG组与癌旁正常组织(P<0.001,P=0.002),在HT合并PTC组的强阳性表达低于在NG组(P=0.001),TTF-1在HT合并PTC组的强阳性表达低于在NG组(P=0.002);其他组两两比较均无统计学意义(P>0.008)。3)在全部PTC组织中,TSHR、TTF-1的阳性表达与性别、年龄、肿瘤直径、淋巴结转移等均无关;Pax-8的阳性表达在有淋巴结转移者低于无淋巴结转移者(P=0.030),与性别、年龄、肿瘤直径无关。结论TSHR与TTF-1在PTC中的强阳性表达低于NG和癌旁正常甲状腺组织,Pax-8在不同类型甲状腺组织中表达无差别。Pax-8在PTC组织中的低表达易出现淋巴结转移。

胶质瘤组织中TRIP4和DDIT4水平表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的研究胶质瘤组织中甲状腺激素受体结合蛋白4(thyroid hormone receptor interacting protein 4,TRIP4)和DNA损伤诱导转录因子4(DNA damage inducing transcription factor 4,DDIT4)水平表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取2018年2月~2019年2月河北医科大学第一医院收治的94例胶质瘤患者为研究对象。应用免疫组织化学法检测组织中TRIP4和DDIT4蛋白表达。比较不同临床病理特征脑胶质瘤组织中TRIP4和DDIT4蛋白表达。采用Kaplan-Meier生存曲线分析不同TRIP4和DDIT4蛋白表达胶质瘤患者生存预后的差异。单因素和多因素COX回归分析影响胶质瘤患者生存预后的因素。结果胶质瘤组织中TRIP4(68.09%)和DDIT4(65.96%)蛋白阳性率高于瘤旁组织(13.83%,10.64%),差异具有统计学意义(χ^(2)=57.212,60.866,均P<0.05)。胶质瘤组织中TRIP4与DDIT4蛋白表达呈显著正相关性(r=0.722,P<0.05)。WHO分级Ⅲ级、肿瘤直径≥3cm胶质瘤组织中TRIP4和DDIT4蛋白阳性率均高于WHO分级Ⅰ~Ⅱ级、肿瘤直径<3cm胶质瘤组织,差异具有统计学意义(χ^(2)=6.393~14.754,均P<0.05)。TRIP4阳性表达组和阴性表达组三年总体生存率分别为37.50%(24/64),66.67%(20/30),TRIP4阳性表达组三年累积生存率低于阴性表达组,差异具有统计学意义(Log-rankχ^(2)=5.949,P=0.015)。DDIT4阳性表达组和阴性表达组三年总体生存率分别为37.10%(23/62),70.00%(21/30),DDIT4阳性表达组三年累积生存率低于阴性表达组,差异具有统计学意义(Log-rankχ^(2)=7.642,P=0.006)。肿瘤直径≥3cm(HR=1.614,P=0.000),WHO分级Ⅲ级(HR=1.790,P=0.000),TRIP4阳性表达(HR=1.665,P=0.000),DDIT4阳性表达(HR=1.476,P=0.000)是影响胶质瘤患者生存预后的独立危险因素。结论胶质瘤组织中TRIP4和DDIT4蛋白表达升高,两者与肿瘤直径及WHO分级相关,是潜在的评估胶质瘤预后的肿瘤标志物。

肝细胞肝癌中DDX24、TRIP12表达与上皮间质转化及临床预后的关系

目的探讨肝细胞肝癌(HCC)中DEAD盒解旋酶24(DDX24)、甲状腺激素受体相互作用因子12(TRIP12)表达,分析两者与上皮间质转化(EMT)及临床预后的关系。方法回顾性选取2019年2月—2021年1月中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院肝胆外科手术治疗的HCC患者96例。免疫组化检测癌组织和癌旁组织DDX24、TRIP12蛋白表达;采用实时荧光定量PCR检测DDX24、TRIP12和EMT指标[E-钙黏素(E-cad)、N-钙黏素(N-cad)及TWIST]表达;Pearson相关分析DDX24 mRNA、TRIP12 mRNA和EMT指标的相关性;绘制Kaplan-Meier曲线,Log-Rank检验分析DDX24 mRNA、TRIP12 mRNA高表达组和低表达组HCC患者预后的差异;多因素Cox比例风险模型分析影响HCC患者死亡预后的独立因素。结果HCC癌组织中DDX24、TRIP12阳性率显著高于癌旁组织(χ^(2)/P=109.714/<0.001,108.755/<0.001);与癌旁组织比较,HCC癌组织中DDX24、TRIP12、N-cad、TWIST mRNA表达较高,E-cad mRNA表达较低,差异均有统计学意义(t/P=35.810/<0.001,48.036/<0.001,25.015/<0.001,48.482/<0.001,38.069/<0.001)。HCC癌组织中DDX24 mRNA与TRIP12 mRNA表达呈正相关(r=0.701,P<0.001);DDX24 mRNA、TRIP12 mRNA均与N-cad mRNA、TWIST mRNA呈正相关,与E-cad mRNA呈负相关(r/P=0.723/<0.001,0.661/<0.001,0.706/<0.001,0.745/<0.001,-0.694/<0.001,-0.609/<0.001)。低分化程度、CNLC分期Ⅱ~Ⅲ期和有血管侵犯HCC患者癌组织中DDX24、TRIP12 mRNA高于高中分化程度、CNLC分期Ⅰ期和无血管侵犯者(DDX24:t/P=10.348/<0.001,18.474/<0.001,6.302/<0.001;TRIP12:t/P=25.661/<0.001,36.396/<0.001,14.928/<0.001)。DDX24 mRNA高表达组和低表达组3年总生存率分别为39.13%(18/46)、64.00%(32/50),2组生存曲线总体比较,差异具有统计学意义(Log rankχ^(2)=7.491,P=0.006);TRIP12 mRNA高表达组和低表达组3年总生存率分别为36.17%(17/47)、67.35%(33/49),2组生存曲线总体比较,差异有统计学意义(Log rankχ^(2)=8.146,P=0.004)。CNLC分期Ⅱ~Ⅲ期、低分化程度、血管侵犯、DDX24 mRNA高表达、TRIP12 mRNA高表达是影响HCC患者死亡预后的危险因素[HR(95%CI)=1.611(1.175~2.209),1.768(1.238~2.526),1.464(1.089~1.968),1.859(1.330~2.599),1.775(1.275~2.473)]。结论HCC癌组织中DDX24、TRIP12表达上调,与N-cad、TWIST呈正相关,与E-cad呈负相关,DDX24、TRIP12可能通过促进HCC肿瘤EMT的发生,促进HCC肿瘤的恶性进展,两者是影响HCC患者死亡预后的独立危险因素。

乳腺癌与甲状腺激素及甲状腺受体的关系研究

乳腺癌是最常见的女性恶性肿瘤之一,其发病率逐年上升且趋于年轻化。尽管其发病机制复杂,但激素与受体激活是肿瘤发生发展的主要机制。而影响激素如何激活或者抑制受体的转录和活性,是肿瘤机制研究的前沿和热点。研究发现三碘甲腺原氨酸(3,5,3'-tri-iodothyronine,T3)抑制细胞周期蛋白D1和T1基因表达,调节乳腺上皮细胞细胞周期的进程进而降低乳腺上皮细胞的增殖[1]。甲状腺激素可能通过允许作用对雌激素等产生影响[2]。Dinda等研究T47-D细胞系(表达较多雌激素受体)发现,T3影响其生长及增殖周期,提升 p53基因水平,促进 pRb蛋白磷酸化,且过程与雌激素受体信号通路交叉调节T47-D细的分化与增殖。有学者研究T3和雌二醇(E2)对人乳腺癌细胞株(MCF-7,T47-D)作用时发现,ER 拮抗剂抑制-tamoxifen抑制T3和 E2依赖的细胞增殖作用,T3协同增强E2对T47-D细胞株的增殖作用,还促进雌激素-雌激素受体所介导的基因表达,但这种效果较 E2作用较轻,这些研究证明T3协同E2促进乳腺癌细胞增殖,还增强 E2的促细胞分裂作用[3]。肿瘤易感基因101(TSG101)(与酵母菌 vps23基因同源的哺乳动物基因),负责细胞内蛋白质的分选、囊泡的运输、保持基因组的稳定性,在乳腺癌、甲状腺癌组织[4]中均存在过表达。TSG101的上游调控元件存在甲状腺转录因子2(TIF-2)和甲状腺激素受体结合位点,在转化原发性肿瘤细胞中,甲状腺激素可能差异参与对TSG101启动子活性的差异性调节过程,进一步影响疾病的发生发展[5],这些提示乳腺癌的发展受甲状腺激素的调节。但是甲状腺激素对乳腺癌产生影响的途经尚不十分清楚,且乳腺癌组织中是否有甲状腺激素受体的表达尚无较为明确的报道,但有研究对70例散发乳腺癌患者甲状腺激素受体(thyroid hormone receptor,TR)表达和突变情况进行研究,未发现乳腺癌组织中TR的表达,但在一些病例中,如原发性乳腺癌患者,继发性乳腺癌患者,进行 RNA和蛋白质水平的检测,发现 TRα和TRβ基因表达情况发生了特异性的改变[6],因此可以认为甲状腺受体的变化可能与乳腺癌的发生发展有关。

核受体协同因子与甲状腺疾病

甲状腺激素在一些器官的生长和分化发育方面起着重要作用，甲状腺激素是通过甲状腺激素受体（TR）调控基因表达，TR是配体依赖性转录因子，对基因转录的调控与配体的结合状态有关，无配体存在时，TR与核受体抑制因子相互作用．激活一系列蛋白质的活性（如组蛋白去乙酰化酶）使染色质结构变紧，阻止关键转录因子的进入，引起转录抑制。

激素受体作用的新概念

越来越多的证据表明,脂溶性维生素A和D可能是自然产生的分化诱导剂。这两种维生素的衍生物首先通过与细胞内受体蛋白结合发挥生物学作用,然后与基因组的特异区段相互作用,并调节靶基因转录。现已了解到维生素D和A受体是类固醇、甲状腺和维生素A酸总科的成员,己鉴定的这一核转录因子家族成员有30多个,包括配体尚待鉴定的若干受体。

CTLA4基因多态性与Graves病的关系

目的 探讨细胞毒T淋巴细胞相关抗原4（CTLA4）基因单核苷酸多态（SNP）rs10197319、rs1024161、rs231726、rs231804与弥漫性毒性甲状腺肿（Graves）病的关系。方法 以中国安徽蚌埠地区698例Graves病患者（Graves病组）和571名健康体检者（对照组）作为研究对象。应用TaqMan探针技术,分别检测两组的CTLA4基因SNP rs10197319、rs1024161、rs231726、rs231804基因型;同时检测Graves病患者促甲状腺激素受体抗体（TRAb）水平。结果 在4个SNP位点中,rs1024161_A与Graves病易感性显著相关（P=2.28×10-5,OR=1.43,95%CI：1.21~1.68）;Logistic回归分析提示rs1024161是Graves病的独立易感位点。在rs1024161_AA、rs1024161_AG、rs1024161_GG 3种基因型间比较,血清TRAb水平及其他临床表现的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 CTLA4基因上rs1024161与中国安徽蚌埠地区汉族人群Graves病明显相关,并且是一个独立易感位点。

人甲状腺激素受体相互作用蛋白15与甲状腺激素受体的相互作用

目的 确立人甲状腺激素受体相互作用蛋白 15 (hTRIP15 )与甲状腺激素受体 (TR)的相互作用及其作用方式。方法 应用酵母双杂交技术及半乳糖苷酶定性或定量测定。结果 将构建质粒 (BD TRIP15与AD TR)共转化AH10 9酵母细胞后 ,在高严格度选择的培养基 (SD Leu Trp Ade His) 10天克隆长出 ,相比阳性对照质粒 (BD P5 3 +AD Tag)共转后 3天克隆生长。将构建载体及对照载体转化Y187酵母菌株 ,检测LacZ报告基因的表达 (β gal单位 ) ,阳性对照质粒 (BD P5 3 +AD Tag)为 14 9.5 7± 0 .5 1,BD TRIP15 +AD TR为 3 .2 3± 10 .15 ,加入T3 后为 2 .0 2± 0 .0 8,而阴性对照质粒 (BD P5 3 +AD LamC)仅为 0 .0 2± 0 .0 1β gal单位 ,且T3 呈剂量依赖方式抑制两者的相互作用。结论 hTPIR15能与TR共相互作用 ,T3 呈剂量依赖方式抑制两者间的作用 ,仅在超大剂量时才可完全阻断hTRIP15与TRα间的作用。

血清IgG4与甲状腺相关性眼病的研究进展

甲状腺相关性眼病(thyroid-associated ophthalmopathy,TAO)是一种威胁视力的自身免疫性疾病,患者通常出现突眼、复视或斜视,严重者可能会有视神经受压,造成视力受损甚或失明。血清免疫球蛋白G4(immunoglobulin G4,IgG4)是一种特异性抗体,与多种自身免疫性疾病有关。目前研究发现部分TAO患者血清IgG4水平升高,这些患者往往病情更加严重。在眼病的发生发展中,IgG4可能诱导眼眶成纤维细胞生成透明质酸,促进自身抗体产生,IgG4可能单独或联合促甲状腺激素受体抗体在TAO的发病机制中发挥作用。已有研究显示血清IgG4与眼病的临床活动性和严重程度相关,高IgG4可能预示TAO处于炎症活动早期,及时干预可减缓其肌肉病变和眼眶纤维化的进程。因此,本文对相关文献进行综述,探讨血清IgG4与甲状腺相关性眼病的关系,以期对TAO患者进行更早期和更有效的临床管理。

乳腺癌组织中miR-216a-5p、TRIP4表达与患者病理特征和预后的关系

目的探讨乳腺癌组织中微小RNA(miRNA)-216a-5p、甲状腺激素受体相互作用蛋白4(TRIP4)表达与患者病理特征和预后的关系。方法选取85例乳腺癌患者,采用qRT-PCR法检测癌组织和癌旁组织中miR-216a-5p、TRIP4表达,并分析二者与患者临床病理特征的关系。随访3年,以二者均值将患者分为miR-216a-5p高表达组(≥0.430,44例)和miR-216a-5p低表达组(<0.430,41例),TRIP4高表达组(≥1.886,42例)和TRIP4低表达组(<1.886,43例),比较不同表达患者预后情况。结果乳腺癌、癌旁组织中miR-216a-5p相对表达量分别为0.430±0.109、1.012±0.166,TRIP4相对表达量分别为1.886±0.388、1.023±0.171,乳腺癌、癌旁组织中miR-216a-5p、TRIP4表达比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。乳腺癌组织中miR-216a-5p与TRIP4表达呈负相关(r=-0.637,P<0.05),二者与人表皮生长因子受体-2(HER-2)表达、Ki-67增殖指数、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。miR-216a-5p高表达组3年无进展生存率、总生存率高于miR-216a-5p低表达组,而TRIP4高表达组3年无进展生存率、总生存率小于TRIP4低表达组(P均<0.05)。结论乳腺癌组织中miR-216a-5p低表达,TRIP4高表达,二者与HER-2表达、Ki-67增殖指数、TNM分期、淋巴结转移和预后有关。

酵母双杂交诱饵蛋白RGS4融合表达质粒的构建及鉴定

目的研究糖皮质激素受体各个结构域与G蛋白信号转导负调节因子4(RGS4)之间是否存在相互作用,构建酵母双杂交系统诱饵蛋白融合质粒。方法采用RT-PCR方法扩增RGS4片断全长,酶切回收,将其连接至酵母双杂交系统诱饵蛋白质粒载体pGBKT7,构建重组质粒pGBKT7-RGS4,并经酶切和测序等方法鉴定后,使用Y187酵母菌检测重组质粒的自激活现象及毒性。然后,提取酵母总蛋白,采用Westernblot方法检测重组质粒在Y187内的表达情况,以鉴定其作为诱饵蛋白的可行性。结果RT-PCR扩增的RGS4基因片断电泳后,大小正确,重组质粒,pGBKT7-RGS4测序结果与GenBank中RGS4基因序列比对完全正确。重组质粒pGBKT7-RGS4双酶切鉴定、体外转录翻译实验,Westernblot等方法均证实重组质粒中的RGS4基因能够正确合成RGS4蛋白。转化酵母后排除重组质粒的自激活作用。结论构建重组质粒pGBKT7-RGS4,能够在Y187内正确表达,可作为酵母双杂交系统诱饵蛋白使用。

Graves病相关易感基因

格雷夫斯病（Graves disease,GD）,又称毒性弥漫性甲状腺肿,1835年由爱尔兰人Robert J.Graves最早详细描述而得名。GD是1种自身免疫性疾病,它在所有甲状腺毒性疾病中最常见,占60%～90%,在成年人的发病率约为5%,女性发病率高于男性[1]。GD的确切发病机制目前尚未完全阐明,但现有研究结果倾向于认为GD是1种由易感基因和环境因素共同作用所引发的疾病。