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基于羧基化聚吡咯-氯化血红素和点触发链置换反应信号放大的电化学生物传感器检测转基因作物中CaMV35S序列
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作者 翟应惠 夏子豪 +4 位作者 张鸿雁 叶永康 操小栋 郑海松 李云飞 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期29-36,共8页
为适应快速增长的转基因生物(GMOs)安全评价与管理的需求,高效、可靠的转基因检测技术研究与应用的重要性日益凸显。该文采用一步法合成了羧基化聚吡咯(cPPy)与氯化血红素(Hemin)的纳米复合物(cPPy-hemin),并以其为信号标签合成了一种DN... 为适应快速增长的转基因生物(GMOs)安全评价与管理的需求,高效、可靠的转基因检测技术研究与应用的重要性日益凸显。该文采用一步法合成了羧基化聚吡咯(cPPy)与氯化血红素(Hemin)的纳米复合物(cPPy-hemin),并以其为信号标签合成了一种DNA双链结构功能化的纳米信标(DNA-cPPy-hemin)。利用cPPy-hemin增强的模拟酶催化活性,结合点触发链置换反应(TSDR)信号放大策略,制备了一种新型电化学基因传感器用于转基因成分的灵敏检测。通过信号探针(Ps)与模板链(Ts)、辅助链(As)结合形成DNA双链体结构中的-NH2功能化cPPy-hemin,制备Ts/As/Ps-cPPy-hemin双链DNA结构的纳米信标。在目标花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)序列和燃料链(Fs)存在下,TSDR过程释放出的Ps-cPPy-hemin与固定在电化学沉积金纳米粒子修饰GCE表面上巯基化的DNA捕获探针(Cs)相结合,利用cPPy-hemin对H2O2的模拟酶催化产生的电信号,可实现对CaMV35S的定量检测。在最优条件下,该传感器对目标基因序列的检测范围为1.0×10^(-14)~1.0×10^(-9)mol/L,检出限(S/N=3)为3.2×10^(-15) mol/L。制备的传感器具有良好的选择性、重现性与稳定性,可用于转基因大豆中总DNA提取物的CaMV35S转基因片段的检测。 展开更多
关键词 羧基化聚吡咯 氯化血红素 点触发链置换反应 模拟酶 基因 电化学基因传感器
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巯基乙酸自组装膜DNA电化学传感器对转基因NOS的定量检测 被引量:7
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作者 孙伟 尚智美 +1 位作者 杨茂霞 焦奎 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1859-1861,共3页
A NOS gene electrochemical biosensor was prepared by covalently immobilizing of NOS ssDNA sequence on the mercaptoacetic acid monolayer self-assembled gold electrode with the help of N-(3-dimethylaminopropyl)-N’-et... A NOS gene electrochemical biosensor was prepared by covalently immobilizing of NOS ssDNA sequence on the mercaptoacetic acid monolayer self-assembled gold electrode with the help of N-(3-dimethylaminopropyl)-N’-ethylcarbodiimide hydrochloride(EDC)and N-hydroxysuccinimide(NHS).By using methylene blue as the electrochemical indicator,the increase of cathodic peak current was in linear with the concentration of complementary ssDNA in the concentration range of 5.0×10-8 1.0×10-4 mol/L with the linear regression equation as ΔI pc=1.10lgc+8.25(n=8,γ=0.998 5)and the detection limit as 3.60×10-8 mol/L(3σ). 展开更多
关键词 电化学基因传感器 巯基乙酸 NOS基因 亚甲基蓝 自组装膜电极
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转基因作物中CaMV 35S序列信号双重放大的电化学基因传感方法 被引量:2
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作者 郑海松 谢晶琦 +2 位作者 孙娟娟 叶永康 操小栋 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期989-995,共7页
该文设计并制备了一种针对转基因花椰菜花叶病毒35S(CaMV 35S)启动子检测的新型电化学基因传感器。首先制备了血红素功能化的还原氧化石墨烯(Hemin-rGO),并将其修饰于玻碳电极(GCE)表面,再通过电沉积金纳米粒子(AuNP)固定巯基化的DNA捕... 该文设计并制备了一种针对转基因花椰菜花叶病毒35S(CaMV 35S)启动子检测的新型电化学基因传感器。首先制备了血红素功能化的还原氧化石墨烯(Hemin-rGO),并将其修饰于玻碳电极(GCE)表面,再通过电沉积金纳米粒子(AuNP)固定巯基化的DNA捕获探针。通过设计的夹心型传感策略,当目标序列存在时,辅助DNA通过杂交形成双链并利用其巯基化5'端共价结合AuNP,在负载硫堇(Thi)后放大电流响应,可灵敏检测目标CaMV 35S启动子序列。考察了测试底液pH值、Thi浓度、AuNP富集时间以及DNA序列杂交时间对检测性能的影响。获得最优测试条件为:pH 7.4,Thi浓度为0.5 mmol/L,AuNP富集时间为40 min,DNA杂交时间为60 min。在最优检测条件下,示差伏安电流信号与目标DNA浓度的对数在1×10^(-16)~1×10^(-10)mol/L范围内呈线性相关,检出限为9.46×10^(-17)mol/L。该基因传感器显示出高选择性,较好的稳定性和重复性,用于转基因拟南芥实际样品中CaMV 35S启动子序列的检测,其检测结果与凝胶电泳法一致。方法对食品、饲料及其他工业品等原料或成品中转基因作物成分的快速检测筛查具有很好的应用前景。 展开更多
关键词 基因作物 电化学基因传感器 还原氧化石墨烯 金纳米粒子(AuNP) 硫堇 血红素 免标记
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HIV-1电化学活性-非活性开关分子信标的构建及验证
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作者 李博 顾大勇 +5 位作者 司徒博 李政良 颜晓慧 刘芹兰 郑磊 王前 《检验医学》 CAS 2012年第5期408-411,共4页
目的构建人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)电化学活性-非活性开关分子信标(CAs-MB)并验证其结构及功能。方法合成并纯化针对HIV-1 gag基因保守区序列的CAs-MB,用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和循环伏安法(CV)验证其结构,用差分脉冲伏安法(DPV)... 目的构建人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)电化学活性-非活性开关分子信标(CAs-MB)并验证其结构及功能。方法合成并纯化针对HIV-1 gag基因保守区序列的CAs-MB,用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和循环伏安法(CV)验证其结构,用差分脉冲伏安法(DPV)信号强度评价CAs-MB的识别功能。结果胭脂红酸(CA)单体与CAs-MB FT-IR图的变化证明CA已标记于MB末端,CV图证明CAs-MB电化学活性ON和OFF状态的存在。DPV结果证实其能够在电化学平台上实现对目标序列的特异性识别,且能够区分一个碱基的差异。结论 CAs-MB作为HIV-1 gag基因的特异性识别元件有望用于构建新型HIV-1电化学基因传感器。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒1型 分子信标 电化学基因传感器
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电化学生物传感器在细菌病原体检测中的应用及发展趋势 被引量:3
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作者 王纯(综述) 张若鸿(审校) +1 位作者 杨洋(审校) 郭云昌(审校) 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期168-172,共5页
便携式生物传感器可以对病原菌进行快速检测,且特异性强、灵敏度高,检测效率远高于传统检测手段。其中基于生物活性元件的电化学生物传感器体积更小、速度更快、检测灵敏度更高,并且生物活性材料具有选择性广、活性强,可与换能器相互联... 便携式生物传感器可以对病原菌进行快速检测,且特异性强、灵敏度高,检测效率远高于传统检测手段。其中基于生物活性元件的电化学生物传感器体积更小、速度更快、检测灵敏度更高,并且生物活性材料具有选择性广、活性强,可与换能器相互联系等特点,已被越来越广泛地应用于微生物的检测。本文着重介绍了3类电化学生物传感器在细菌检测领域的实际应用情况,并对其所面临的机遇与挑战进行了展望。 展开更多
关键词 电化学基因传感器 电化学免疫传感器 电化学适配体传感器 细菌 检测
原文传递
基因传感技术及目前存在的问题和发展对策 被引量:18
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作者 庞代文 颜蔚 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第3期389-395,共7页
对最近几年报道的比较有特色的光学、压电、电化学等基因 ( DNA)传感器方面的研究工作进行介绍 ,并就目前基因传感器研究中存在的问题进行了分析讨论 ,提出了相应的发展对策 .
关键词 DNA 基因传感技术 基因检测 光学基因传感器 压电基因传感器 电化学基因传感器
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