小鼠控制性脑皮质撞击模型的构建及分级

目的建立小鼠控制性脑皮质撞击模型,并对损伤程度进行分级,为探索小鼠颅脑创伤的病理生理机制和治疗方法创造条件。方法雄性C57BL/6J小鼠24只,分为4组(实验组3组,对照组1组),每组随机分配6只动物,应用PinPointTMPCI3000精细颅脑撞击仪,设定不同的打击参数,精确撞击小鼠脑皮质。其中,实验组打击深度分别为0.5 mm、1.0 mm、1.5 mm;打击时间均为80 ms;打击速度均为1.5 m/s。对照组只开骨窗,不打击脑皮质。致伤后观察小鼠意识和神经反射的抑制时间。伤后24h处死小鼠,取脑组织行HE染色,Fluoro-Jade B组织荧光染色。观察小鼠脑组织损伤侧海马CA3区退变神经元数目的变化。结果小鼠的脑损伤程度和打击强度相关;打击深度为0.5mm时模拟轻度颅脑损伤;打击深度为1.0 mm时模拟中度颅脑损伤;打击深度为1.5 mm时模拟重度颅脑损伤。结论应用PinPointTMPCI3000精细颅脑撞击仪成功创建出小鼠控制性脑皮质撞击模型,并且给予轻度、中度、重度损伤分级,为进一步研究颅脑创伤病理生理机制和治疗方法创造条件。

控制性皮质撞击法建立大鼠脑外伤模型的昏迷及认知障碍观察

目的探讨控制性皮质撞击(CCI)法建立大鼠脑外伤模型的昏迷、神经行为学和认知功能表现。方法 40只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成对照组(n=10)、假手术组(n=10)、CCI组(n=20)。CCI组大鼠进行双侧额叶打击,打击速度3.5 m/s,深度7 mm,停留时间250 ms。记录昏迷时间。于术后10 d、20 d分别进行水迷宫测试。结果 CCI组术后意识障碍时间较对照组和假手术组延长(P<0.05)。术后10 d、20 d,CCI组逃避潜伏期均较对照组和假手术组显著延长(P<0.001),目标象限停留时间百分比显著减少(P<0.001)。结论大鼠双侧额叶CCI可以建立重度脑外伤昏迷动物模型,对认知障碍产生长期影响。

可控性皮质撞击仪建立大鼠脊髓损伤模型的研究

目的 研究应用可控性皮质撞击仪（eCCI）建立大鼠脊髓损伤模型的方法.方法 选取健康雌性SD大鼠20只,按照随机数字表法分为假手术组和脊髓损伤组,各10只.脊髓损伤组应用eCCI对大鼠T10节段行精确撞击（打击速率4 m/s,打击时间200 ms,打击深度2 mm）.假手术组仅开骨窗,但不做打击.采用改良Tarlov和Rivlin评分法评价大鼠神经功能的改变,苏木精-伊红染色观察脊髓病理学变化,运动和感觉诱发电位判断大鼠神经电生理变化情况,磁共振成像检测大鼠脊髓影像学变化.结果 脊髓损伤组大鼠下肢全瘫、不能摆动尾巴、出现尿潴留;改良Tarlov和Rivlin评分均明显低于假手术组[（1.20±0.33）分比（4.00±0.26）分、（41.0±1.6）分比（65.0±1.3）分],差异有统计学意义（P＜0.05）;苏木精-伊红染色显示脊髓损伤周围结构排列紊乱,炎性细胞浸润,局部组织变性坏死,形成瘢痕,伴大量红细胞渗出;运动及感觉诱发电位波均不能引出;磁共振成像显示其T10段脊髓正常结构破坏,上下行纤维束离断.结论 应用eCCI成功建立了大鼠脊髓损伤模型,为进一步的研究提供了标准的动物模型建立方法.

Krüppel样因子7促进创伤性颅脑损伤时JAK2/STAT3信号通路的活化和抑制神经元凋亡

目的 探讨Krüppel样因子7(KLF7)在创伤性颅脑损伤(TBI)后海马区细胞凋亡和神经功能障碍的保护作用及调控机制。方法 应用控制性皮质撞击(CCI)法建立小鼠TBI模型,侧脑室注射KLF7慢病毒(AAV-KLF7)过表达KLF7,Western bolt和实时荧光定量PCR检测小鼠海马内KLF7表达变化,Western bolt检测海马组织细胞凋亡因子、JAK2/STAT3信号通路关键因子及其磷酸化水平,TUNEL法检测海马组织神经元凋亡情况,甲酚紫染色检测各组动物大脑皮质损伤体积,神经功能评分和旋转杆实验检测神经功能障碍改变。结果 TBI后1 d,海马区KLF7蛋白和mRNA表达显著增高,3 d后恢复正常。TBI海马区Bax和Cleaved Caspase-3(C-Cas-3)水平、TUNEL阳性细胞百分比、脑皮质损伤体积百分比、p-STAT3/t-STAT3和p-JAK2/t-JAK2比值显著增加,Bcl-2水平显著降低,神经功能评分和旋转杆上运动时间均显著降低;侧脑室注射AAV-KLF7可促进TBI诱导的p-STAT3/t-STAT3和p-JAK2/t-JAK2比值增加,抑制TBI诱导的Bax和C-Cas-3水平增加。结论 KLF7可通过促进TBI对JAK2/STAT3信号通路的活化,减少TBI所致的神经元凋亡。

控制性脑皮质撞击致不同损伤程度颅脑创伤大鼠模型的建立

目的 应用控制性脑皮质撞击仪（CCI）建立不同损伤程度的颅脑创伤（TBI）大鼠模型,为探索TBI病理生理进程提供实验依据.方法 40只雄性Wistar大鼠按数字表随机分为4组（3组实验组、1组假手术组）,每组10只.应用电子控制性皮质撞击仪（eCCI-6.3）,设定不同打击参数,对大鼠顶叶大脑皮质区进行精确撞击.其中,实验组打击速率分别为4 m/s、5m/s、6m/s,打击时间均为200 ms,打击深度均为2 mm.假手术组仅开骨窗不行撞击.致伤24 h后采用神经功能缺陷评分（NSS）观察大鼠行为学改变,应用多普勒流量计测定大鼠脑损伤周围区域局部脑血流（rCBF）.致伤48 h后处死大鼠,取脑组织行甲苯胺蓝染色观察脑组织缺损程度,HE染色评估脑组织病理学改变,透射电镜观察神经细胞超微结构.结果 大鼠脑损伤程度与打击强度相关,打击速率4m/s模拟轻度TBI、5m/s模拟中度TBI、6m/s模拟重度TBI.与假手术组比较,TBI各组大鼠神经功能受损,局部脑血流量降低（均P＜0.01）,脑组织神经元皱缩、细胞周围空泡、线粒体结构异常,而且损伤程度随打击速率增强而递增,组间差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 应用eCCI脑皮质撞击仪成功建立TBI大鼠模型,通过调整打击速率给予轻度、中度和重度TBI分级,为进一步研究TBI病理生理机制提供了一种精确有效的TBI动物模型制作方法.

控制性皮质撞击损伤模型及其应用进展

颅脑损伤（traumaticbraininjury，TBI）是指由外伤引起的脑组织损伤，其发生率、致死率、致残率均较高，是当今威胁人类生命健康的重要疾患之一。受伦理学限制，临床研究通常存在一定的局限性。目前，可用于基础研究的TBI动物模型较多，其损伤方式和生物力学机制不同，基本可分为撞击伤模型、非撞击加速伤模型和爆炸冲击波伤模型3类，不同模型间各有利弊，应用范围也各有不同。

泛素可对控制性皮质撞击伤后的免疫应答产生影响

以往研究认为，外源性泛素能够减少控制性皮质撞击伤（CCID模型大鼠的大脑皮质挫伤面积与脑组织含水量，但具体机制不清；另外一些研究显示泛素有免疫调节功能。在此基础上德国学者研究假设泛素可以调节CCII后的局部先天性免疫应答，实验首先制作CCII大鼠模型，通过现有仪器和方法监测免疫细胞、

一种模拟大鼠不同程度颅脑损伤模型的构建与评估

目的构建并评估可以模拟不同损伤程度的大鼠颅脑损伤模型。方法将12只大鼠随机分为3组(轻、中、重度颅脑损伤组),以可控性颅脑损伤模型为基础,不同组采用特定致伤参数(探头致伤深度:轻度为2~3 mm,中度为3~4 mm,重度为4~5 mm;致伤速度均为2.5 m/s,致伤时间为0.1 s),造成不同程度颅脑损伤。分别采用MRI、行为学定量评价,颅脑病理定性分析,评估颅脑损伤程度。结果损伤后大鼠均出现不同程度行为异常,损伤颅脑病理显示组织神经元减少,小胶质细胞浸润,不同程度充血、水肿,轻度颅脑损伤组损伤体积(11.33±1.11)mm^3,中度颅脑损伤组损伤体积(20.77±1.90)mm^3,重度颅脑损伤组损伤体积(46.19±12.79)mm^3。结论采用可控性颅脑损伤方法可构建具有良好重复性、可靠性、稳定性的大鼠颅脑损伤模型,多种方式定量评估损伤程度相对精确,为后续研究奠定了基础。

可兼顾海图和雷达的新装置

日本古野公司推出新型的FCR-21×7／28×7型海图雷达装置，可满足国际海事组织等部门对自动雷达标绘仪雷达、电子海图显示与信息系统、高速控制器兼容性，以及带有海图装置雷达等所规定的最新标准和规则．并遵守有关船舶载运器的规定。

小鼠颅脑创伤模型的构建及运动功能评估

目的应用电子控制性脑皮质撞击仪（eCCI）建立不同年龄段不同损伤程度小鼠颅脑创伤（TBI）模型，并评估其伤情及长期运动功能。方法采用随机数字表法将3月龄和10月龄雄性C57BL／J6小鼠各70只分为假手术组（n=10）和实验组（轻、中、重度TBI组，n=20只）。实验组应用eCCI仪，采用固定打击速度（4．5m／s）及停留时间（200ms）调整打击深度的参数设定方法进行模型制备。假手术组仅行去骨瓣手术。致伤后1d干湿重法测定脑组织含水量、苏木素，伊红（HE）染色观察组织病理学改变，伤后1、2、3、7、14、21、28d平衡木行走实验、转棒实验评估运动功能。结果3月龄和10月龄小鼠轻、中、重度TBI的打击深度分别为1．2、1．6、2．0mm；1．6、2．0、2．4mm。与假手术组比较，各实验组小鼠脑组织含水量逐级增多，差异有统计学意义[（3．50±0．60）％、（4．47±0．62）％、（5．50±0．76）％对（0．36±0．14）％；（4．08±0．95）％、（5．36±1．23）％、（6．60±0．98）％对（0．40±0．10）％，P〈0．05]。HE染色结果显示各实验组脑组织皮质连续性破坏，创伤灶周围神经元数量减少，随打击深度增加，损伤程度逐级加重。平衡木行走实验结果表明，实验组小鼠通过平衡木时间较假手术组明显延长（P〈0．05），通过时间与打击深度明显相关，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论应用电子控制性脑皮质撞击仪可稳定、高效、精确地建立不同年龄段不同损伤程度小鼠TBI模型。同时，该模型也可用于TBI恢复期运动功能相关的研究。