有氧运动调控去甲肾上腺素转运蛋白抑制心力衰竭大鼠交感神经过度兴奋

目的:观察有氧运动对心力衰竭(心衰)大鼠心脏交感神经功能的影响,并探讨心肌去甲肾上腺素转运蛋白(NET)在其间的可能作用机制。方法:38只Wistar大鼠随机分为假手术组(Sham)、心衰安静组(HF-sed)和心衰运动组(HF-ex)。Sham和HF-sed组大鼠在鼠笼内安静饲养,HF-ex组进行10周中等强度跑台运动。实验结束后,利用超声心动图检测心脏结构与功能,心率变异性(HRV)频域分析获取自主神经功能,行Masson染色观察心脏组织病理学变化,高压液相色谱法测定血浆和心肌去甲肾上腺素(NE)水平,实时荧光定量PCR和Western blot检测心脏交感神经节NET mRNA和蛋白,心肌总NET、膜NET和胞浆NET蛋白表达量。结果:与Sham组比较,HF-sed组发生病理性心脏肥大,心肌纤维化,交感神经活性增加(P<0.05),心肌和血浆NE升高(P<0.05),心功能下降(P<0.05);分子生物学测定发现,心脏交感神经节NET mRNA表达下调(P<0.05),心肌总NET和膜NET蛋白下降(P<0.05),胞浆NET升高(P<0.05)。与HF-sed组比较,HF-ex组心脏由病理性肥大向生理性肥大转变,心肌纤维化减轻,交感神经活性降低(P<0.05),心肌和血浆NE含量下降(P<0.05),心功能增强(P<0.05);心脏交感神经节NET mRNA表达上调(P<0.05),心肌总NET和膜NET蛋白升高(P<0.05),胞浆NET下降(P<0.05)。结论:有氧运动通过上调NET表达量并抑制其内化,进而改善心衰大鼠交感神经过度兴奋状态并延缓心脏重塑和心衰进程。

心康冲剂对慢性心力衰竭大鼠去甲肾上腺素转运蛋白及交感神经系统的影响

目的探讨心康冲剂对慢性心力衰竭大鼠去甲肾上腺素转运蛋白(norepinephrine transporter,NET)及交感神经系统表达的调控作用。方法经腹腔注射盐酸多柔比星建立慢性心力衰竭大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、心康冲剂组、美托洛尔组,每组13只。另取10只大鼠为空白组。美托洛尔组予以酒石酸美托洛尔2.25 mg/kg,心康冲剂组予以心康冲剂1.08 g/kg,空白组与模型组予以生理盐水15 mL/kg。各组每天均灌胃1次,连续6周。实验结束后,心脏超声检测心功能;ELISA法检测血清脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达;HE染色检测心肌病理改变;RT-PCR检测心肌组织NET、TNF-αmRNA表达;Western blot检测NET表达;生物信号采集系统检测颈交感神经放电(sympathetic nervous system activity,SNA)情况。结果与空白组比较,模型组左室舒张期内径(left ventricular end diastolic internal dimension,LVIDd)、左室收缩末期内径(left ventricular end systolic internal dimension,LVIDs)、SNA、BNP、NE、TNF-α、TNF-αmRNA表达均明显升高(P<0.01),左室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、NET、NET mRNA表达均明显降低(P<0.01)。与模型组比较,心康冲剂组和美托洛尔组LVEF、LVFS、NET、NET mRNA表达均明显升高(P<0.05),LVIDd、LVIDs、SNA、BNP、NE、TNF-α、TNF-αmRNA表达均明显降低(P<0.05)。与美托洛尔组比较,心康冲剂组NET mRNA表达明显升高(P<0.01),TNF-αmRNA表达明显降低(P<0.01)。心康冲剂组与美托洛尔组间LVEF、LVFS、LVIDd、LVIDs、SNA、BNP、NE、TNF-α、NET表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论心康冲剂可改善慢性心力衰竭大鼠心功能,拮抗心室重塑,其机制可能与增加NET表达,下调心脏交感神经兴奋性有关。

阿霉素诱导的心力衰竭小鼠心脏去甲肾上腺素转运蛋白的表达变化

目的:观察阿霉素诱导的充血性心力衰竭(心衰)小鼠心脏去甲肾上腺素转运蛋白(NET)的表达变化。方法:建立阿霉素诱导的充血性心衰小鼠动物模型,分离小鼠心脏和颈交感神经节,实时荧光定量多聚酶链反应(PCR)的方法检测NET和肾上腺素能受体β1-AR的mRNA表达,用Western blot方法检测NET和酪氨酸羟化酶(TH)的蛋白表达。免疫组化方法染色心脏交感神经纤维。结果:①心衰小鼠心脏交感神经节中NET和β1-AR的mRNA表达无明显变化。②心衰小鼠心肌组织中NET的蛋白表达显著降低,而TH的蛋白表达上调。③心衰早期小鼠心肌交感神经纤维密度无明显变化。结论:充血性心衰小鼠心脏NET的蛋白表达存在转录后的下调,心衰早期NET的表达下调可导致NE再摄取障碍,交感神经活性失衡从而加剧心功能的恶化。

运动对慢性心力衰竭大鼠心脏交感神经功能的调节——去甲肾上腺素转运蛋白的作用

目的:探讨去甲肾上腺素转运蛋白(NET)在运动改善慢性心力衰竭大鼠心脏交感神经功能、心功能和运动耐力中的作用。方法:结扎大鼠冠状动脉建立心梗后心衰模型。大鼠休息4周后随机分为假手术安静组(Sham)、假手术运动组(Sham+E)、心梗安静组(MI)和心梗运动组(MI+E),Sham+E组和MI+E组进行为期10周的跑台运动,Sham组和MI组保持安静状态。实验结束后,利用递增负荷运动实验测定大鼠力竭时间;超声心动图检测左心室收缩末内径(LVESD)、左心室舒张末内径(LVEDD)、心率(HR)、缩短分数(FS)和左室射血分数(LVEF);Masson染色进行心脏组织病理学观察;测定心肌和血浆去甲肾上腺素(NE)水平;实时荧光定量PCR检测交感神经节和心肌NET mRNA水平;Western blot法检测心肌NET蛋白表达。结果:术后14周,与Sham组比较,Sham+E组HW/BW、LVEF增加,HR降低,力竭时间延长,MI组心脏重量(HW)、心脏重量/体重(HW/BW)、LVESD和LVEDD增加,FS和LVEF降低,血浆和心肌NE水平升高,心脏交感神经节NET mRNA降低,心肌NET蛋白水平降低,力竭时间减少。与MI组比较,MI+E组体重(BW)下降,HW和HW/BW增加,LVESD和LVEDD稍有降低,FS和LVEF无显著性变化,血浆和心肌NE水平降低,心脏交感神经节NET mRNA升高,心肌NET蛋白水平升高,力竭时间延长(其中,NE、NET mRNA和蛋白水平在MI+E组与Sham组无显著性差异)。结论:长期有氧运动通过上调心脏交感神经元NET表达,减少并恢复了交感神经末梢NE释放量,从而改善了心衰后交感神经系统过度兴奋状态并提高运动耐力。

长期压力超负荷心力衰竭时心脏交感神经去甲肾上腺素转运蛋白表达变化的意义

目的:观察长期压力超负荷模型大鼠心力衰竭(HF)时心脏交感神经去甲肾上腺素转运蛋白(NET)mRNA及蛋白水平表达变化。方法:成年雄性Wistar大鼠随机分为:HF组和假手术组。采用腹主动脉缩窄术建立大鼠心脏压力超负荷HF模型。用免疫组织化学、Western blotting、实时荧光定量PCR技术检测NET表达。结果:腹主动脉缩窄8周后,HF组大鼠心脏NETmRNA及蛋白表达均低于假手术组(P<0.01)。结论:长期心脏压力超负荷导致心力衰竭时NETmRNA及蛋白表达均降低,NETmRNA表达下降可能是导致NET蛋白水平下降的重要原因,提示NET表达异常可能是HF时心脏交感神经功能异常的基础。

勿动蛋白与Rho相关蛋白激酶对心脏交感神经重塑与去甲肾上腺素转运蛋白表达的调节

目的探讨勿动蛋白(Nogo)与Rho相关蛋白激酶(ROCK)对心脏交感神经重塑与去甲肾上腺素转运蛋白表达的调节作用。方法建立SD乳鼠脊髓背根神经元细胞与心肌细胞联合培养的模型,随机数表法分为A组(心肌细胞+交感神经节细胞);B组(心肌细胞+交感神经节细胞+Nogo-66);C组(心肌细胞+交感神经节细胞+C3转移酶+Nogo-66);D组(心肌细胞+交感神经节细胞+Y-2763+Nogo-66)。倒置相差显微镜观察神经元细胞与心肌细胞共培养细胞的生长状况。免疫荧光测定酪氨酸羟化酶(TH)与去甲肾上腺素转运蛋白表达。ELISA检测培养液中去甲肾上腺素含量(NE)。结果免疫荧光染色结果显示,与A组(1.00±0.00)比较,B组(0.07±0.01)TH表达明显降低,C组(1.99±0.55)与D组(2.13±0.72)TH表达明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与A组(117.34±2.47)ng/L比较,B组[(94.32±7.34)ng/L]去甲肾上腺素含量明显降低,C组[(124.61±2.97)ng/L)与D组[(127.19±3.54)ng/L)去甲肾上腺素含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,与A组(1.00±0.00)比较,B组(0.07±0.01)TH表达明显降低,C组(1.99±0.55)与D组(2.13±0.72)TH表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。。结论Nogo与ROCK参与心脏交感神经重塑与去甲肾上腺素转运蛋白表达的调节。

人源去甲肾上腺素转运蛋白稳定表达细胞系的构建及其功能鉴定

目的构建人源去甲肾上腺素转运蛋白（h NET）稳定表达细胞系,并对细胞系h NET的结合和重摄取功能进行研究。方法采用脂质体转染法将h NET转染于母细胞-人胚肾（HEK）293细胞（HEK293-h NET）;采用RT-PCR和Western蛋白质印迹法在基因和蛋白水平对HEK293-h NET细胞系进行鉴定和稳定性验证;采用放射性配基结合实验检测HEK293-h NET的结合和重摄取功能。并采用三环类抗抑郁药地昔帕明（DIM）和5-羟色胺/去甲肾上腺素双重重摄取抑制剂度洛西汀（DLX）,在0~1×10-4mol·L-1浓度梯度范围绘制药物与h NET的结合与重摄取抑制曲线,进一步验证HEK293-h NET细胞系的结合和重摄取功能。结果 RT-PCR和Western蛋白质印迹实验结果表明,所建立的HEK293-h NET细胞系在15代内均稳定表达h NET;放射性配基结合实验表明,HEK293-h NET细胞具有内源性h NET的结合和重摄取功能。并且,DIM和DLX与HEK293-h NET细胞中h NET具有明显的特异性结合（Ki值分别为2.45和3.40 nmol·L-1）,并可显著抑制h NET对去甲肾上腺素的重摄取作用（IC50分别为5.78和10.23 nmol·L-1）。结论成功建立的可稳定表达h NET的HEK293-h NET细胞系具有内源性h NET的结合和重摄取功能,可用于h NET靶标药物研究。

去甲肾上腺素转运蛋白在心力衰竭中的作用

去甲肾上腺素转运蛋白是交感神经信号传递途径中的重要环节,主要功能是将神经元释放的去甲肾上腺素重新摄取回突触前膜中,通过这种方式调控神经递质信号强度。心脏交感神经去甲肾腺素转运蛋白功能异常对心力衰竭恶化、进展发挥重要作用。心力衰竭时去甲肾上腺素转运蛋白功能异常可能与交感神经去神经、神经元表面表达降低、内化、转录后异常、氧化负荷增加、细胞因子对心脏交感神经的损伤作用有关。

间充质干细胞移植对缺血/再灌注大鼠心肌胶原与去甲肾上腺素转运蛋白的影响

目的观察同种异体骨髓间充质干细胞(BMSCs)心肌内移植对60分钟缺血/再灌注心肌梗死(MI)模型大鼠左心室重塑及心肌去甲肾上腺素转运蛋白(NET)表达的影响,探讨BMSCs移植对心脏交感神经功能以及胶原重塑作用的可能机制。方法分离、原代培养Wistar大鼠BMSCs,建立缺血/再灌注MI模型,随机分为假手术对照组、MI组、BMSCs移植组。观察BMSCs移植后动物模型血流动力学指标,天狼猩红染色测定MI范围、面积以及扩展指数,结合偏振光分析MI区胶原容积分数和胶原成熟度;免疫组化检测NET表达。结果①BMSCs移植可缩小60min缺血/再灌注大鼠MI面积;②BMSCs移植可减轻心肌梗死动物左心室重塑;③BMSCs移植发挥细胞外基质抑制,心肌间质胶原含量、胶原容积分数下降,增加心肌NET表达。结论 BMSCs移植可改善MI后心室重塑、降低心肌胶原、增加心肌NET表达。

老龄过程中去甲肾上腺素转运蛋白功能减退的影响因素及在心血管病中的意义

去甲肾上腺素转运蛋白是一种分布于交感神经突触前膜上的转运蛋白,通过将释放入突触间隙的神经递质去甲肾上腺素回摄入神经无而终止交感神经冲动,对交感神经系统(SNS)功能及β-肾上腺素能受体(β-AR)的表达和功能有重要影响。无论是正常还是疾病状态,交感神经与心脏功能变化关系密切。老龄化过程中SNS功能改变,并且心血管病发生率增高。近年来,越来越多的研究显示,老龄过程中,去甲肾上腺素转运蛋白(NET)的功能减退。NET被许多细胞内和细胞外的信号分子所动态调节,推测NET的磷酸化过程可能是调节它的细胞表面表达以至于影响其功能的一条主要途径。

去甲肾上腺素转运蛋白调控人结肠癌细胞迁移能力的研究

研究去甲肾上腺素转运蛋白(Norepinephrine Transporter,NET)在结肠癌中的作用。利用TCGA数据库分析NET与临床结肠癌患者的TNM及stage分期的关系;收集临床标本行NET免疫组化实验;在结肠癌细胞中下调NET的表达行Transwell实验和Western Blot观察其变化。临床生物大数据及临床标本免疫组化结果显示:NET与结肠癌患者的转移及分期呈正相关,下调NET的表达显著抑制人结肠癌细胞的迁移能力以及迁移相关分子MMP9的表达,去甲肾上腺素转运蛋白参与对人结肠癌细胞迁移能力的调控。

基于去甲肾上腺素转运蛋白(NET)相互作用药物的结构研究

去甲肾上腺素转运蛋白（NET）将去甲肾上腺素从突触传输到突触前神经元,去甲肾上腺素通过与各种受体（如β2-肾上腺素受体）结合,来调节心血管功能和行为特征。NET是多种药物的靶点,如抗抑郁剂和精神兴奋剂,并可调节其他药物的＂脱靶效应＂。

针刺对脑心综合征大鼠颈交感神经节去甲肾上腺素转运蛋白mRNA和心肌β1肾上腺素能受体mRNA表达的影响

目的:观察针刺干预对脑心综合征(CCS)大鼠颈交感神经节去甲肾上腺素转运蛋白(NET)mRNA和心肌β1肾上腺素能受体(β1-AR)mRNA表达的变化,探讨CCS发病的交感通路机制以及针刺对其防治的作用机制。方法:Wistar大鼠18只随机分为伪手术对照组6只,其余采用胶原酶加肝素联合注射尾状核复制CCS模型。复制成功的大鼠12只再分为模型组和电针组各6只。电针组大鼠电针"水沟""风府""内关""心俞"穴,每次20 min,每天1次,连续3 d。于实验72 h后观察脑和心肌组织病理形态学变化;采用荧光定量PCR法检测各组大鼠颈交感神经节NET mRNA以及大鼠心肌β1-AR mRNA表达。结果:①伪手术组脑和心肌组织结构正常;模型组大鼠脑组织内可见大量红细胞,部分血细胞溶解,可见含铁血黄素沉积,血肿周围脑组织水肿,神经细胞肿胀,胞核碎裂溶解或消失,有大量炎性细胞浸润,心肌细胞变性、坏死,大量平滑肌断裂;电针组脑组织内红细胞明显少于模型组,脑组织轻度水肿,神经细胞变性坏死程度较轻,有少量炎性细胞浸润,心肌细胞变性、坏死程度较轻,仅有少量平滑肌断裂。②模型组NET mRNA相对表达量较伪手术对照组减少(P<0.01);电针组NET mRNA相对表达量较模型组增加(P<0.01)。③模型组β1-AR mRNA相对表达量较伪手术对照组减少(P<0.01);电针组β1-AR mRNA相对表达量较模型组增加(P<0.01)。结论:①颈交感神经节NET mRNA表达下调可能参与CCS的发生发展,针刺早期防治可拮抗这种变化,能有效阻止NET mRNA表达下调;②心肌β1-AR mRNA表达下调可能参与CCS的发生发展,针刺早期防治可能直接干预β1-AR mRNA表达下调,或干预其上游调控因素NET mRNA表达的下调。这些可能是针刺防治CCS交感通路作用机制之一。

青风藤对单胺类转运蛋白再摄取功能的抑制

目的提取分离青风藤不同极性部位,研究它们对单胺类神经递质转运蛋白再摄取功能的影响。方法建立表达去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、γ-氨基丁酸(GABA)转运蛋白的中国仓鼠卵巢细胞系。在细胞中加入青风藤提取物,检测细胞对相应递质再摄取的变化,以不加药物作为阴性对照。结果青风藤提取物及其氯仿部位,特别是乙酸乙酯部位对去甲肾上腺素再摄取有显著抑制作用,100μg/ml浓度时,NE的再摄取分别为阴性对照的(51.3±5.7)%,(36.9±3.5)%和(25.3±8.0)%。结论青风藤中有某种活性物质通过对转运蛋白的抑制发挥镇痛、镇静、消炎等药理活性。

饮用某白酒对大鼠肾上腺髓质细胞DβH、NET表达的影响

研究摄入某白酒后,不同剂量和不同时长对大鼠肾上腺髓质细胞内多巴胺-β-羟化酶(DβH)、去甲肾上腺素转运蛋白(NET)表达的影响。将健康成年雄性SD大鼠120只,随机分为正常对照组(NCG)及实验组(EG),实验组又分为4周组(4W)、8周组(8W)、12周组(12W)、16周组(16W)、20周组(20W)5个时间点,其中每个时间点又分为3个剂量组,即低剂量组(0.8 m L/kg·d)、中剂量组(1.6 m L/kg·d)、高剂量组(2.4 m L/kg·d)。实验组大鼠予以54%vol董香型白酒灌胃,每日2次,正常对照组不予处理。分别于4 W、8 W、12 W、16 W、20 W时取材,采用免疫组化SABC法、蛋白免疫印迹法检测肾上腺髓质中DβH、NET的表达。结果表明,正常组及各实验组肾上腺髓质细胞DβH、NET阳性产物呈棕黄色或棕褐色细颗粒状,分布于肾上腺髓质细胞胞质中,各组髓质细胞阳性产物定位及免疫染色强度未见明显差异。Western-blotting显示第4 W组、第8 W组、第12 W组、第16 W组及第20 W组DβH、NET表达水平与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。在本实验设定的剂量和时长内用该食用白酒灌胃后对大鼠肾上腺髓质细胞内DβH、NET的表达无明显影响。

勿动蛋白及其信号通路分子Rho A与Rho相关蛋白激酶在高血压心肌肥厚与纤维化中的作用

目的探讨勿动蛋白(Nogo)/Rho相关蛋白激酶(ROCK)-去甲肾上腺素转运蛋白(NET)信号通路对自发性高血压大鼠心肌肥厚与纤维化的调节作用。方法选择7周龄SPF级同源同系雄性自发性高血压大鼠20只,随机分为4组:对照组、Nogo受体拮抗剂(NEP1-40)组、ROCK抑制剂(法舒地尔)组和NET抑制剂(氟西汀)组,每组5只,饲养7周。分离称量左心室质量,计算左心室质量指数。实时定量PCR检测心肌肥厚标志物心钠肽、脑钠肽、β肌球蛋白重链(β-MHC)基因表达,以及心肌纤维化标志物结缔组织生长因子(CTGF)、心肌胶原组织Ⅰ型(CollagenⅠ)、心肌胶原组织Ⅲ型(CollagenⅢ)和NET基因表达水平。结果与对照组比较,NEP1-40组左心室质量指数、心钠肽、脑钠肽、β-MHC表达明显增高,法舒地尔组左心室质量指数、心钠肽、脑钠肽、β-MHC表达明显降低(P<0.05)。与对照组比较,NEP1-40组CTGF、CollagenⅠ、CollagenⅢ表达明显增高,法舒地尔组NET表达明显升高,CTGF、CollagenⅠ、CollagenⅢ和NET表达明显降低(P<0.05)。与对照组比较,氟西汀组心钠肽、脑钠肽、β-MHC、CTGF和CollagenⅠ表达明显增高[(1.37±0.05)%vs (1.26±0.03)%,(1.27±0.04)%vs (1.18±0.07)%,(1.26±0.04)%vs (1.22±0.03)%,2.05±0.01 vs 1.44±0.11,1.86±0.06 vs 1.29±0.05,P<0.05]。结论Nogo/ROCK-NET信号通路参与自发性高血压大鼠心肌肥厚与纤维化的调节。

hNET基因重组腺病毒载体构建和体外表达

目的以复制缺陷的腺病毒为载体,用细菌内同源重组法构建含有人的去甲肾上腺素转运子(human neurotransmitter transporter,hNET)基因的腺病毒载体。方法利用限制性内切酶KpnⅠ+XbaⅠ从pCMV5质粒中切下目的基因hNET,亚克隆至经同样酶切的腺病毒穿梭质粒pAdtrack-CMV,形成重组穿梭质粒pAdtrack-CMV-hNET,PmeⅠ酶切线性化后,与pAdeasy-1在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,获得含目的基因的重组体质粒Ad-hNET,PacⅠ酶切后用脂质体Lipofectamine2000转染HEK293细胞,包装成重组体腺病毒。采用PCR技术和Western Blotting对重组体腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒pAdTrack-CMV中带有绿色荧光蛋白报告基因检测表达,经过扩增和纯化,测定病毒滴度。结果测序结果证明hNET序列的正确,PCR、PacⅠ酶切电泳和Western Blotting证实腺病毒重组质粒Ad-hNET构建成功。扩增纯化后测定重组病毒Ad-hNET的滴度为1.2×1010pfu/mL。结论成功构建了能表达hNET基因的重组腺病毒载体,为肿瘤的靶向治疗提供前期的研究工作。

高血压肝阳上亢证与SLC6A2基因多态性的关联研究

去甲肾上腺素转运体（Norepinephrine transporter,NET,SLC6A2）作为肾上腺素能神经递质和递质-受体这一信号传导通路中重要的调控环节,对心血管系统功能起着重要的调节作用,在疾病中的意义很受关注。为此,我们研究了SLC6A2基因启动子3（promoter3,rs168924）和启动子2（promoter2,rs2397771）与高血压肝阳上亢证的相关性。

长期压力超负荷大鼠心脏交感神经NET、NGF及其受体表达变化

目的检测长期心脏压力超负荷(pressure overload,POL)大鼠心脏交感神经去甲肾上腺素转运蛋白(norepinephrine transporter NET)、心肌神经生长因子(nerve growth factor NGF)及受体Trk A表达变化,探讨心脏压力超负荷导致交感神经重塑的机制。方法 40只雄性Wistar大鼠分为假手术对照组(n=10)和POL组(n=30)。建立腹主动脉缩窄大鼠心脏POL模型,术后8周,用超声心动图评价大鼠心脏功能,用免疫组化荧光方法检测左心室心肌NGF蛋白表达,实时荧光定量PCR检测心脏交感神经节NET及左室心肌GAP43(growth associated factor,GAP43)、Trk A mRNA表达变化。结果与假手术组比较,POL大鼠心室间隔舒张期厚度(interventricularseptal thickness during diastole,IVSd)、收缩期心室间隔厚度(interventricularseptal thickness during systole,LVSs)、舒张期左室后壁厚度(diastolic LV posterior wall thickness,LVPWd)显著增厚,左室质量指数(left ventricular mass index,LVMI)升高33.23%(P<0.05);心功能(EF、FS%)增强(P<0.05),表明大鼠心功能代偿。POL组心肌NGF蛋白表达增加(P<0.05),但心肌GAP43、心脏NET mRNA水平未见变化(P>0.05),Trk A mRNA表达下降(P<0.05)。结论 POL后心肌Trk A mRNA低表达可能是限制心肌NGF蛋白促交感神经生长的原因,心脏NET mRNA转录后异常或内化可能是POL后NET功能异常原因。

益气活血复方联合运动训练对心衰大鼠心肌间质及交感神经重塑作用机制的研究

目的通过检测慢性心衰大鼠模型心肌组织中TH、NET及GAP-43表达情况,探讨益气活血复方联合运动训练对长期压力负荷心衰大鼠心肌间质及交感神经重塑的机制。方法选取普通级健康SD雄性大鼠,以冠脉结扎法配合力竭式游泳、减食等方法塑造慢性心衰大鼠模型,随机将造模成功大鼠分为心衰模型组(模型组)、益气活血中药组(中药组)、运动训练组(运动组)、益气活血复方联合运动训练组(中药联合运动组)、西药组、西药联合运动训练组(西药联合运动组)、假手术组7组,每组10只大鼠。每组分别给予药物治疗和(或)运动训练,治疗6周后处死取材。采用HE染色,光镜下观察各组大鼠心肌细胞的形态学变化;免疫组织化学检测各组大鼠心肌中TH、NET含量;行Real time-PCR测定各组大鼠心肌组织中GAP-43基因表达变化;行Western blot测定各组大鼠心肌组织中GAP-43蛋白表达变化。结果模型组TH、NET、GAP-43表达均明显升高,与假手术组相比有统计学意义(P<0.05);经药物和(或)运动训练干预后,与模型组相比,各治疗组均明显下降(P<0.05),但中药联合运动组效果最明显,运动组则最差,中药组与西药组效果基本相同。结论长期压力负荷心衰将导致心脏交感神经密度增加,进一步将诱导心肌纤维化、交感神经重塑等病理改变,可能是CHF的主要病理机制之一。