靶向甲酰肽受体家族调节心血管病的病理生理机制进展

心肌收缩力、心肌重构和心率等心脏功能最重要的调节因素属于G蛋白偶联受体(GPCR)超家族。GPCR是人体内最大的细胞膜受体超级家族,几乎分布在所有人体组织和器官中,它们参与了各种各样的病理生理过程。癌症、心脏病、糖尿病、阿尔茨海默病等这些危害人类健康的重大疾病都与GPCR密不可分。因此,GPCR被选为常见的药物治疗靶点。甲酰肽受体(FPR)是GPCR超家族的成员,属于敏感的百日咳毒素GPCR超家族.

BOC2抑制N-甲酰肽/甲酰肽受体信号通路减轻SAP炎症损伤的机制研究

目的观察BOC-Phe-Leu-Phe-Leu-Phe(BOC2)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血中6种线粒体N-甲酰肽(NFPs)及胰腺组织中2种甲酰肽受体(FPRs)表达的影响,探讨其减轻SAP炎症损伤的机制。方法将40只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组,模型组,BOC2低、高剂量组(分别为0.1、0.2 mg/kg),每组10只。后3组以胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠(50 mg/kg)制备SAP模型。造模结束后0.5 h腹腔注射相应剂量药物,4 h取材。苏木精-伊红染色观察胰腺病理改变;蛋白免疫印迹法检测血浆中NFPs的表达;免疫组化法检测胰腺FPRs表达;酶联免疫吸附试验检测血浆中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;实时荧光定量聚合酶链反应检测胰腺局部组织炎性因子的表达。结果与模型组比较,BOC2低、高剂量组胰腺出血、腺泡细胞坏死、炎性细胞浸润、水肿等病理现象均改善;胰腺病理评分,血浆线粒体NADH-泛素氧化还原酶链(MT-ND)1、MT-ND2、MT-ND3、MT-ND5、MT-ND6表达,胰腺FPRs表达,血浆及胰腺组织中3种炎性因子表达均下降(P<0.05)。结论BOC2可通过拮抗线粒体NFPs/FPRs信号通路减少炎性因子产生,减轻SAP炎症损伤。

甲酰基肽受体1对脊髓损伤后小胶质细胞诱导的炎性反应的影响

目的探讨甲酰基肽受体1(Fpr1)是否参与脊髓损伤(SCI)后小胶质细胞诱导的炎性反应,为SCI后减轻神经炎性反应提供理论依据。方法将30只成年C57BL/6雄性小鼠按照随机数字表法分为假手术组(Sham组)和不同时间点SCI组(术后1、3、5、7 d),每组6只。采用蛋白质印迹检测小鼠SCI后不同时间点损伤周围脊髓组织Fpr1蛋白的表达变化,采用免疫荧光实验检测Fpr1在小胶质细胞中的定位。选择Fpr1蛋白表达水平最高时间点制作小鼠模型进行进一步实验,将小鼠随机分为SCI组和Fpr1抑制剂(HCH6-1)干预组(HCH6-1干预组),每组6只,并与Sham组比较,应用免疫荧光实验评估各组小胶质细胞的活化程度,通过蛋白质印迹检测各组炎性因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-18和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]以及炎性小体(NLRP3、ASC和Caspase-1)蛋白的表达情况。结果与Sham组相比,Fpr1在SCI后第1天开始表达增多,第3天最高,第5天下降,第7天下降至与Sham组水平相当。免疫荧光染色结果提示,Fpr1主要表达在小胶质细胞。与SCI组相比,HCH6-1干预组小胶质细胞的活化程度显著减轻,炎性因子(IL-1β、IL-18和TNF-α)和炎性小体(NLRP3、ASC和Caspase-1)的表达显著减少。结论Fpr1能够介导SCI后小胶质细胞诱导的炎性反应,抑制Fpr1有望成为干预SCI后继发性损伤的新治疗策略。

甲酰基肽受体2介导脂氧素A4减轻缺氧/复氧所致大鼠心肌细胞凋亡的作用

目的探讨甲酰基肽受体2(FPR2)介导脂氧素A4(LXA4)减轻缺氧/复氧所致大鼠心肌细胞凋亡的作用。方法将大鼠心肌细胞H9C2分为空白对照组、缺氧/复氧组、LXA4处理组。空白对照组细胞不做任何处理,缺氧/复氧组细胞建立缺氧/复氧模型,LXA4处理组细胞在缺氧/复氧处理后给予10 nmol/L LXA4干预。检测各组心肌细胞FPR2 mRNA的表达情况及细胞凋亡情况,并计算凋亡指数。结果缺氧/复氧组、LXA4处理组、空白对照组细胞的FPR2 mRNA相对表达量依次升高,而凋亡指数依次降低(均P<0.05)。结论 LXA4在FPR2介导下减轻了缺氧/复氧损伤导致的心肌细胞凋亡。

甲酰肽受体Fpr2在氧诱导视网膜病变小鼠新生血管形成中的作用及相关机制研究

目的探讨甲酰肽受体Fpr2在氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠中对胶质细胞改变的影响,并探讨其在新生血管形成中的作用及机制。方法将新生C57BL/6J小鼠、Fpr2^(-/-)小鼠分别诱导建立OIR模型后分为氧诱导组和Fpr2^(-/-)氧诱导组。正常对照组和Fpr2^(-/-)组小鼠正常环境饲养。收集各组小鼠视网膜组织并制作成冰冻切片,免疫荧光染色观察小鼠视网膜中波形蛋白(Vimentin)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子化钙结合适配分子1(IBA1)变化;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测小鼠视网膜中炎症因子mRNA的表达;Western blot检测小鼠视网膜中细胞外调节蛋白激酶(ERK)和P38的蛋白磷酸化表达。免疫荧光染色法观察小鼠视网膜中新生血管和无灌注区情况。结果免疫荧光染色结果显示,与正常对照组相比,氧诱导组和Fpr2^(-/-)氧诱导组小鼠视网膜中Vimentin、GFAP、IBA1表达均明显增加,而与氧诱导组相比,Fpr2^(-/-)氧诱导组小鼠视网膜中Vimentin、GFAP、IBA1表达均降低(均为P<0.05)。RT-PCR检测结果显示,与Fpr2^(-/-)氧诱导组相比,氧诱导组小鼠视网膜中白细胞介素-1β(IL^(-1)β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)mRNA相对表达量均增加(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示,与正常对照组相比,氧诱导组和Fpr2^(-/-)氧诱导组小鼠视网膜中p-ERK 1/2和p-P38蛋白相对表达量均增加,而与氧诱导组相比,Fpr2^(-/-)氧诱导组小鼠视网膜中p-ERK 1/2和p-P38蛋白相对表达量均减少(均为P<0.05)。与氧诱导组相比,Fpr2^(-/-)氧诱导组小鼠视网膜中新生血管形成和无灌注区面积均减少(均为P<0.05)。结论抑制Fpr2能够抑制OIR模型小鼠视网膜胶质细胞活化,下调炎症因子表达,减少视网膜新生血管形成和无灌注区面积,此过程中涉及ERK、P38信号通路的作用。

消退素D1通过甲酰肽受体2调控小胶质细胞极化改善大鼠脑缺血/再灌注损伤

目的探讨消退素D1(resolvin D1,RvD1)是否通过甲酰肽受体2(formyl peptide receptor 2,FPR2)调节小胶质细胞极化,减轻脑缺血/再灌注后的炎症损伤。方法运用线栓法建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,将造模后的大鼠随机分为模型组(MCAO),RvD1组和RvD1联合FPR2抑制剂Boc-2(RvD1+Boc-2)组,另设假手术(Sham)对照组。脑缺血后24 h,运用TTC染色法检测脑梗死体积和免疫荧光法检测髓过氧化物酶(MPO),免疫荧光双染法进行标记FPR2/Iba-1、CD16/Iba-1和CD206/Iba-1的表达,RT-qPCR法检测M1型释放的TNF-α、iNOS、IL-1β和M2型释放的Arg-1、TGF-β1、IL-10 mRNA的表达。结果RvD1明显减少脑梗死体积和MPO的表达,并且其受体FPR2在小胶质细胞上表达。RvD1降低M1型CD16+/Iba-1+细胞数和TNF-α、IL-1β、iNOS mRNA的表达,增加M2型CD206+/Iba-1+细胞数和TGF-β1、IL-10、Arg-1 mRNA的表达,联合使用FPR2抑制剂Boc-2后RvD1的这些作用都受到抑制。结论RvD1通过FPR2可以改善脑缺血/再灌注后炎症损伤,其作用与调控激活的小胶质细胞从M1型向M2型方向极化有关。

诺帝对人恶性胶质瘤细胞U87甲酰化肽受体功能的影响

探讨手性化合物诺帝对人恶性胶质瘤细胞甲酰化肽受体（formylpeptide receptor，FPR）功能的影响及其意义。以培养的人恶性胶质瘤细胞U87为研究对象，用FPR激动剂fMLF（N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine）刺激细胞，以双室跨膜迁移模型检测细胞的迁移能力、计数法测定细胞的增殖能力、分光光度法测定细胞内钙流、RT-PCR方法测定血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）mRNA表达，以ELISA方法检测VEGF蛋白水平，并测定诺帝（25—100μmol·L^-1）处理瘤细胞后上述功能指标的变化。50μmol·L^-1诺帝能有效抑制fMLF诱导的细胞增殖、迁移（P〈0．05）和细胞内钙流，100μmol·L^-1诺帝能抑制VEGFmRNA表达，降低VEGF水平（P〈0．05）。诺帝能抑制FPR介导的人恶性胶质瘤细胞增殖、迁移和VEGF产生，提示其具有抗肿瘤活性。

N-甲酰肽受体基因单核苷酸多态性与侵袭性牙周炎易感性的关系

目的:探讨N-甲酰肽受体(N-formylpeptide receptor,FPR)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymor-phism,SNP)与侵袭性牙周炎(aggressive periodontitis,AgP)易感性的关系。方法:选择AgP患者94例,健康对照者73例。抽取前臂静脉血,提取基因组DNA,PCR扩增目的基因片段,用变性高效液相色谱(denature high perfor-mance liquid chromatography,DHPLC)结合DNA测序的方法检测FPR基因的SNP。结果:发现370 bp的FPR基因片段有两个非同义的SNP,即289位C/A和301位G/C,其中289位C/A为新发现的SNP,未检测到329位和378位存在SNP。FPR基因289位和301位等位基因?基因型频率在健康对照组和AgP组之间的差异无统计学意义。通过多元Logistic分析发现,有FPR301C+基因型(即G/C和C/C)且吸烟者患AgP的风险是有FPR301G/G基因型、不吸烟者的5.74倍;携带C等位基因且吸烟者患AgP的风险是携带G等位基因、不吸烟者的5.20倍。结论:FPR301C+基因型?等位基因C与吸烟联合作用使个体患AgP的危险性增高。本研究未发现FPR基因的SNP与AgP的易感性明显相关。

恶性胶质瘤细胞甲酰化肽受体表达及其活化后促瘤细胞增殖和血管生成因子产生的作用

背景与目的:趋化因子受体在多种病理过程中发挥重要作用,通过促进肿瘤细胞增殖、迁移或血管生成过程,进而在肿瘤发生、演进和转移中发挥极为重要的作用。本研究拟探讨甲酰化肽受体(formylpeptide receptor,FPR)在人恶性胶质瘤细胞中的表达和激活后的功能活性。方法:以人恶性胶质瘤细胞U87和FPR-siRNA-U87细胞为研究对象,采用间接免疫荧光标记、激光共聚焦扫描显微术观测人恶性胶质瘤细胞FPR的表达和定位;用FPR配体甲酰-甲硫酰-亮氨酰-苯丙氨酰胺(formy-Met-Leu-Phe,fMLF)激活FPR后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,双抗夹心酶联免疫(ELISA)吸附法检测细胞分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)水平,RT-PCR法检测细胞IL-8mRNA的水平。结果:恶性胶质瘤细胞U87有FPR表达,定位于细胞膜,FPR-siRNA-U87细胞不表达FPR;FPR激动剂fMLF对人恶性胶质瘤细胞具有明显的促增殖作用,U87细胞fMLF刺激组A值较对照组显著升高(P<0.05),FPR-siRNA-U87细胞fMLF刺激组A值与对照组相比无显著性差异(P>0.05);fMLF作为FPR的激动剂,在12h、24h、36h和48h等各时相点U87细胞的VEGF和IL-8蛋白水平均显著增加,以处理36h为观察时间点,U87细胞VEGF蛋白水平[(3.13±0.23)ng/ml]较对照组显著增加(P<0.05),IL-8蛋白分泌量为(7.54±0.53)ng/ml,较对照组显著增加(P<0.05);FPR-siRNA-U87细胞VEGF和IL-8蛋白分泌量分别为(1.26±0.05)ng/ml和(1.54±0.05)ng/ml,较对照组无明显改变(P>0.05);fMLF能显著上调U87细胞IL-8mRNA的表达,较对照组显著升高(P<0.05),FPR-siRNA-U87细胞IL-8mRNA水平与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。结论:人恶性胶质瘤细胞膜存在功能性FPR受体,其活化后具有促瘤细胞增殖和分泌血管生成因子的作用。

甲酰肽受体shRNA稳定转染U87细胞系的构建

目的构建靶向甲酰肽受体(FPR)基因的shRNA慢病毒表达载体,建立稳定转染的U87细胞系。方法设计并合成FPR基因特异性的shRNA序列,构建PDS019_pL/shRNA/GFP/F-FPR慢病毒载体,通过脂质体转染293T细胞包装成FPR慢病毒颗粒,感染U87细胞。荧光显微镜观察转染效果,实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测FPR干扰效率。结果成功构建FPR基因shRNA慢病毒表达载体。稳定转染U87细胞后,荧光显微镜下可观察到绿色荧光蛋白。实时荧光定量PCR及Western blot证实PDS019_pL/shRNA/GFP/F-FPR慢病毒载体具有良好的干扰效果。结论成功构建FPR shRNA稳定转染的U87细胞系。

缺氧对肺腺癌细胞甲酰肽受体及其侵袭力的影响

目的探讨缺氧对人肺腺癌细胞甲酰肽受体1(formyl peptide receptor 1,FPR1)表达及其对肿瘤细胞侵袭力的影响。方法将人肺腺癌细胞株A549暴露于常氧(21%O2)和缺氧(1%O2)条件下培养4、12、24 h,应用RT-PCR检测FPR1 mRNA水平,采用Western blot检测培养上清FPR1激动剂脂联素1(Annexin 1,ANX1)的表达量。用趋化实验检测缺氧对A549细胞FPR1活性的影响。用FPR1外源性激动剂fMLP(formyl-met-leu-phe)刺激细胞后,用RT-PCR观察FPR1 mRNA的变化;同时采用体外侵袭实验检测其对肿瘤细胞侵袭能力的影响。结果与常氧组相比,缺氧上调A549细胞FPR1表达的同时也增加A549细胞FPR1的趋化活性,增加FPR1内源性激动剂Annexin 1的产生。fMLP刺激细胞后,FPR1 mRNA表达水平上调。体外侵袭实验结果表明,缺氧细胞侵袭能力显著增强,加入FPR1拮抗剂Boc2后,缺氧细胞侵袭能力减弱(P<0.05)。结论缺氧增加肺腺癌细胞FPR1激动剂产生与FPR1基因表达。FPR1激动剂的产生在缺氧诱导的FPR1基因表达上调中发挥了作用。缺氧引起A549细胞侵袭力增强与FPR1有关。

甲酰肽受体在胃癌中的表达及临床意义

目的检测胃癌组织中甲酰肽受体(FPR)的表达,探讨FPR在胃癌发生发展中可能发挥的作用。方法运用免疫组织化学技术分析了20例胃炎组织和80例胃癌组织中FPR的表达情况,并探讨了FPR表达与胃癌临床病理参数之间的关系。结果在80例胃癌组织中FPR阳性表达率为57.5%(46/80),高于胃炎组织的表达(25.0%,5/20);FPR的表达与患者的性别、胃癌淋巴结转移之间差异具有统计学意义(P<0.05),而与患者的年龄、胃壁侵犯、分期和分化无统计学意义。结论 FPR在胃癌组织中的表达率较高,其在胃癌的发生发展中可能发挥一定的作用。

低氧环境下甲酰肽受体1拮抗剂Boc2对人肺腺癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨低氧环境下甲酰肽受体1(formyl peptide receptor 1,FPR1)的拮抗剂Boc2对人肺腺癌细胞迁移、侵袭、增殖及成瘤能力的影响。方法:采用Western blotting检测低氧诱导下人肺腺癌细胞A549中低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)和FPR1蛋白的表达情况。以FPR1拮抗剂Boc2体外处理低氧诱导的A549细胞,按照随机数字表法分为3组:对照组(常氧条件下培养)、低氧组和低氧+Boc2处理组。细胞划痕实验、Transwell细胞侵袭实验及MTT法分别用于检测各组细胞的迁移、侵袭和增殖能力。接种A549细胞制备裸鼠移植瘤模型,同上分3组,4周后处死裸鼠,分析各组间裸鼠移植瘤体积、质量、成瘤率以及迁移相关蛋白E-钙黏素(E-cadherin,E-cad)和侵袭相关蛋白MMP-9表达量的差异性。结果:低氧诱导能促进A549细胞FPR1蛋白的表达,且呈时间依赖性(P<0.05)。与对照组相比,低氧组细胞的迁移、侵袭及增殖能力均显著增强(P<0.01),而相对低氧组,Boc2处理能显著抑制A549细胞的迁移、侵袭和增殖能力(P<0.05)。低氧组裸鼠成瘤率为100.0%(15/15),对照组为60.0%(9/15),低氧+Boc2处理组裸鼠成瘤率为73.3%(11/15);低氧组裸鼠移植瘤体积、质量均显著高于对照组(均P<0.01);而相对低氧组,低氧+Boc2处理组裸鼠肿瘤体积、质量均有显著降低(均P<0.01)。低氧组E-cad及MMP-9蛋白表达量显著高于对照组(P<0.01),而与低氧组相比Boc2处理能显著降低E-cad及MMP-9蛋白表达量(P<0.05)。结论:FPR1拮抗剂Boc2能显著抑制低氧诱导的人肺腺癌细胞A549的迁移、侵袭、增殖及成瘤能力,表明FPR1在人肺腺癌的发生发展过程中扮演着重要角色,并有可能成为人肺腺癌治疗的潜在靶点。

5-脂加氧酶在胃癌中的表达与环氧化酶-2和甲酰肽受体2的关系及其临床意义

目的 探讨5-脂加氧酶(5-LOX)在胃癌中的表达与5-LOX与环氧化酶-2(COX-2)和甲酰肽受体2(FPR_(2))的关系及其临床意义。方法 采用免疫组织化学法检测70例胃癌组织中3个指标的表达情况,并分析三者间的关系以及临床病理联系。沉默5-LOX基因观察对COX-2及FPR_(2)的表达有无影响。结果 ≤45岁和>45岁患者5-LOX阳性表达率分别为76.0%和84.4%;肿块直径≤3 cm和>3 cm者阳性表达率分别为82.1%和81.0%;低分化腺癌、中-高分化腺癌和黏液腺癌阳性表达率分别为80.0%、80.0%和90.0%,组间差异均无统计学意义(P>0.05)。在无、有淋巴结转移组中5-LOX阳性率分别为71.8%和93.5%;在Ⅰ~Ⅱ、Ⅲ~Ⅳ期胃癌中5-LOX的阳性表达率分别为75.0%和95.5%,组间差异均有统计学意义(P<0.05);5-LOX在COX-2阳性和阴性病例中阳性率分别为81.6%和81.0%,组间差异无统计学意义(P>0.05);5-LOX在FPR_(2)阳性和阴性病例中阳性率分别为78.1%和84.2%,组间差异无统计学意义(P>0.05)。在SGC-7901转染实验中,沉默5-LOX基因对COX-2及FPR_(2)的表达没有影响。结论 5-LOX在胃癌的侵袭、转移过程中起重要作用,同时靶向5-LOX和COX-2有望成为治疗胃癌的有效手段。

用基因嵌合和定点突变法定位甲酰肽受体的结合结构域

N-甲酰肽fMet-Leu-Phe(fMLP)是来源于细菌的化学趋向性小肽。已知fMIP是活化中性颗粒白细胞的强激活剂,因此阐明fMLP受体(FRP)结合fMLP的结构域对控制炎症的发生、中性白细胞在组织中的浸润具有重要意义。用改进的方法构建了FPR的5个嵌合体及2个突变体,并鉴定了他们结合fMLP的亲和性,取得以下结果:(1)和其他G蛋白偶联性受体不同,FPR的细胞外氨基端结构域(残基1～26)对fMLP结合的重要性不显著。(2)FPR在细胞外的3个环区(loop)对配体的结合是关键性的,其中环区1和环区3尤为重要。(3)FPR的跨膜结构域(TMD)中某些点突变能导致FPR不能和它的配体fMLP充分结合,表明FPR的跨膜结构域也参与对配体的结合。这些结果有助于设计新的FPR颉抗剂。

甲酰肽受体研究进展

趋化剂N-甲酰肽,如fMLF(N-甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸)与受体结合后,能在炎症和免疫应急反应时募集嗜中性粒细胞游走和聚集在病灶处,对抗并清除病原微生物。近年来发现的许多结构各异的非N-甲酰肽配体(包括炎症早期出现的内源性多肽)均具有趋化和激活噬菌性白细胞的作用。这些研究进展拓展了我们对甲酰肽受体功能的认识,同时也提出一系列新问题,值得深入探讨。

甲酰肽受体激活剂丹皮酚抑制类风湿关节炎的作用

目的探讨丹皮酚作为甲酰肽受体激活剂抑制类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的药理作用。方法由高通量基因表达数据库取得目标数据集,利用R语言进行多个数据集合的联合分析,探究未经处理、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理和丹皮酚与LPS共处理三组巨噬细胞差异表达基因,并分析其富集途径。在STRING数据库中构建了蛋白质-蛋白质相互作用网络,并在Cytoscape软件中将其可视化。利用TNF-α刺激成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocyte,FLS)为模型,验证Hub基因甲酰肽受体2(formyl peptide receptor 2,FPR2)对RA炎症的抑制作用。结果通过生物信息学分析,得到169个与炎症发生相关的差异基因,275个与丹皮酚作用机制相关的差异基因,对两组差异基因进行联合分析,发现FPR在丹皮酚抗炎机制中起到关键作用;对丹皮酚的作用机制进行进一步的研究发现,丹皮酚能够激活FPR,丹皮酚对FLS炎症的抑制作用被Trp-Arg-Trp-Trp-Trp-Trp-NH2(WRW4)所挽救。结论丹皮酚可以通过FPR抑制RA的炎症发展。

甲酰肽受体家族受体与恶性肿瘤

甲酰肽受体家族受体包括甲酰肽受体(FPR)、类甲酰肽受体1和类甲酰肽受体2是主要表达在吞噬细胞表面的一类七次跨膜、G蛋白偶联受体。这些受体被相应的激动剂激活后,能活化吞噬细胞,引起细胞的趋化移动和炎症介质的释放等生物学效应,从而在天然免疫和炎症反应中发挥重要作用。近年来,人们发现甲酰肽受体家族受体也高表达于某些恶性肿瘤细胞的表面,且与这些肿瘤的发生、发展、转移以及治疗有着密切的关系,这无疑揭示了甲酰肽受体家族受体一个新的重要作用,值得深入研究和探讨。

在人恶性胶质瘤原代培养细胞甲酰化肽受体FPR的表达和功能意义

目的观测甲酰化肽受体(formylpeptidereceptor,FPR)在人恶性胶质瘤原代培养瘤细胞的表达和功能活性。方法组织块培养和胰酶消化法分离、培养人恶性胶质瘤细胞并进行鉴定,分别采用间接免疫荧光染色结合激光共聚焦扫描、台盼蓝排染实验结合细胞计数、酶联免疫夹心吸附分析(ELISA)等方法观测培养细胞FPR的表达和定位、FPR配体fMLF活化FPR后细胞增殖以及分泌血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的变化。结果部分胶质瘤原代培养细胞可见FPR表达,主要呈线性荧光信号定位于细胞膜;FPR阳性细胞对fMLF的刺激具有反应性,表现为细胞增殖速率加快,VEGF分泌量显著增加。结论部分人恶性胶质瘤细胞存在功能性FPR表达,并可促进瘤细胞增殖和VEGF的产生,在胶质瘤发展及血管生成过程中可能起重要作用。

基于生物信息学方法分析甲酰肽受体1在胶质瘤中的表达及临床意义

目的:分析胶质瘤与正常组织表达差异的基因,筛选和胶质瘤预后相关的关键基因。方法:通过下载GEO(Gene ExpressionOmnibus)数据库GSE15824原始数据,利用R语言分析正常组织与胶质瘤组织中差异表达的基因,通过生物信息学分析工具(DAVID、String、Cytoscape、oncomine和GEPIA)对差异表达的基因进行生物学功能、蛋白互作网络(PPI)分析及筛选胶质瘤的预后标志物。结果:共筛选出648个差异表达的mRNAs。差异表达mRNAs的生物学功能主要富集于T细胞的激活,调节白细胞的黏附和细胞的迁移。KEGG信号通路分析显示差异基因主要富集于PI3K/Akt,MAPK和钙离子信号通路。FPR1在胶质瘤中明显高表达,其表达水平与胶质瘤的预后呈负相关(Log-rankP<0.01)。结论:通过基因芯片数据库的分析,FPR1在胶质瘤中高表达,且与患者生存预后相关,为进一步分子机制的研究提供了新思路。