重组人甲状旁腺素1-34肽谱及一级结构的液相色谱/电喷雾离子化质谱法分析

目的:采用液相色谱/电喷雾质谱联用法(LC—ESI—MS/MS)对重组人甲状旁腺素1—34(rh—PTH 1—34)进行肽谱及一级结构分析。方法:用LC—ESI—MS法测定相对分子质量,并在线分析其胰蛋白酶和V8蛋白酶酶解质量肽谱;结合质谱源内碰撞诱导电离技术解析酶解肽段的氨基酸序列。结果:相对分子质量测定值与理论值一致;胰蛋白酶和V8蛋白酶酶解肽段氨基酸序列与理论值基本一致,序列覆盖率分别为97%和88%。结论:LC—ESI—MS/MS联用法为基因重组多肽类药物的一级结构分析和质量控制提供了新途径。

重组L-天门冬酰胺酶II的液相色谱/电喷雾离子化质谱法分析

目的 对基因重组L 天门冬酰胺酶II产品进行一级结构分析。方法 采用流动注射方式 ,电喷雾离子化质谱法测定分子量 ;三氯乙酸变性 ,胰蛋白酶水解后 ,HPLC测定肽图谱 ;结合质谱源内碰撞诱导解离技术 ,解析酶解肽段的氨基酸顺序。结果 分子量测定值与理论值不符 ,质谱解析表明样品中存在 3个氨基酸变异现象 ,由此计算的分子量与测定值吻合。结论 液相色谱 /电喷雾质谱法为基因重组蛋白质药物的一级结构分析和质量控制提供了新途径。

解吸电喷雾离子化质谱法可精确检测1ng的细菌

美国珀杜大学的研究人员发明了一种新方法——解吸电喷雾离子化质谱法，可快速并精确地检测出包括大肠杆菌和沙门菌在内的细菌。利用质谱仪等常用方法来检测和分析细菌往往需要几个小时的时间，因为样本需要经过一系列步骤处理后才能用于检测。新方法虽然也要用到质谱仪，但省去了对样本的繁琐处理过程，仅用不到1min就可检测出细菌。珀杜大学发布的消息说，利用这种新方法，研究人员不仅能够检测出仅有1ng的细菌，还可以确认细菌的亚种。

电喷雾离子化/质谱法(ESI/MS)及其在生物大分子研究中的应用

电喷雾离子化 /质谱法 (ESI/MS)在各种有机化合物、多肽、蛋白质 (含糖蛋白 )、核苷酸、糖、脂类及合成高分子物质等分析领域获得了广泛的应用 ,本文系统介绍了ESI/MS的基本原理 ,其联用技术 ,及其在生物大分子研究 ,包括肽图谱测定 ,糖分析和核苷酸分析中的应用。

月桂酰基苹果酸酯胶束电动色谱-质谱法同时测定牛黄上清片中5种生物碱

建立了基于月桂酰基苹果酸酯的胶束电动色谱-质谱法同时分离测定牛黄上清片中黄连碱、小檗碱、药根碱、黄柏碱以及川芎嗪5种有效成分含量的新方法。以7.5 mmol/L月桂酰基苹果酸酯-15 mmol/L氨水-50 mmol/L醋酸铵(含12.5%的乙腈,pH=7.0)为电泳介质,未涂层弹性石英毛细管(88 cm×50μm)为分离通道,50%异丙醇水溶液(含3 mmol/L乙酸)为鞘液,在25 kV的运行电压下,各组分可以在18 min内得到基线分离。各组分的浓度与其峰面积呈现良好的线性关系,迁移时间和峰面积的相对标准偏差均小于5%,样品中5种生物碱成分的样品加标回收率在96.0%～105%之间。该法简便、快速、准确、重现性好,可用于牛黄上清片中这5种有效成分含量的同时测定。

D-赖氨酸、L-谷氨酰胺和L-酪氨酸对格列美脲及其顺式异构体识别的电喷雾质谱法研究

目的使用电喷雾质谱技术,研究3种氨基酸(D-赖氨酸、L-谷氨酰胺和L-酪氨酸)作为手性选择探针对格列美脲和格列美脲异构体的识别效应。方法分别将3种氨基酸与格列美脲及其顺式异构体溶液混合,用电喷雾/离子阱质谱提取非共价结合的复合物,在二级质谱中通过碰撞诱导解离(CID)方法给予不同的碎裂能量,考察碎片离子的丰度从而进行格列美脲及其顺式异构体的识别。结果 L-酪氨酸、D-赖氨酸和L-谷氨酰胺对格列美脲及其顺式异构体均有识别效应,识别率分别为1.61、2.92和2.17。结论以3种手性氨基酸作为立体异构区分探针,首次实现了格列美脲和格列美脲顺式异构体的质谱法快速识别。

盐酸曲美他嗪健康人中的药动学研究和生物等效性评价

目的:建立LC-MS方法测定盐酸曲美他嗪在健康人血浆中的浓度,并进行药物动力学研究和生物等效性评价。方法:18名男性健康受试者,随机分成2组,交叉口服受试制剂和参比制剂各20 mg,采用LC-MS法测定人血浆中曲美他嗪的浓度。结果:受试制剂与参比制剂的各主要药动学参数:t_(1/2)分别为(7.31±2.36)和(6.74±2.17)h,t_(max)分别为(2.1±0.9)和(1.8±0.6)h,C_(max)分别为(92.05±19.64)和(96.71±22.31)ng·ml^(-1),AUC_(0-24)分别为(691.24±171.82)和(706.31±189.60) ng·h·ml^(-1)。对两种制剂的参数C_(max)、AUC_(0-24)对数转换后先进行方差分析,再进行双单侧t检验。双单侧t检验结果表明上述两个参数生物等效,t_(max)经非参数法检验差异没有显著性意义(P>0.05),这表明两种制剂生物等效,相对生物利用度(101.5±26.7)%。结论:两种制剂具有生物等效。

采用LC-DAD-ESI-MS/MS法分离鉴定新品红标准试剂的组分

目的：对新品红标准试剂的组分进行分离、鉴定,以了解掌握该标准试剂的组分情况,为该批标准试剂的标化提供依据。方法：采用液相色谱-二极管阵列检测器-电喷雾离子化串联质谱法（LC-DAD-ESI-MS/MS）进行分离鉴定。色谱柱为Phenomenx Kinetex C18柱（100 mm!2.1 mm,2.6$m）,柱温35℃;流动相A为乙腈,流动相B为0.05 mol·L-1醋酸铵溶液,梯度洗脱（0～30 min,流动相A的比例从5%线性改变至45%）,流速为0.2 mL·min^-1;二极管阵列检测器的扫描范围为200～700 nm（提取波长：550 nm）,质谱的扫描范围为m/z 110～400,裂解电压为200 V。结果：新品红标准试剂（Sigma公司产品）含3种组分,百分比含量分别为71.5%、25.7%和2.8%。根据其色谱保留行为、UV提取图谱、质谱裂解信息,并结合相关的文献报道,将其分别归属为品红Ⅲ（magentaⅢ或new fuchsin（NF）,主组分）、品红Ⅱ（magentaⅡ）和品红Ⅰ（magentaⅠ）。薄层色谱结果验证了其组分情况。结论：采用串联色谱技术,利用目标化合物的色谱保留行为、紫外吸收光谱和质谱裂解规律等综合信息可为新品红标准试剂的定性鉴别提供技术依据。