TaqMan RT-PCR检测HAV方法的建立

目的建立以TaqMan为特点的RT-PCR检测。方法本研究利用反转录酶将病毒RNA反转录成cDNA,再以cDNA为模板用Taqman探针法进行RT PCR扩增反应,进行病毒核酸定性检测。结果本研究分别选用0.14、0.16、0.18、0.2(μmol/L)的浓度。当退火温度为56℃时荧光强度最强,反应的灵敏度最好。CV值的最大为1.66%,<5%。结论本研究建立的TaqMan RT-PCR方法高特异性、简单、重复性好、避免假阴性,宜应用于甲肝的病原型监测。