蚕丝丝素中色氨酸含量及其在丝素纤维中的径向分布研究

通过双波长分光光度法和对二甲氨基苯甲醛显色法研究桑蚕春茧内、中、外各茧层丝素中的色氨酸含量和色氨酸在丝素纤维中的径向分布状况 ,并探讨了光、热处理后蚕丝丝素中色氨酸含量的变化 .结果表明 ,外、中、内各茧层丝素的色氨酸含量不一致 ,由外至内各茧层丝素中色氨酸含量依次降低 ;色氨酸在丝素纤维的径向分布不均一 ,呈现色氨酸在易溶落的最外表面层含量最多 ,次表层相对较少 ,中间层较多 ,而内层最少的分布状态 ;光或热处理均会破坏丝素中色氨酸 ,使色氨酸含量明显下降 .

甲硒氨酸耐热邻苯二酚2,3双加氧酶的高表达和分离纯化

甲硒氨酸多波长反常散射法是国际上 90年代发展的蛋白质晶体结构测定的新方法 ,该法得以实施的首要一步是获得硒取代 (硫 )的高纯蛋白质 .通过亚克隆将编码耐热邻苯二酚 2 ,3双加氧酶 (简称TCTD)的基因PHEB克隆至表达载体 pRSET ,得到了高表达质粒pRSET PHEB ,转入Met缺陷的菌株B834DE3.通过诱导表达和分离纯化得到了甲硒氨酸参入的TCTD .经质谱测定发现TCTD的所有 7个甲硫氨酸都被甲硒氨酸所替代 ,这为Se Met多波长反常散射法研究TCTD的晶体结构打下了基础 .