创伤性脑损伤患者血浆β-内啡肽、亮氨酸脑啡肽和甲硫氨酸脑啡肽的水平

目的探讨内源性阿片肽在创伤性脑损伤发病机制中的作用。方法采用放射免疫分析法(RIA)测定30例全麻颅脑手术患者和30例全麻非颅脑手术患者术前、术后及30例正常人血浆β-内啡肽(β-Endo-rhin,β-EP)、亮氨酸脑啡肽(leuthine enkephalin,LNK)和甲硫氨酸脑啡肽(mehionine enkephalin,MEK)的含量。结果 (1)60例手术患者术后血浆β-EP含量显著升高(P<0.01),两组比较差异无统计学意义(P>0.05);(2)颅脑手术患者术后血浆LNK含量显著高(P<0.01),与非颅脑手术者比较差异有统计学意义(P<0.01);(3)不同部位颅脑手术血浆LNK含量比较差异无统计学意义(P>0.05);(4)60例手术患者术后血浆MEK含量不升高,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);结论内源性阿片肽在创伤性脑损伤的病理生理过程中发挥作用不同。β-内啡肽在机体应激状态普遍升高,血浆中LNK的含量是创伤性脑损伤的特异性指标,LNK含量与脑损伤部位无关,MEK的含量变化与创伤性脑损伤无相关性。

甲硫氨酸脑啡肽对栉孔扇贝血细胞吞噬和包囊化作用的影响

用荧光显微技术研究了甲硫氨酸脑啡肽对栉孔扇贝血细胞在体外的吞噬作用和包囊化作用的影响进行了研究。结果表明,脑啡肽质量浓度为50μg/ml时血细胞的吞噬率和包囊化率均最低,25μg/ml时次之,5μg/ml时最高,并且均显著高于不加脑啡肽的对照组。质量浓度为5～50μg/ml脑啡肽对栉孔扇贝血细胞的吞噬作用和包囊化作用均有抑制作用,即脑啡肽在栉孔扇贝的免疫调节中起重要的作用。

甲硫氨酸-脑啡肽的分子动力学模拟

用高温淬火分子动力学模拟方法研究了甲硫氨酸脑啡肽(Metenkephalin)在真空中的构象性质.经聚类分析和能量优化得到了十三个低能构象,并与吗啡进行了空间拟合.模拟结果表明,Metenkephalin是一种构象柔性大的多肽分子,可具有多种构象,主要为Gly2-Gly3和Gly3-Phe4之间的β折叠型式.大多数的结构具有由氢键连接两个末端残基所形成的假大环,侧链和芳香环定位在假大环的同侧.模拟结果还表明,模型最大的特征是:酪氨酸残基中的氨基N相当于吗啡中哌啶环上的季胺N,酪氨酸残基中的酚环相当于吗啡中的酚环,苯丙氨酸残基中的芳香环相当于吗啡中环己烯环.此肽与吗啡在空间结构(药效基团)上非常相似,都满足阿片受体的要求.所以,它们可作用于同一受体.该模型也能为具有阿片效能的肽和非肽配体的药效团设计提供帮助.

大鼠伏核内5-羟色胺样和甲硫氨酸-脑啡肽样免疫反应阳性结构的观察

本文借助免疫组织化学技术,在光镜和电镜水平观察了大鼠伏核内5-羟色胺(5-HT)样和甲硫氨酸-脑啡肽(Met-ENK)样免疫反应阳性结构的分布。光镜观察:5-HT样免疫反应阳性的纤维和终末可见于伏核不同平面的各亚区,但内侧区和腹侧区的明显地多于背侧区和外侧区,尾段的阳性纤维多于吻段。根据伏核内5-HT样纤维的直径、行径和膨体的数量,可将其分为粗纤维、中等粗细纤维和细纤维3种,此3种纤维的区分以内侧区和腹侧区较明显。未见5-HT样阳性胞体。Met-ENK样免疫反应阳性的胞体仅见于腹侧区和内侧区腹侧部,少量散在分布。Met-ENK样阳性纤维和终末也主要分布于内侧区和腹侧区,外侧区和背侧区较少。Met-ENK样阳性纤维均属细纤维,行径弯曲,外观呈绒毛状。Met-ENK样阳性胞体、纤维和终末在吻尾方向上的分布无明显差异。电镜观察:5-HT样阳性轴突终末与阴性树突形成对称和非对称型轴树突触;Met-ENK样阳性树突与阴性轴突终末形成对称和非对称型轴-树突触。上述突触多见于内侧区和腹侧区。

扁玉螺体表和消化系统甲硫氨酸脑啡肽免疫组织化学定位

采用免疫组织化学strept avidin-biotin complex(S-ABC)法对甲硫氨酸脑啡肽(methionine-enkephalin,M-ENK)在扁玉螺(Neverita didyma)体表、消化系统各器官中的分布进行了研究。结果表明,扁玉螺的足上皮细胞、外套膜的内外上皮细胞以及食道、胃、肠道的黏膜上皮细胞均呈M-ENK阳性反应,且消化道中的阳性反应多集中于上皮细胞游离端;在食道腺的腺上皮中也有少量阳性细胞分布;肝是M-ENK阳性细胞分布较多的器官,主要分布在肝小叶中腺细胞边缘游离端。M-ENK在扁玉螺体表和消化系统各器官均有分布,且分布密度有所不同,可能与各部位的功能有关。

电针对疼痛患者血浆及小鼠脊髓甲硫氨酸脑啡肽、强啡肽及痛阈的影响

目的 :探讨 4～5Hz电针下 ,患者血浆及小鼠脊髓的甲硫氨酸脑啡肽 (MEK)及强啡肽 (Dyn)的变化与疼痛的关系。方法 :将针灸门诊患者电针前后的血浆和随机分为电针、对照两组的雄性BALB/C小鼠的脊髓匀浆 ,分别定量点于硝酸纤维素膜上 ,应用免疫反应性蛋白质斑点印迹技术 ,用Shimadu薄层层析扫描仪进行检测。患者在电针前后、小鼠在电针 /牵拉前后均用测痛仪检测痛阈。结果 :电针后患者血浆D(MEK)及D(Dyn)均升高 (P <0 .0 1) ,而小鼠脊髓两者均降低(P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,患者血浆及小鼠脊髓的D(MEK)比D(Dyn)变动显著。血浆或脊髓的D(MEK)与D(Dyn)变动呈正相关。血浆及脊髓D(MEK)分别与痛阈呈正相关 (r=0 846 ,P <0 0 1)或呈负相关 (r=- 0 6 2 5 ,P <0 0 5 )。但血浆及脊髓的D(Dyn)与痛阈不相关。结论

不同时辰电针对大鼠脑内甲硫氨酸脑啡肽含量的影响

本文分别比较5：00、11：00、17：00和23：00四个时辰大鼠延桥脑、下丘脑、海马、中脑、纹状体和皮层内MEK基础水平及其电针的影响，结果表明，各脑区内MEK基础水平有昼夜节律变化，不同时辰电针对各脑区内MEK的水平有不同效应。

大鼠导水管周围灰质内GABA能神经元与甲硫氨酸-脑啡肽、亮氨酸-脑啡肽、β-内啡肽和强啡肽阳性终末的联系

目的 观察中脑导水管周围灰质 (PAG)内 γ-氨基丁酸 (GABA)阳性神经元与甲硫氨酸 -脑啡肽 (Met- ENK)、亮氨酸 -脑啡肽 (L eu- ENK)、β-内啡肽 (β- END)和强啡肽 (Dyn)阳性终末的联系 .方法 免疫荧光组织化学双重染色 ,染色结果在激光共聚焦扫描显微镜下观察 .结果 可见直径较小的GABA阳性神经元主要散在分布于 PAG的内侧区和腹外侧区 . GABA阳性终末在 PAG各区的密度均较高 .以小型为主的少量 Met- ENK,L eu- ENK和 Dyn阳性神经元见于 PAG的各区 ,但未见β- END阳性胞体 . Met- ENK,L eu- ENK,β-END和 Dyn阳性终末也主要分布于 PAG的内侧区和腹外侧区 . Met- ENK,L eu- ENK,β- END和 Dyn阳性终末围绕在GABA阳性神经元的胞体或树突的周围并形成密切接触 .结论 PAG内含内源性阿片样物质 (Opiate- like substances,OL S)的阳性终末与 GABA能神经元形成密切接触 ,提示可能对 GABA能神经元的活动具有调控作用 .

阿片生长因子甲硫氨酸脑啡肽抗肿瘤作用研究进展

甲硫氨酸脑啡肽是一种内源性阿片生长因子,它除了具有阿片肽类镇痛、免疫调控等共性以外,还对细胞的增生和更新、肿瘤生长、伤口愈合、血管发生等具有比较强的抑制作用。甲硫氨酸脑啡肽可以作用于细胞的生长周期,从而达到抑制肿瘤细胞生长的作用。本文对甲硫氨酸脑啡肽的药理作用、抗肿瘤作用及其作用机制的研究现状进行综述。

短蛸外套膜和足甲硫氨酸脑啡肽的免疫组织化学定位

采用免疫组织化学SABC法对短蛸外套膜和足中甲硫氨酸脑啡肽(met-Enk)进行定位研究。试验结果表明,短蛸外套膜、腕、腕间膜、漏斗中均有met-Enk存在,外套膜背面、腕和腕间膜上皮组织及其附近的部分细胞和神经纤维呈met-Enk强阳性或阳性;外套膜腹面和漏斗上皮组织及其附近的部分细胞和神经纤维呈met-Enk阳性或弱阳性。met-Enk在短蛸外套膜和足不同部位分布密度的不同,可能与各部位的功能不同有关。

甲硫氨酸脑啡肽对NIH3T3细胞和人肝癌Bel 7402细胞生长具有抑制作用

目的 :研究甲硫氨酸脑啡肽对体外培养的NIH3T3细胞、人肝癌Bel740 2细胞增殖的影响。方法 :MTT微培养染色法检测不同质量浓度的甲硫氨酸脑啡肽对NIH3T3细胞、人肝癌Bel740 2细胞的作用以及一定质量浓度的纳洛酮、阿片δ受体单克隆抗体、5 氟脲嘧啶对这种作用的影响。结果 :(1) 10mg·L-1至 80mg·L-1的甲硫氨酸脑啡肽对这 2种细胞均有不同的抑制效应 (NIH3T332 %～ 6 6 %与Bel740 2 36 %～ 6 4% ) ;(2 )纳洛酮能阻断甲硫氨酸脑啡肽对细胞抑制效应 ,阿片δ受体单克隆抗体没有这种阻断能力 ;(3) 5 氟脲嘧啶 (10mg·L-1)和甲硫氨酸脑啡肽 (5 0mg·L-1)有协同作用。结论 :甲硫氨酸脑啡肽能抑制细胞增殖。提示NIH3T3细胞和Bel 740 2细胞胞膜上可能存在阿片 ζ受体介导。

甲硫氨酸脑啡肽和抗δ阿片受体抗体对小鼠骨髓瘤细胞增殖的影响

目的:探讨甲硫氨酸脑啡肽(methionine-enkephalin,MENK)对体外培养的小鼠骨髓瘤细胞 (NS-1)增殖的作用及其机制。方法:用3H-TdR掺入法测定不同给药组细胞的增殖。结果:1μmol/ L MENK可促进NS-1细胞增殖,促进作用达109．5％,而0．1-10 nmol／L的抗δ阿片受体单克隆抗体可抑制MENK的作用。结论:抗δ阿片受体单克隆抗体能拮抗MENK促进细胞增殖的作用,提示MENK促进细胞增殖的作用可能是通过阿片受体机制所介导。

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞增殖反应与其产生甲硫氨酸脑啡肽的关系

目的 研究系统性红斑狼疮 (SLE)患者外周血淋巴细胞 (PBL)增殖反应与其产生甲硫氨酸脑啡肽 (Met Enk)的关系。方法 淋巴细胞增殖法和Met Enk放免测定。结果 SLE患者PBL增殖反应异常增高的同时 ,其产生的Met Enk亦明显升高。结论 PBL产生的内源性Met Enk可能参与了SLE患者PBL增殖反应的异常改变。

甲硫氨酸脑啡肽和抗δ阿片受体抗体对小鼠骨髓瘤细胞信号转导系统的影响

目的:探讨甲硫氨酸脑啡肽对小鼠骨髓瘤细胞信号转导系统的作用及其机制。方法:用不同浓度甲硫氨酸脑啡肽(methionine enkep-halin,MENK)及抗δ阿片受体单克隆抗体处理小鼠的骨髓瘤细胞(NS-1),采用组蛋白磷酸化法测定NS-1细胞蛋白激酶A(PKA)和蛋白激酶C(PKC)的活性,并采用放射免疫分析法测定其三磷酸肌醇(IP3)的含量。结果:MENK可升高细胞胞浆及胞膜 PKA的活性,且这一作用可被抗δ阿片受体抗体所拮抗。MENK对PKC影响呈双向反应,0．1μmol/ L MENK可以升高胞浆PKC活性,但却明显降低胞膜PKC活性;MENK浓度为10μmol/L时PKC 活性的改变则与此相反;1μmol/L的MENK可明显降低胞浆及胞膜PKC活性,抗体可拮抗这种下调作用。MENK可降低细胞内IP3的含量,且这一作用可被抗δ阿片受体抗体所拮抗。结论:MENK 在与δ阿片受体结合后,可以通过多种信号转导系统来调节细胞功能,从而产生不同的生物效应。

大鼠牙髓组织中甲硫氨酸脑啡肽合成位点及其调控的实验研究

目的:探讨大鼠牙髓组织甲硫氨酸脑啡肽(MEK)的细胞内生物合成位点及其调控机制。方法:①将健康雄性大鼠随机分成四组:对照组,牙髓炎组,FOY-305注射组和牙髓炎加FOY-305注射组,分别测定各组牙髓组织中MEK值。②采用分次离心法分离各亚细胞成分:胞核,线粒体,溶酶体,微粒体和上清液,对比经胰蛋白酶处理前后大鼠牙髓细胞各亚细胞成分中MEK含量的变化情况。结果:①炎性牙髓组织中MEK含量较正常牙髓组织有显著性升高,FOY-305可显著抑制炎症反应引起的MEK含量的升高,而对正常牙髓无明显抑制作用。②经胰蛋白酶处理后,牙髓组织的上清液、胞核、微粒体的MEK样肽含量显著增加,表明这些部分富含前体。结论:在炎性刺激下,胰蛋白酶参与牙髓中MEK的生成。而微粒体部分可能是MEK前体蛋白分布的合理位点。

疣荔枝螺消化系统甲硫氨酸脑啡肽的免疫组织化学定位

采用免疫组织化学的方法(SABC法)对疣荔枝螺消化系统各器官中甲硫氨酸脑啡肽(met-Enk)进行了定位研究,疣荔枝螺的吻、唾液腺、食道、食道腺、胃、小肠、肝脏、直肠中均有met-Enk存在.其中唾液腺、肝脏呈met-Enk强阳性,吻、食道、食道腺、胃、小肠、直肠呈met-Enk阳性.在各器官的不同组织中met-Enk阳性又有不同:腺体和消化道的上皮组织和结缔组织呈强阳性,消化道的肌肉组织呈阳性或弱阳性.met-Enk在消化系统各器官及不同组织中的分布密度不同可能与各部位功能不同有关.

血浆甲硫氨酸脑啡肽测定的影响因素

内源性阿片肽（ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｏｐｉｏｉｄｐｅｐｔｉｄｅ，ＥＯＰ）包括β－内啡肽（β－ｅｎｄｏｒｐｈｉｎ，β－Ｅｎｄ）、强啡肽（ｄｙｎｏｒｐｈｉｎ，Ｄｙｎ）、亮氨酸脑啡肽（ｌｅｕｃｉｎｅ－ｅｎｋｅｐｈａｌｉｎ，Ｌｅｎ－Ｅｎｋ）和甲硫氨酸脑啡肽（ｍ...

胰岛淀粉样多肽和甲硫氨酸-脑啡肽在家兔和大鼠背根神经节细胞内共存的免疫组织化学研究

为进一步探讨背根神经节细胞间生物活性物质内的关系，用免疫组织化学ＡＢＣ法，观察到家兔和大鼠背根神经节细胞内有胰岛淀粉样多肽免疫反应。用相邻镜像邻片免疫双标记技术，证实甲硫氨酸－脑啡肽免疫反应的细胞内同时含有胰岛淀粉样多肽免疫反应物质。胰岛淀粉样多肽与甲硫氨酸－脑啡肽在哺乳类动物背根神经节细胞内的共存结果，为进一步探讨背根神经节细胞内生物活性物质间的关系提供了形态学证据，并为胰岛淀粉样多肽的胰腺外研究提供了新的资料。

表皮生长因子和甲硫氨酸脑啡肽诱导人白细胞c-fos基因表达的研究

由健康人外周血分离淋巴细胞及溶血处理后的全白细胞,以外源性表皮生长因子和甲硫氨酸脑啡肽培育后取细胞悬液制成滴片和滴膜,用生物素标记的c-fos cDNA探针进行原位杂交和斑点印迹杂交.结果显示表皮生长因子和甲硫氨酸脑啡肽两组c-fos原癌基因的表达均较对照组增强(P<0.05).

健康育龄妇女月经周期血浆甲硫氨酸脑啡肽水平观察

目的观察正常育龄妇女月经周期中不同阶段血浆甲硫氨酸脑啡肽（Ｍｅｔ－Ｅｎｋ）水平。方法血浆Ｍｅｔ－Ｅｎｋ放免测定法。结果正常育龄妇女排卵期Ｍｅｔ－Ｅｎｋ水平最高，为１４３８．２１ｎｇ·Ｌ－１±１９８．８１ｎｇ·Ｌ－１；而黄体期较低，为４０７．０１ｎｇ·Ｌ－１±１０８．４３ｎｇ·Ｌ－１。