变性梯度凝胶电泳方法在内源微生物驱油研究中的应用

应用基于聚合酶链式反应(PCR)的变性梯度凝胶电泳方法(DGGE)分析了在高温、高压和厌氧条件下富集培养的油藏内源微生物16S rDNA。用化学裂解法(SDS)直接提取了油藏微生物基因组DNA,并以此基因组DNA为模板,用特异性引物对16SrDNA的V8和V9可变区进行聚合酶链式反应扩增。对长约400bp(碱基对)的扩增产物进行DGGE分离后,得到了分离较好的电泳图谱。结果表明,DGGE方法可以分离不同油藏微生物16S rDNA的V8和V9可变区的DNA扩增片断。在内源微生物驱油研究中,DGGE方法是在分子水平上分析油藏微生物群落结构和监测微生物群落动态变化的有效工具。

多种小麦蛋白质酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法研究

研究了离子强度、缓冲液 p H、慢离子浓度、凝胶浓度等因素对小麦蛋白质 APAGE分离效果的影响 ,采用 L1 6 ( 41× 2 1 2 )正交试验进行了条件优化 ,所建立的甲酸盐 APAGE方法 ,具有分辩率高、重复性好的特点 ,可通过改变凝胶浓度实现不同蛋白的分离研究。因而此法在小麦蛋白分离、遗传研究。

cDNA-SCOT基因差异表达两种电泳方法的比较研究

应用cDNA-SCOT研究了低温胁迫下不同抗寒性甘蔗品种的基因差异表达,比较了两种PCR产物电泳方法。结果表明,采用琼脂糖凝胶电泳成本较低,操作简单,省时,其凝胶图像条带亮白,背景为黑色,主带明显,副带较模糊;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳成本较高,操作复杂,耗时,其凝胶电泳图像条带呈黑褐色,背景为浅黄色,主带和弱带清晰易读,但部分引物泳道背景深,影响差异基因鉴别效果。根据两种电泳方法的优缺点,提出应用cDNA-SCOT进行基因差异表达研究时的相关建议。

一种经济、简便的双向电泳方法

双向电泳是蛋白质分析的一门较为精确的技术 .对电泳方法进行改良并采用普通垂直薄板等电聚焦技术 ,不仅大大降低了蛋白质双向电泳的成本 ,而且操作过程简单 ,是一种用于初步分析蛋白质的较好方法 .在中华卵索线虫 (Ovomermissinensis)雌雄成虫可溶性差异蛋白的分析中获得了较满意的结果 .这一改良方法的建立 ,可望促进双向电泳的广泛应用 .

酸奶中乳酸含量测定的毛细管区带电泳方法研究

建立了测定酸奶中乳酸含量的间接紫外检测毛细管区带电泳方法。在未涂渍的石英毛细管(内径75μm,有效长度50cm)中,以10.0mmol/L的2,6-吡啶二羧酸-0.5mmol/L十六烷基三甲基溴化铵(pH3.5)为运行电解质,检测波长214nm,在-15kV分离电压下酸奶中乳酸6min内能得到分析。方法重现性好,迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别在1.0%和2.0%以内。在相应的浓度范围内,峰面积与样品浓度之间呈现良好的线性关系。该法简单、快速、灵敏度高,为测定酸奶中乳酸含量提供了一种高效、快速、简便的方法。

介绍鱼类组织中蛋白质及同功酶的电泳方法

近年来用醋酸纤维薄膜、琼脂糖、淀粉凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持物的电泳分离技术，对生物的各种组织蛋白及同功酶的研究已广泛应用。目前利用蛋白电泳和同功酶谱的变化来鉴定鱼类、了解种的地理分布、生理情况以及遗传育种、生物进化等方面已成为一种有效的实验生化技术。

鉴定菜豆品种的电泳方法

应用非变性的梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS线性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳、聚丙烯酰胺和琼脂糖凝胶电聚焦分析了种子形态近似但茎生长习性不同(一个直立、一个缠绕)的两个菜豆品种的种子蛋白,结果表明它们的种子蛋白在电荷和分子量组成上都有显著差别.尤其以SDS电泳谱差别最大,种子系由北京市种子公司提供.总共33种亚基,两个品种共有的仅13个左右.因此我们提议进行菜豆品种鉴定,最好用SDS线性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳.本文首次报道菜豆种子蛋白有高分子量亚基存在.在较低分子量范围(10—25千道尔顿)存在变异,并可用在品种鉴定上.

一种使DNA条带细窄的电泳方法

STR已经成为法医学进行个体识别和亲子鉴定的重要遗传标记。目前STR常通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离PCR产物达到分型的目的。因此,电泳结果的条带是否清晰,重复性是否良好直接影响到STR分型的准确性。

家畜蛋白质多态性研究的电泳方法进展

众所熟知,带有电荷的胶粒或分子在电场的作用下,向阳极或阴极移动的现象,称之为电泳。如果带电胶粒或分子的多种成分,在某种固态介质上经过电泳,由于各自的迁移速度不同,被分离在不同的区带,从而达到分析、制备的目的,这种实验技术就叫区带电泳。电泳是20世纪初发展起来的一项先进技术,广泛应用于生物蛋白质多态性的研究。

血红蛋白电泳方法的研究进展

血红蛋白(Hb)电泳是分离鉴定Hb最常用且最为有效的方法,使用不同支持介质的电泳方法,其原理、分辨敏感度、操作简繁各有特点,对分离诊断Hb疾病有重要价值的HbA2和HbF的效果也各有不同。因静止型地中海贫血可以不表现出HbA2的异常,所以电泳分析都有一定的漏诊率,因此电泳只能作为Hb疾病的筛查方法。

酶学方法和电泳方法相结合测定溶菌酶活性的新方法

测定体液中溶菌酶含量的常用方法为琼脂平板打孔法,其灵敏度低,最适测定范围为10～1000μg/ml。用此方法研究血清溶菌酶含量的细微变化是有困难的。我们设计了一种可称之为火箭电泳的新方法以测定溶菌酶含量。该法将酶学方法和电泳方法结合在一起。将底物溶壁微球菌混合在琼脂糖凝胶中。溶菌酶是一种碱性蛋白质,等电点为 pH10.5～11.0,而底物为细菌壁的酸性多糖,在介于两者等电点之间的 pH 条件下,如 pH6.4,前者带有正电荷,后者带有负电荷,两者因静电吸引而紧密相结合。结合后的溶菌酶在凝胶中不能移动,一旦底物被水解,溶菌酶又恢复游离状态,而向负极移动。电泳过程为酶与底物结合、水解、泳动、再结合。上述过程反复进行至电泳停止及酶失活力止。

SSR分子标记两种电泳方法快速区分玉米种子杂交种

采用SSR分子标记方法,从40对SSR引物中筛选出3对特异性高的引物,区分10个玉米杂交种,用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和荧光毛细管电泳两种方法分离PCR产物,分析其位点多态性信息,快速区分品种,并比较两种电泳方法。结果表明,SSR分子标记法区分玉米品种方法简单、重复性好、结果可靠。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳适合检测少量样本,荧光毛细管电泳适合高通量检测,结果更精确,两种电泳方法都可以有效地区分不同玉米品种,实践中可根据不同要求和试验条件选择不同的电泳方法。

农作物种子检测中常用电泳方法的比较分析

种子质量是农业生产的重要因素,质量检测是其中的关键环节,随着种子检测技术的发展,电泳方法越来越多地应用到种子质量检测中。目前在农作物种子质量检测中常用的电泳方法有4种,不同电泳方法的要求和适合的检测项目不同,针对各种电泳方法的优缺点,讨论其适用范围,从而为农作物种子质量检测技术平台提供参考。

电泳方法快速检测凋亡白血病细胞DNA的尝试

近年来,细胞程序性死亡(apoptosis,又称凋亡)的研究日趋活跃,它为白血病的治疗提供了新的线索和思路,也提示我们进一步寻找和开发白血病细胞程序性死亡的手段,具有重要的理论和实践意义。确认细胞是否程序性细胞死亡。

两种电泳方法在分析新陆早系列品种SSR标记结果中的比较与应用

为了研究两种电泳方法在新陆早系列材料SSR分析不同阶段使用效果的可行性,本研究利用2.5%琼脂糖凝胶和6%聚丙烯酰胺凝胶对新陆早系列材料SSR扩增结果进行检测。结果显示,两种电泳方式都能够得到较为清晰的扩增条带,但在获得的条带总数及多态性比率上有所差异。琼脂糖凝胶电泳共检测出30条条带,其中有18条为多态性条带,多态性比率为60%;而在聚丙烯酰胺电泳方法共检测出50条条带,多态性条带为33条,多态性比率为66%。基于两种电泳方法所获得的SSR标记位点,利用SPSS和PopGen32软件计算遗传相似系数,并构建遗传关系聚类图。分析结果显示,两种电泳方法所获得的聚类结果大致相同,在个别品种的分析结果上存在着一定程度上的差异。其中,聚丙烯酰胺凝胶获得的分析结果与实际遗传背景拟合性较好,所以,在最终的SSR标记分析过程中采用6%的聚丙烯酰胺凝胶进行分析效果更好,而琼脂糖凝胶电泳更加适合早期SSR标记引物的大量筛选。为新陆早系列材料SSR标记快速、准确分析提供了研究方法与技术支持。

运用免疫固定电泳方法诊断IgMλ型多发性骨髓瘤一例

患者女，79岁。因发热、咳嗽2个月，于2008年8月入院。患者入院后体格检查：体温37.8℃，咳嗽，贫血貌，体型瘦，无其他阳性体征。实验室检查：血常规：WBC 5.31×10^9／L、RBC2.4×10^12／L、Hb71g／L、PLT71×10^9／L，中性分叶细胞0.490，淋巴细胞0.363，单核细胞0.094，嗜酸粒细胞0.051，嗜碱粒细胞0.002，