甲酸琥珀酯的合成研究

以异长叶烯为原料,通过普林斯反应,在酸催化下与甲醛发生缩合反应,得到异长叶烯醇,再和甲酸反应最终得到相应的酯,甲酸是自身的催化剂。由以上两步反应可得到甲酸琥珀酯的两种异构体,并通过GC-MS、IR等方法对其进行表征。两步反应总收率为91.2%。该合成方法原料价廉易得,反应收率高,适合于工业生产。

三种苯甲酸琥珀酰亚胺酯的合成

以对甲氧基苯甲酸、3,4-二甲氧基苯甲酸、3,4,5-三甲氧基苯甲酸为原料,以三氟乙酸N-琥珀酰亚胺酯为活化剂合成了3种苯甲酸琥珀酰亚胺酯,经1 HNMR、IR对其结构进行了表征,并对反应投料比及反应时间进行了优化。

3-正丁基锡-N-琥珀酰亚胺苯甲酸酯的合成及其^(125)I标记

合成了3-正丁基锡-N-琥珀酰亚胺苯甲酸酯(ATE)和N-琥珀酰亚胺-3-碘苯甲酸酯(SIB),其产率分别为45.4%和71.4%,并用核磁、质谱、红外等对它们的结构进行了表征。对ATE进行了125I标记,得到S125IB,标记率可达93.0%,放化纯度>98.0%。本方法为放射性药物碘的间接标记提供了重要参考。

一种含琥珀酰亚胺酯的双苯乙烯类双光子荧光团的合成

设计和合成一种含琥珀酰亚胺酯的双苯乙烯类双光子荧光团,为进一步合成一系列相关双光子荧光探针提供理论和实验基础。以对二甲苯为原料,分别通过芳环上的亲电取代、亲核取代、自由基取代、wittig-horner等一系列反应合成双光子荧光团2,5-二氰基-1-(4'-二甲氨苯乙烯基)-4-(4'-甲酸琥珀酰亚胺酯苯乙烯基)苯。成功合成了目标化合物2,5-二氰基-1-(4'-二甲氨苯乙烯基)-4-(4'-甲酸琥珀酰亚胺酯苯乙烯基)苯,并经氢谱与熔点测定确认其结构。

苯甲酸琥珀酰亚胺酯衍生化法测定复方甘草酸苷制剂中常量组分氨基酸

目的建立苯甲酸琥珀酰亚胺酯衍生化法测定复方甘草酸苷制剂中常量组分氨基酸。方法以苯甲酸琥珀酰亚胺酯为衍生试剂,采用Angla Innoval C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离,流动相为甲醇-体积分数0.5%三乙胺磷酸缓冲液(pH 5.00)进行梯度洗脱,检测波长为236 nm,进样量为10μL,柱温为室温,流速为1.0 mL·min^(-1)。结果复方甘草酸苷制剂中甘氨酸、蛋氨酸的质量浓度分别在0.501~50.1 mg·L^(-1)、1.00~50.2 mg·L^(-1)内线性关系良好,相关系数(r)分别为0.9996、0.9997;回收率满足制剂分析中常量组分分析要求。结论该方法减小了高灵敏度衍生试剂分析常量组分需多次稀释带来的操作误差,且过量的衍生试剂水解后不干扰分离,该方法可作为药物制剂中常量氨基酸的分析方法。

MBS和戊二醛连接hPTH载体特异抗体及载体抗体的比较研究

目的:比较间-马来酰亚胺苯甲酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯(MBS)和戊二醛连接人甲状旁腺激素(hPTH)载体后抗体的产生效果。方法:MBS法和戊二醛一步法分别将hPTH(1-84)与载体牛血清白蛋白(BSA)连接后作为免疫原免疫家兔;间接ELISA法比较两组兔中特异性hPTH(1-84)抗体和BSA抗体的产生,并使用免疫吸收和亲和层析吸附清除BSA抗体,对清除情况进行比较。结果:MBS组抗hPTH(1-84)抗体效价总体上高于戊二醛组,抗载体BSA抗体效价低于戊二醛组;MBS组在同一时间hPTH(1-84)抗体效价高于BSA抗体,戊二醛组获取的抗血清中BSA抗体效价则明显高于hPTH(1-84)抗体。MBS组经亲和层析吸附BSA抗体被清除完全,戊二醛组经免疫吸收和亲和层析吸附仍有残留BSA抗体。结论:采用MBS法连接半抗原载体制备hPTH(1-84)抗体,降低了载体抗体的影响,提高了hPTH(1-84)抗体的特异性,可应用于hPTH药理作用和代谢途径等研究工作中。

AccQ-Tag法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅴ)中17种氨基酸的含量

目的建立测定复方氨基酸注射液（18AA—V）中17种氨基酸含量的方法。方法采用AccQ—Tag法，以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）为衍生试剂，与复方氨基酸注射液（18AA—V）中17种氨基酸柱前衍生，用Waters2695 HPLC仪器，AccQ—Tag^TM柱，以醋酸钠（pH4．95）缓冲液为流动相A，乙腈为流动相B，水为流动相C进行梯度洗脱，检测波长为248nm，柱温为37℃，进样量为5止。结果17种氨基酸的线性回归方程r值为0．9996～0．9999（n=5），平均回收率为93．3％～104．4％（RSD值为0．88％～3．05％，n=6）。结论本法快速，简便，结果准确。

聚乙二醇琥珀酰亚胺酯修饰牛血红蛋白作为红细胞代用品的条件研究

以单甲氧基聚乙二醇甲酸琥珀酰亚胺酯(Succinimidyl carbonate methoxy polyethylene glycol,SC-mPEG)为修饰剂对牛血红蛋白(Bovine hemoglobin,BHB)进行了修饰,考察了不同条件下,SC-mPEG与牛血红蛋白反应的产率,并且建立了SC-mPEG-BHB混合物的分析方法。根据不同反应因素对SC-mPEG修饰血红蛋白反应的影响确定了SC-mPEG与牛血红蛋白反应的最佳条件,即SC-mPEG与牛血红蛋白最佳配比为60∶1,在4℃,pH9的缓冲溶液体系反应2h。

柱前衍生高效液相色谱法测定食品中的氨基酸含量

采用柱前衍生高效液相色谱法，测定了3种食品中天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸等17种氨基酸的含量．以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）为衍生试剂，醋酸盐-磷酸盐缓冲液、乙睛、水为流动相，梯度洗脱．AccQ^＊Tag（Waters）氨基酸分析柱为色谱柱，紫外检测．结果显示，氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性关系，线性范围10～80μmol／L，最小检出限为0．23μmol／L，相关系数均在0．998以上，相对标准偏差在1．8％～4．9％之间，回收率在89．3％～115．8％之间．

AccQ-Tag法测定复方精氨酸胶囊中精氨酸的含量

目的:建立测定复方精氨酸胶囊中精氨酸含量的AccQ-Tag法。方法:以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯(AQC)为衍生剂,与复方精氨酸胶囊中精氨酸柱前定量衍生,用Waters HPLC仪,AccQ-Tag^(TM)氨基酸分析柱,以pH4.95醋酸钠缓冲液为流动相A,乙腈-水(3:2)为流动相B,进行梯度洗脱,检测波长为248nm。结果:线性范围:0.1006～0.9054μg,r=0.9995(n=5)。回收率:99.7％,RSD 0.38％(n=5)。结论:本法快速、简便,辅料无干扰,结果满意。

柱前衍生-超高效液相色谱法测定河南地方特色食品中的17种氨基酸

目的 建立一种快速准确的柱前衍生-超高效液相色谱分析方法,同时测定河南地区特色食品中17种氨基酸含量。方法 采用酸水解法处理样品,提取液与等量碱中和后经6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯(AQC)衍生化处理,衍生液经Waters AccQ-Tag Ultra C18(1.7μm,2.1 mm×100 mm)梯度洗脱,利用光电二极管阵列检测器(PDA),在260 nm下检测。结果 17种氨基酸在10~500μmol/L浓度范围内线性良好(r>0.999),检出限在0.034~0.187 mg/L,加标回收率在89.7%~104.3%,相对标准差(RSD)为1.5%~4.7%。结论 本方法可在9.5 min内将17种氨基酸完全分离,准确度高、灵敏度高、重复性好,可用于河南地方特色食品中17种氨基酸含量的测定。

UPLC柱前衍生测定白茯苓中游离氨基酸的含量

目的建立白茯苓中游离氨基酸的定量方法,同时测定白茯苓中4种游离氨基酸的含量。方法以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基-甲酸酯(6-quinolyl-N-hydroxy-succinimidyl-carboxylate,AQC)作为衍生试剂,建立超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)柱前衍生法,测定3个省24批白茯苓中游离苏氨酸、丙氨酸、赖氨酸及酪氨酸的含量,采用Simca-p+11软件对不同批次样品氨基酸的含量进行聚类分析。结果 24个批次的白茯苓中均含有丙氨酸,含量范围为16.97~69.92μg·g^(-1);苏氨酸、酪氨酸和赖氨酸在有些批次的样品中未检出。经偏最小二乘法(partial least squares discrimination analysis,PLS-DA)分析,安徽和云南省收集的样本可以较好地聚类,湖北收集的各样品中氨基酸含量差异较大。结论 AQC柱前衍生化方法操作简便,快速,灵敏度高,可用于茯苓中游离氨基酸的测定。

超高效液相色谱法测定传统发酵酸粥的游离氨基酸含量

为了准确测定传统发酵食品酸粥中的氨基酸含量,采用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯衍化氨基酸,衍生物使用超高效液相色谱进行定量分析。超高效液相色谱的分析参数为:使用Waters BEH C18柱,甲酸铵和乙腈为流动相,采用梯度洗脱的方法,使用二极管阵列(PDA)检测器,在260 nm条件下,9 min之内可检测标准品中的17种氨基酸。分析结果显示,该方法的变异系数为1.15%~5.23%,回收率为96.41%~100.86%,具有快速、灵敏、准确度高等优点。酸粥中共检测到15种游离氨基酸,其中丙氨酸、亮氨酸和甘氨酸含量较高。不同的酸粥样品之间氨基酸含量差异显著,对其风味氨基酸含量的分析表明,酸粥甜味和苦味氨基酸含量较高,对酸粥特殊的酸香口味影响较大。

HPLC快速测定血液制品中的保护剂甘氨酸

目的采用HPLC法测定血液制品中保护剂甘氨酸的含量。方法采用N-羟基琥珀酰亚胺苯甲酸酯进行衍生结合中空纤维离心超滤-HPLC法快速测定甘氨酸。采用Angla Innoval C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05%三乙胺磷酸缓冲液(25∶75,pH5.0),流速1 mL·min^(-1),检测波长236 nm,进样量10μL。结果40~140 mg·L^(-1)甘氨酸与峰面积呈良好的线性关系(r^(2)>0.9999);几种血液制品的回收率为98.4%~101.8%,RSD<2%。结论所用方法操作简单、快速,结果准确、可靠,可为血液制品中甘氨酸的快速含量测定提供可靠的分析平台。