甲硫氨酸饥饿通过抑制程序性死亡配体1诱导胃癌细胞凋亡

目的研究甲硫氨酸饥饿诱导胃癌细胞凋亡的分子机制。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析胃癌组织中程序性死亡配体1(PD-L1)的表达及其与临床病理特征的关系。用普通培养液和甲硫氨酸饥饿培养液分别培养胃癌AGS细胞及抑制PD-L1表达的siRNA(siPD-L1)胃癌细胞,根据处理方法分为对照组、甲硫氨酸饥饿处理组、siPD-L1处理组、甲硫氨酸饥饿联合siPD-L1处理组,采用CCK-8检测胃癌细胞活力,吖啶橙/溴化乙锭双染检测胃癌细胞凋亡数目,流式细胞术检测胃癌细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测胃癌细胞PD-L1、Bcl-2、B淋巴细胞瘤2相关X蛋白(Bax)、Caspase 3蛋白表达。starBase数据库分析PD-L1与Bcl-2抗凋亡蛋白家族(BCL2A1、MCL1、BCL2、BCL2L1)之间的联系。结果PD-L1在胃癌组织中高表达(P<0.01),且PD-L1的表达与胃癌G分级有关(P<0.01)。甲硫氨酸饥饿和siPD-L1处理均能够降低胃癌细胞存活率(P<0.01),促进凋亡(P<0.01),抑制PD-L1和Bcl-2表达(P<0.05),上调促凋亡蛋白Bax、Caspase 3表达(P<0.01);甲硫氨酸饥饿联合siPD-L1处理上述作用更强(P<0.05)。PD-L1与Bcl-2抗凋亡蛋白家族表达水平之间呈正相关(P<0.01),说明PD-L1是一个关键抗凋亡基因。结论甲硫氨酸饥饿通过抑制PD-L1的表达下调抗凋亡蛋白Bcl-2并上调促凋亡蛋白Bax和Caspase 3表达,从而诱导胃癌细胞凋亡。