液相色谱-电喷雾离子肼质谱联用法在体内药物分析中的应用

在现代药物研发中,液相色谱-质谱联用法对药物的吸收、分布、代谢和消除分析是一种强有力的工具。电喷雾离子肼作为一种质谱检测模式,可产生MSn多级裂解碎片峰,进而获得丰富的结构信息,在体内药物分析时可利用这些碎片峰(MSn)建立一种强专属性和高灵敏度的高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)方法。该文评述了高效液相色谱-电喷雾离子肼串联质谱(HPLC-ESI-MSn)方法在体内药物分析中的应用。

6～8岁儿童龋病相关唾液蛋白组的电喷雾离子肼—串联质谱分析

目的采用电喷雾离子肼—串联质谱分析法(ESI-MS/MS)比较高龋组和无龋组儿童唾液蛋白组,初步探索唾液蛋白组与龋病的关系,并探索龋敏感性相关的生物标志物。方法以高龋组、无龋组儿童各10名为研究对象,收集唾液样本,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),经过滤-辅助的蛋白酶解(FASP)及液相柱色谱分析后,进行ESI-MS/MS鉴定,并对高龋唾液组和无龋唾液组组间的蛋白差异进行分析。结果高龋组蛋白量显著高于无龋组,高龋组、无龋组鉴定的多肽数分别为602、481个,分别属于286、227个蛋白。两组之间差异表达多肽数为361个,差异表达蛋白数为118个,包含基质金属蛋白酶9、黏蛋白7、乳铁蛋白、碳酸酐酶6、天青杀素、冷凝集素等。结论高龋组儿童唾液蛋白量高于无龋组,基质金属蛋白酶9、黏蛋白7、乳铁蛋白、碳酸酐酶6、天青杀素、冷凝集素等高龋组与无龋组之间差异表达蛋白的检测,为进一步探索龋敏感性相关生物蛋白标志物奠定了基础。

N-磷酰化多巴胺与溶菌酶相互作用的ESI-MS研究

采用电喷雾离子肼-质谱(ESI-MS)研究了一系列结构具有可比性的N-磷酰化多巴胺与溶菌酶的非共价相互作用,比较了磷上不同取代基对相互作用的影响.结果表明,磷上的烷氧取代基上烷基碳原子的个数及排列顺序对二者相互作用有较大影响;取代基上碳链越长,溶液中溶菌酶的构象越趋于收缩,二者之间越容易形成带低电荷和高质核比的复合物,且其稳定性也随着取代基的增长而增强;当取代基碳原子数相同时,直链取代的磷酰化多巴胺与溶菌酶形成的复合物比支链取代的底物与溶菌酶形成的复合物稳定.

HPLC-MS法快速检测平喘类保健食品中非法添加的化学物质

针对平喘类保健食品中非法添加化学物质的现象,建立HPLC-MS法快速检测平喘类保健食品中12种非法添加化学物质。待测样品经甲醇提取,采用液相色谱-电喷雾离子肼质谱联用法测定。色谱条件:Thermo Hypersil GOLD C18色谱柱(4.6×250mm,5μm);梯度洗脱:流动相A为甲酸铵溶液;流动相B为乙腈;质谱条件:扫描方式:正离子扫描;雾化气压:35psi,去溶剂气温度:350℃,去溶剂气流量:10L/min;离子扫描范围:50~1000m/z;通过对照品与样品一级、二级质谱图的对比,定性鉴别样品中非法添加的化学物质。在10批样品中,检测到有9批样品中含有化学物质。结果表明该方法简便、快捷,准确性及灵敏度均可满足定性检查的要求。