体外培育牛黄抑制大鼠三叉神经节细胞电压依赖性钙通道电流参与镇痛机制

目的:研究体外培育牛黄(CBS)对大鼠三叉神经节(TRG)细胞电压依赖性钙通道电流(ICa)的影响,探讨牛黄镇痛作用的电生理机制。方法:在培养大鼠TRG细胞上采用全细胞膜片钳记录ICa。结果:CBS能够剂量依赖性地抑制TRG细胞电压依赖性钙通道电流,0.2,2,20μg.ml-1CBS可使钙电流幅值分别减少(30.3±4.7)%、(41.9±3.6)%和(56.7±6.8)%(n=6,P<0.01)。结论:CBS对钙电流的阻滞作用可能是其镇痛作用机制之一。

β-淀粉肽(1-40)对海马神经元高电压激活钙电流的作用及银杏内酯B对该作用的影响(英文)

应用全细胞膜片钳技术探讨β-淀粉肽(1-40)(β-amyloid peptide1-40,Aβ1-40)对新鲜分离的大鼠海马CA1区锥体神经元高电压依赖性钙通道电流(high voltage-activated calcium channel current,INVA)的作用并观察银杏内酯B(ginkgolide B,GB)对该作用的影响。利用细胞外灌流或者电极内液给药的方法,比较加药前后电流幅度的变化以判断药物是否发挥作用。细胞外给予老化处理的Aβ1-40可以浓度依赖性地增强IHVA的幅度,Aβ1-40的浓度为0．01-30 μmol/L时可分别使IHVA幅度增加(5．43±3．01)％(n=8, P>0．05)、(10．49±4．13)％(n=11,P>0．05)、(40．69±8．01)％(n=16,P<0．01)、(58．32±4．85)％(n=12,P<0．01)和(75．45±5．81)％ (n=6,P<0．01);新鲜配制的Aβ1-40对IHVA几乎没有影响(n=5,P>0．05)。L-型钙通道阻断剂nifedipine可以抵消Aβ1-40对IHVA的增强作用。Aβ1-40(1．0 μmol/L)对IHVA的增强作垌可以被cAMP的类似物8-Br-cAMP和腺苷酸环化酶(adenylyl cyclase,AC)的激动剂forskolin增强[分别为(66．19±5．74)％,P<0．05和(73．21±6．90)％,P<0．05],被蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)的抑制剂H- 89减弱[(20．08±2．18)％,P<0．05]。GB可有效地减弱Aβ1-40对IHVA的增强作用。以上结果表明Aβ1-40可通过AC-cAMP-PKA 增强IHVA引起胞内钙超载,这可能是其产生神经毒性作用的机制之一。GB可通过抑制Aβ1-40引起的异常钙离子内流对神经元起一定保护作用。

丹参酮ⅡA对Aβ25-35引起的Meynert核团神经元钙电流变化的影响

目的:探讨丹参酮IIA(TanⅡA)和β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)对Meynert核团(nbM)神经元电压依赖钙电流的影响。方法:运用细胞急性分离和单细胞膜片钳技术,采用全细胞记录方式,检测SD大鼠nbM神经元电压依赖钙电流、TanⅡA对nbM神经元钙电流的影响、加入亚毒性剂量Aβ25-35后钙电流的变化以及TanⅡA对其引起钙电流变化的作用。结果:通过灌流分别给予含有不同浓度TanⅡA的细胞外液,记录到的峰值电流与正常峰值电流基本一致,在0 mV时对峰值电流密度进行比较,差异没有统计学意义(P>0.05);给予亚毒性剂量Aβ25-35的细胞外液灌流,峰值电流明显增大,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);不同浓度TanⅡA与200 nmol/L Aβ25-35同时加入细胞外液灌流,其电压依赖钙电流与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:在体外,Tan IIA能抑制Aβ引起的nbM神经元细胞膜上钙电流放大,减少钙内流,以保护神经元。

皮质酮对大鼠背根神经节细胞钙电流的快速抑制作用

探讨了皮质酮 (Corticosterone)对急性分离的大鼠背根神经节细胞 (DRG神经元 )上电压依赖性钙通道电流的快速作用及作用机制。实验采用全细胞膜片钳方法 ,结果显示三种浓度的皮质酮 ,10 7mol/L ,10 9mol/L ,10 12 mol/L均可以在 3～ 5s的时间内 ,快速抑制DRG神经元上的电压敏感钙通道电流 ,其平均抑制的程度分别为4 8% ,37%和 2 5 %。且这种快速抑制作用在吹药 15s后可以达到最大 ,停药 2 0s后钙电流基本恢复为原来的大小。在外液中加入 5 0 0nmol/L的PKC抑制剂BIS之后 ,皮质酮的对钙电流的快速抑制作用被阻断 ,提示这一作用可能与PKC信号转导途径有关。

U69 593对家兔心室肌细胞L型Ca^(2+)电流的影响

目的 :研究 U695 93对家兔心室肌细胞 L 型 Ca2 +电流 ( ICa· L)的影响。方法 :采用全细胞膜片钳技术记录家兔心室肌细胞 IC a· L。结果 :在 -2 0～ +4 0 m V测试电压范围内 ,10 0 nmol/ L U695 93显著增加 IC a· L,以 +10 m V为最大激活电压 ,其峰值 ICa· L由加药前 -7.1± 0 .4p A/ p F增至 -8.3± 0 .5 p A/ p F ( P<0 .0 1,n=8)。 10 0 nmol/ LU 695 93不影响 IC a· L电压依赖性激活与失活特性。结论 :U695 93可增加家兔心室肌细胞 ICa· L。

布格呋喃抗焦虑及抑郁作用的电生理机制

研究布格呋喃(AF-5)抗焦虑及抑郁作用的电生理学机制。采用全细胞膜片钳技术,观察AF-5对原代培养大鼠皮层神经元上电压依赖性钠离子通道、电压依赖性钾离子通道、电压依赖性L-型钙离子通道、γ-氨基丁酸(GABA)依赖的氯离子通道以及稳定转染于HEK293细胞系上Kv2.1通道电流的影响。结果表明,AF-5能明显抑制原代培养大鼠皮层神经元上电压依赖性延迟整流钾电流(IK(DR))、L-型钙通道电流(IL-Ca)以及稳定转染于HEK293细胞系上Kv2.1通道电流,其IC50分别为6.17、4.4和5.29μmol.L 1,但对电压依赖性钠通道电流(INa)、瞬时外向钾电流(IK(A))以及GABA介导的氯离子通道电流的抑制作用较弱。研究表明,AF-5的抗焦虑及抑郁作用可能与其抑制以Kv2.1为主的神经元IK(DR)及IL-Ca有关。