八肽胆囊收缩素与甲-脑啡肽在EC细胞中的共存及含量的相互关系

用免疫组织化学相邻切片多重标记技术，观察了ＣＣＫ－８与Ｍ－ＥＮＫ在小肠ＥＣ细胞中的共存，并结合图像分析技术研究同一细胞中共存物质含量的关系。实验取猪十二指肠（ｎ＝５），Ｂｏｕｉｎ液固定，制备１μｍ厚连续石蜡切片。在相邻切片上分别用兔抗５－ＨＴ、ＣＣＫ－８和Ｍ－ＥＮＫ抗体进行ＰＡＰ法免疫组织化学染色。结果见５－ＨＴ、ＣＣＫ－８和Ｍ－ＥＮＫ免疫反应细胞的形态、分布相似，主要分布于肠腺的基底部。比较观察所见，大部分５－ＨＴ阳性细胞也同时显示ＣＣＫ－８和Ｍ－ＥＮＫ阳性。ＣＣＫ－８与Ｍ－ＥＮＫ免疫染色强度有共深或共浅的倾向。将所测得的各细胞５－ＨＴ、ＣＣＫ－８和Ｍ－ＥＮＫ免疫染色灰度进行相关与回归分析，显示ＣＣＫ－８与Ｍ－ＥＮＫ免疫反应强度呈正线性相关（ｎ＝３５，ｒ＝０．５６，Ｐ＜０．０１）。而ＣＣＫ－８与５－ＨＴ、Ｍ－ＥＮＫ与５－ＨＴ的免疫反应强度之间未显示出明显的相关性。本研究证明ＣＣＫ－８和Ｍ－ＥＮＫ共存于猪十二指肠ＥＣ细胞中。同一细胞中这两种神经肽在含量上的相关性提示其在合成、释放和功能上可能相互影响。

脑室内注射甲硫-脑啡肽对脾交感神经活动的影响

目的：观察第三脑室注射甲硫脑啡肽（ＭｅｔＥｎｋ）对脾交感神经放电活动的影响．方法：３０只雄性ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ大鼠分为５组，每组６只，分别于第三脑室内微量注射生理盐水，ＭｅｔＥｎｋ（１０μｇ，１００μｇ），用电生理学的方法观察脾交感神经冲动放电活动的变化．结果：第三脑室注射ＭｅｔＥｎｋ后，可剂量依赖性地增强脾交感神经冲动放电活动．事先ｉｖ阿片受体阻断剂纳络酮（Ｎａｌ）可以阻断这种效应，但单独使用Ｎａｌ对脾交感神经兴奋性没有影响．在实验中同时观察了ＭｅｔＥｎｋ对血压和体温的影响，发现随脾交感神经冲动数的增多开始后，血压亦有升高，但体温无明显变化．结论：第三脑室内注射ＭｅｔＥｎｋ能显著地增强脾交感神经冲动放电活动。

甲硫-脑啡肽对大鼠DRG分离神经元ATP-激活内向电流的抑制

本研究探讨了甲硫－脑啡肽（ｍｅｔ－Ｅｎｋ）对ＡＴＰ－激活电流（ＩＡＴＰ）的调制作用。实验在大鼠新鲜分离背根神经节（ＤＲＧ）神经元上进行。应用全细胞膜片钳技术所记录的ＩＡＴＰ为内向电流。在被检测的ＤＲＧ神经元中，９０．０％（４５／５０）的细胞对ＡＴＰ有反应。在４５个对ＡＴＰ感的细胞中：对大部分细胞（２９／４５）施加ｍｅｔ－Ｅｎｋ（１０－９～１０－５ ｍｏｌ／Ｌ）也引起一内向电流；少部分细胞（９／４５）为外向电流；其余的细胞（７／４５）未引起可检测的腹反应。预加ｍｅｔ－Ｅｎｋ后ＩＡＴＰ明显地被抑制，此种抑制作用为剂量依赖性的。在预加１０－９、１０－８、１０－７、１０－６、１０－５ ｍｏｌ／Ｌ ｍｅｔ－Ｅｎｋ后，ＩＡＴＰ的抑制分别为：１３．２±５．４％（ｎ＝５）、３９．２±８．６％（ｎ＝８）、５４．１±８．６％（ｎ＝ ８）、４３．３±７．９％（ｎ＝７）；４３．１±７．９％（ｎ＝７）（ｍｅａｎ±ＳＥＭ）。阿片肽拮抗剂纳洛酮能翻转此种抑制效应。ＩＡＴＰ的量－效关系表明，预加ｍｅｔ－Ｅｎｋ后曲线明显压低，在浓度为１０－３ｍｏｌ／Ｌ时ＩＡＴＰ下降约２５％，而Ｋｄ值几乎不变。

甲硫-脑啡肽对脾交感神经活动的双向调节作用

目的：观察第三脑室微量注射甲硫－脑啡肽（ｍｅｔ－ｅｎｋｅｐｈａｌｉｎ，Ｍｅｔ－Ｅｎｋ）对脾交感神经放电活动的影响。方法：用ｕｒｅｔｈａｎｅ和α－ｃｈｌｏｒａｌｏｓｅ麻醉的雄性Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠，于第三脑室分别微量注射Ｍｅｔ－Ｅｎｋ１μｇ和１００μｇ。结果：脾交感神经放电活动的双向调节作用，即微量注射１μｇＭｅｔ－Ｅｎｋ时脾交感神经冲动数会减少，而注射１００μｇＭｅｔ－Ｅｎｋ时脾交感神经冲动数会增多。事先静脉注射阿片受体阻断剂纳络酮（ｎａｌｏｘｏｎｅ，Ｎａｌ）均可以阻断这两种效应，但单独使用Ｎａｌ对脾交感神经兴奋性没有影响。随脾交感神经冲动数的增多和减少，血压亦有一定程度的升高和降低，但体温无明显变化。结论：Ｍｅｔ－Ｅｎｋ可以在中枢神经系统内通过阿片受体介导的通路调节脾交感神经的兴奋性。

脑啡肽对大鼠海马神经细胞IL-6基因表达的影响

本文研究了大鼠海马内微量注射甲硫－脑啡肽（Ｍ－ＥＮＫ）对海马细胞的白细胞介素－６（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－６，ＩＬ－６）基因表达的影响。大鼠双侧海马内微量注射细菌内毒素脂多糖各１μｌ（ＬＰＳ，浓度：５０ｎｇ／ｍｌ），于９０ｍｉｎ后用原位杂交技术检测到海马结构ＩＬ－６的基因表达，以齿状回颗粒细胞层显著。当海马内预先注射Ｍ－ＥＮＫ（每侧１μｌ，浓度：１０μｇ／μｌ），３０ｍｉｎ后再给予脂多糖则未见ＩＬ－６基因表达。结果表明Ｍ－ＥＮＫ及ＬＰＳ可影响脑内ＩＬ－６的基因表达，在中枢调节机体免疫功能中，ＩＬ－６可能具有重要作用。