GS无醛固定液与甲醛固定液对免疫组化染色结果的影响

目的探讨GS无醛固定液与传统甲醛固定液对不同类型组织的固定效果及抗原性的保存能力。方法临床送检的活体组织标本115例,正常乳腺组织10例、乳腺癌50例、结肠癌20例、肺癌10例、卵巢癌10例、淋巴瘤10例及前列腺癌5例。同一组织,各取2块,分成2组,一组采用GS无醛固定液处理组织;另一组用传统甲醛固定组织,然后对2组所制切片同时进行免疫组化染色,比较两种制片方法对免疫组化染色结果的影响。结果两种固定法所制切片免疫组化染色效果基本相同,阳性结果定位清晰、准确。结论 GS无醛固定液对组织的形态及组织内的抗原成分保存良好,它可以替代传统甲醛作为病理科常规组织固定液使用。

环保型无醛固定液与甲醛固定液的比较

随符人们环保意识的提高，病理工作者都在寻求一种无毒、无害的环保型试剂来替代甲醛、二甲苯。我们对GS环保型无醛固定液与甲醛固定液进行了对比试验，以探讨GS环保型同定液对组织形态、抗原性及RNA／DNA保存的影响：

无醛固定液与甲醛固定液对DNA保存效果比较

随着分子生物学技术的不断发展及疾病相关基因研究的不断深入，分子病理学检测已经成为病理诊断的重要辅助手段，广泛运用于临床实践。特别是近几年随着靶向治疗的发展需要对肿瘤基因分型，分子生物学技术中要求使用甲醛固定、石蜡包埋的组织块作为检测的主要对象。但甲醛固定组织会导致基因组DNA断裂。

无醛混合固定液与甲醛固定液对大鼠器官组织检材形态学保存效果的比较研究

目的探讨两种自制无醛混合固定液对大鼠组织检材的形态学保存效果。方法采用动物实验,不同类型的组织分组处理,分别用三种固定液进行固定后,行常规脱水、包埋、染色、封片处理,镜下观察,对形态学效果进行评分,并分析。结果对大鼠肝组织、胃组织的形态学保存效果,4%中性甲醛固定液组与A固定液组、B固定液组得分比较差异无统计学意义(P>0.05);对大鼠肺组织、脑组织的形态学保存效果,4%中性甲醛固定液组与A固定液组得分比较差异无统计学意义(P>0.05),但与B固定液组得分比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论固定液A对大鼠组织病理学检材的形态学保存效果不亚于甲醛固定液,且具有无毒、无刺激性气味等特性,可尝试应用于病理实验室检验流程。

混合甲醛固定液固定大肠癌淋巴结标本的最佳免疫组化效果研究

目的:探讨混合甲醛固定液固定大肠癌淋巴结标本的最佳免疫组化效果。方法:采用不同pH值(6.0、7.0、8.0)的混合甲醛固定液对39枚大肠癌淋巴结标本进行不同时间(<6 h、6 h-12 h、1 d-7 d)的固定处理。以细胞角蛋白20(CK20)为目标抗原,运用OIympusdp 70图像采集分析仪抽选出混合甲醛固定液最佳免疫组化染色的pH值及固定时间。结果:经pH值为7.0混合甲醛固定液处理后,阳性率为92.31%,高于经pH值为6.0、8.0的混合甲醛固定液处理后的76.92%、74.36%,且经pH值为7.0、8.0处理后的阳性率比较有统计差异(P<0.05)。混合甲醛固定液的固定时间在6 h-12 h时的阳性率为94.87%,高于固定时间为<6 h、1 d-7 d处理的30.77%、76.92%(P<0.05)。结论:对于大肠癌淋巴结标本,以CK20为目标抗原,选择pH值为7.0的混合甲醛固定液固定6 h-12 h能够得到质量较佳的免疫组化染色效果。

无醛GS液替代致癌剂甲醛液在标本固定中的运用比较

目的比较无醛GS固定液和传统的甲醛液对新鲜病理组织的固定及其对病理标本长期保存效果的差异,探讨无醛GS固定液替代甲醛液用于病理标本固定的可行性。方法将同类新鲜组织标本分别用环保型标本保存液、无醛GS固定液和传统的甲醛液固定48 h,然后进行石蜡包埋HE染色和免疫组化染色,对比3种固定方法下组织HE染色和免疫组化染色的质量和效果。此外,用以上3种固定液固定保存组织标本1年,比较3种固定液对病理标本的固定和保存效果。结果 GS无醛固定液和甲醛液对新鲜标本固定效果相同,均能很好地保留组织细胞结构和细胞内各种抗原成分,HE染色和免疫组化染色效果良好;而环保型无醛标本保存液对对甲醛液固定处理2月后的标本保存效果良好,但对新鲜组织的固定效果差,标本出现组织变软、液体浑浊及标本上浮水平面。结论无醛GS固定液对病理标本的固定、组织制片和组织抗原性保存方面的效果与甲醛液相似,环保型标本保存液用于经过无醛GS液固定2月后的病理标本保存效果好,GS无醛固定液可替代致癌剂甲醛液在标本固定、组织切片制作和免疫组化染色中的运用。

多重PCR结合飞行质谱技术检测40%非缓冲甲醛固定组织中的降解DNA

目的利用多重PCR结合飞行质谱技术(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)检测40%非缓冲甲醛固定组织中降解DNA的SNP位点,提高微量降解检材DNA的检测时限,评估法医学应用效能。方法提取保存在非缓冲40%甲醛溶液中不同天数的人体组织DNA,用MALDI-TOF MS技术平台检测自行设计的67个X-SNP位点。STR和mini STR位点的检测时限评估用Amp FSTR identifiler和Amp FSTR Mini Filer试剂盒完成。结果 40%非缓冲甲醛固定组织的STR和mini STR位点检测时限分别为7 d和15 d;用MALDI-TOF MS技术平台检测67个X-SNP位点,检测片段均小于105 bp,其中44个独立遗传X-SNP位点的检测时限可达44 d。结论 MALDITOF MS技术平台检测X-SNP位点可明显提高降解DNA样本的检测能力。

混合固定液在病理制片中的固定效果观察

目的观察混合固定液在病理制片中的固定效果。方法将日常取材后的新鲜标本组织块分2批放入脱水机的固定液缸中，分别用4％甲醛固定液和混合固定液固定，然后常规制片。结果混合固定液固定的切片组织结构清晰，着色均匀，染色鲜亮。结论两种固定液均可以用于常规标本的固定，但混合固定液固定效果好于4％甲醛固定液。

三种小鼠眼球组织石蜡切片固定液固定效果的比较

背景:固定液是影响病理制片质量的重要因素,为了优化眼球组织病理学观察的条件,需要相对简便、实用和可靠的固定液。目的:比较3种固定液对小鼠眼球组织石蜡切片的影响,优化小鼠眼球组织石蜡切片的固定方法。方法:取30只BALB/c小鼠(济南朋悦实验动物繁育有限公司提供)眼球,随机分为3组,每组10只,分别固定于3种固定液中,即甲醛-戊二醛混合固定液、Davidson固定液和体积分数10%甲醛固定液,24 h后制作标本并进行苏木精-伊红染色,分析比较固定效果。动物实验获得山东省立第三医院伦理委员会批准,批准号:sdsldsyy-m-201801006。结果与结论:①各组大部分眼球大体标本均略有收缩变形;②苏木精-伊红染色显示,甲醛-戊二醛组眼球壁出现皱缩,晶状体结构较完整、清晰,中央区无破碎,细胞排列整齐有序;角膜成纤维细胞间出现较大空隙;视网膜组织明显脱落分离,各层细胞不清晰,细胞间可见明显空白裂隙;③苏木精-伊红染色显示,Davidson组视网膜轻微变薄,分层排列较平整,未见明显缺失,无明显脱落,各层细胞排列紧密整齐,细胞核各层核膜清晰,细胞无收缩、膨胀;角膜各层结构完整,无明显结构改变,未见脱片现象,各层结构清晰、无裂隙;晶状体结构中央区可见不同程度破碎、脱片、染色不连续;④苏木精-伊红染色显示,甲醛组角膜组织轻微收缩,角膜上皮各层结构较整齐、层次较分明,晶状体和视网膜结构基本完整,但晶状体组织皱缩破裂、空隙形成,细胞排列乱序,可见视网膜组织脱落,各层排列较平整,细胞结构基本清晰,细胞间可见明显空白裂隙;⑤结果表明对于苏木精-伊红染色,Davidson固定液对角膜和视网膜的固定效果较为理想,而甲醛-戊二酸混合固定液是固定小鼠眼球晶状体组织的较好方法。

3种固定液对骨髓细胞涂片免疫组化染色中的应用

比较3种固定液对骨髓细胞学涂片免疫组化染色的影响。方法:将我院收治的 120 例有血液系统疾病的患者作为研究对象,将抽取的骨髓进行涂片,分别用80%酒精(甲组)、冷丙酮(乙组)、10%中性甲醛(丙组)固定涂片,再通过全自动免疫组化染色机进行染色,比较各组经过免疫组化机抗原修复后掉片率及染色后抗体阳性表达率。结果:3组固定后经抗原修复后免疫组化染色掉片率比较,差异有统计学意义(P<0.05),两两比较掉片率:甲组掉片率(0.0%)与乙组掉片率(2.5%)比较,差异无统计学意义(X2=3.038,P=0.081);甲组掉片率(0.0%)与丙组掉片率(52.5%)比较,差异有统计学意义(X2 =85.424,P=0.001);乙组掉片率(2.5%)与丙组掉片率(52.5%)比较,差异有统计学意义(X2=75.235,P=0.001)。3种方法在抗体阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应用80%酒精固定与冷丙酮固定掉片率无或者是及低,但用冷丙酮固定成本比80%酒精高,而且丙酮有毒、对技术员身体有害,所以不适合使用。

结肠杯状细胞染色的结果比较研究

目的通过对大鼠结肠切片标本染色对比卡诺液与甲醛固定液处理标本的区别。方法将正常大鼠与便秘模型大鼠的结肠组织标本分别用卡诺液与甲醛固定液处理,制成石蜡切片标本后,用HE染液和高碘酸希尔法阿尔新蓝染液分别进行染色,统计杯状细胞的数量和着色度对比两种固定液所固定标本的区别。结果与甲醛固定液相比,同组标本用卡诺液固定的杯状细胞数量无显著性差异(P>0.05,n=10),着色度显著增强(P<0.01,n=10),但结肠组织其他细胞着色度无显著性差异(P>0.05,n=10)。结论在杯状细胞的形态学观察中,用卡诺液处理标本明显优于甲醛固定液。在不同实验的标本制备中,固定液的选择应根据实验研究对象的特性而确定。