乳酸乳球菌电击转化方法的优化

乳酸菌NICE系统是食品级表达系统,本实验以该系统的表达载体pNZ8148和宿主菌NZ9000为研究对象,对电击转化方法进行了优化。结果表明,在培养基中加入2.5%甘氨酸,收集OD600值为0.3的细胞、用配方Ⅰ[(洗涤液Ⅰ:蔗糖0.5 mol·L-1+甘油10%;洗涤液Ⅱ:蔗糖0.5 mol·L-1+甘油10%+EDTA50 mmol·L-1)]洗涤细胞,再转入0.2μg质粒,利用2.5 kV电压和0.2 cm电击杯进行电击转化,恢复培养1.5 h后转化效率最高,达1.6×108 CFU·μg-1。本实验为乳酸乳球菌NZ9000的电击转化参数提供了数据参考,为基于乳酸菌NICE系统的深入研究奠定了基础。