蚊媒甲病毒属病毒半巢式PCR方法的建立及应用

目的建立基于蚊媒甲病毒属病毒通用引物的半巢式PCR(RT-hemi-nested PCR)检测方法,用于甲病毒属病毒的实验室检测。方法根据GenBank中的甲病毒属病毒全基因组序列,在其保守区设计3条甲病毒属病毒通用引物,以辛德毕斯病毒(SINV)cDNA、基孔肯雅病毒(CHIKV)cDNA为模板优化条件建立半巢式PCR方法,验证该方法的敏感性及特异性,并对野外采集的蚊虫标本进行检测。结果敏感性检测结果显示,SINV、CHIKV的检测下限值分别为3×103和3×104拷贝/μl。特异性检测结果显示,该体系仅能扩增蚊媒甲病毒属病毒目的基因而不能扩增其他病毒。用该方法对野外采集的蚊虫标本进行检测,结果显示未扩增出阳性条带。结论建立的半巢式PCR检测方法特异性强、灵敏度高,可用于甲病毒属病毒感染的流行病学调查研究。

我国盖塔病毒研究概况与进展

我国在1964-2006年共分离到10株盖塔病毒(GETV),它们分别是M1、HB0215-3、HB0234、SH05-6、SH05-15、SH05-16、SH05-17、YN0540、YN0542和GS10-2株。现就我国的这10株GETV分离、鉴定、分布和分子生物学研究结果,以及与国外GETV代表株和鹭山病毒等分子生物学比较结果进行综述。

Construction of retroviral vector carrying HSV tk gene under control of human AFP enhancer core sequence and human pgk promotor *

AIM Tenstruct retroviral vector bringing HSV tk gene under control by human AFP enhancer core sequence and human pgk promotor.