单细胞DNA损伤的微凝胶慧星电泳检测法

单细胞ＤＮＡ损伤的微凝胶慧星电泳检测法袁守军韩锐（中国医学科学院、中国协和医科大学药物研究所，北京１０００５０中国图书分类号Ｒ３４；Ｒ３９２．２３外来理化因素对细胞ＤＮＡ的损伤是引起基因突变及癌症发生的重要因素。建立快速灵敏的ＤＮＡ损伤检测方法，对于...

高效毛细管电泳——紫外检测法分离测定氨基酸的含量

利用高效毛细管区带电泳直接紫外检测法对8种非衍生化氨基酸进行了分离分析条件的研究,采用重力进样,进样高度20cm,进样时间30s,弹性石英毛细管内径75μm,有效分离长度48cm,分离电压-20kv,在浓度为50mmol/L,pH10的硼砂缓冲溶液中加入0.5mmol/L的十六烷基三甲基溴化铵作为电渗流改性剂,在4min内,8种氨基酸得到了有效分离。各氨基酸的线性范围为5～150μg/mL或1～80μg/mL,检出限在0.5～2μg/mL之间。应用于由糖蜜生产亮氨酸的发酵液中缬氨酸和亮氨酸含量的测定,结果满意。

毛细管电泳电化学检测法测定枣中糖类物质

采用高效毛细管电泳—电化学检测法同时测定了枣中的主要成分蔗糖、葡萄糖、果糖的含量,在15min内可实现三种组分的基线分离;研究了电极电位,电解液的浓度,电泳电压和进样时间等对分析性能的影响,得到了最优分离检测条件。以铜圆盘电极为工作电极,工作电极电位为0.75V(vsAg/AgCl),电泳介质为0.1mol/LNaOH溶液。在0.002～2mmol/L的浓度范围内,蔗糖、葡萄糖和果糖果线性范围均为0.002～2mmol/L。检出限分别为0.78、0.46、0.71μmol/L(3倍 S/N)。峰电流的相对标准偏差RSD分别为2.13%、1.22%和0.26%(n=7,c=0.4mmol/L)。

小型化毛细管电泳-电化学检测法测定猪尿和猪饲料中的β-兴奋剂

采用小型化毛细管电泳-电化学检测技术测定了猪尿和猪饲料中的克伦特罗（clenbuterol,俗称瘦肉精）及其替代品莱克多巴胺（ractopamine）和沙丁胺醇（salbutamol）。考察了工作电极的氧化电位、运行缓冲液的酸度和浓度、分离电压和进样时间等因素对分离和检测的影响。以直径300μm的碳圆盘电极为工作电极,检测电极电位为＋0.95V（vsSCE）,在100mmol/L的硼酸盐（pH9.15）运行缓冲液中,上述3种组分在7min内实现了较好的分离。被测物浓度与峰电流在3个数量级范围内呈良好的线性关系,检测限为1.20×10^-7-2.06×10^-7g/mL。该方法简单可靠,已成功应用于猪尿和猪饲料样品中3种β-兴奋剂的测定,是一种有效的食品安全分析检测方法。

毛细管电泳-激光诱导荧光检测法测定卡托普利和N-乙酰-L-半胱氨酸

建立了一种高效、快速的毛细管电泳分离-激光诱导荧光(CE-LIF)检测卡托普利(CAP)和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)的分析方法。采用1,3,5,7-四甲基-8-溴甲基-二氟二硼-二吡咯甲川(TMMB-Br)为柱前衍生试剂,在50 mmol/L磷酸盐缓冲溶液(pH=8.5)中,40℃下进行衍生反应10min。以荧光素为内标,25mmol/L硼酸盐缓冲溶液(pH=9.5)为电泳背景电解质,14min内达到基线分离。CAP和NAC的检出限分别为0.65nmol/L、0.76nmol/L。将该方法应用于人体尿液和血清中这两种物质的测定,回收率在97.0%~105.7%之间。

混合稀土离子的毛细管电泳电导法分离检测

采用高效毛细管电泳电导检测法分离检测了稀土离子。以醋酸 -醋酸钠为背景电解质 ,4-吗啉乙磺酸 ( MES)为络合剂 ,在 2 4 k V的高压下 ,7种稀土离子得到了较好的分离。考察了背景电解质的 p H和浓度 ,络合剂的浓度 ,分离电压等对稀土离子分离的影响。在选定的实验条件下 ,7种稀土离子在 1 0

毛细管电泳-柱末安培检测癌症病人尿中8-羟基脱氧鸟苷

Using one step solid-phase extraction for urine pretreatment and a new sample focusing mode-dynamic pH junction injection for increasing sensitivity, a simple and sensitive method for the analysis of urinary 8OHdG by capillary electrophoresis with end-column amprometric detection has been developed. The limit of detection was 20 nmol/L(signal to noise ratio S/N=3). The urinary concentration of 8OHdG in nine healthy persons and 28 cancer patients was determined. It was found that urinary concentration of 8OHdG in cancer patients was significantly higher than that in healthy persons[(35.26±27.96) nmol/L) vs. (13.51±5.08) nmol/L, P<0.05], the result demonstrated that 8OHdG may be a good biomarker for measurement of oxidative DNA damage in cancer patients. Furthermore, the excretion levels of urinary 8OHdG from cancer patients receiving surgical therapy are investigated, and the results demonstrated that the smoking has a strong effect on 8OHdG content.

毛细管电泳-多壁碳纳米管/聚吡咯/磷钼酸修饰电极电化学检测饮用水中的溴酸根

用电化学聚合法制备多壁碳纳米管/聚吡咯/磷钼酸修饰电极,利用循环伏安法研究溴酸根在此修饰电极上的电化学行为。考察了实验参数对分离检测体系的影响,并在优化条件下,采用毛细管电泳-安培检测法对溴酸根进行检测。结果表明:溴酸根离子在1.0×10-6～5.0×10-3 mol/L范围内和峰面积呈良好的线性关系,检出限(S/N=3)为4.0×10-7 mol/L,峰面积和迁移时间的相对标准偏差分别为1.9%和1.4%(5×10-3mol/L溴酸根,n=11)。将该体系应用于加标饮用水样的测定,回收率为97%～103%。

毛细管电泳法分离测定食品中山梨酸、苯甲酸、糖精

采用毛细管电泳-紫外检测法,考察了波长,电压,缓冲试剂、浓度、pH对山梨酸、苯甲酸、糖精分离的影响,得到了优化的实验条件.以硼砂20mmol/L(pH=7.5)为运行缓冲溶液,20kV为分离电压,检测波长为230nm的电泳条件下,进样时间为10s,山梨酸、苯甲酸、糖精可在12min内实现分离.山梨酸在5mg/L-50mg/L,苯甲酸在5me/L-50mg/L,糖精在15mg/L-150mg/L范围内呈良好线性关系,迁移速度、峰面积相对标准偏差均小于4.5％,(n=5).用上述方法对实际样品进行测定,回收率在95％以上.

毛细管电泳-激光诱导荧光法测定缺氧缺血新生大鼠脑组织中氨基酸

建立了新生儿缺氧缺血性脑病(H IE)发生时脑组织中兴奋性氨基酸(EAA)含量的高效毛细管电泳-激光诱导荧光检测(CE-LIF)的新方法。方法的最佳条件为:40 mmol/L硼砂溶液,分离电压20 kV,压力进样5 s,λem=488 nm、λex=560 nm。随机分为假手术组、新生儿缺氧缺血性脑病(H IE)组,小剂量地塞米松(DXM)组和大剂量DXM组的新生大鼠脑组织中EAA的含量测定,结果表明:假手术组EAA含量较低,H IE组EAA含量显著升高,大、小剂量DXM预处理后,EAA含量较H IE组有不同程度的降低。

毛细管电泳-激光诱导荧光法测定基因工程人细胞生成素的N-连接糖谱

目的 建立重组人红细胞生成素 (EPO)中影响体内生物学活性的含唾液酸和去唾液酸的N 连接糖的糖谱。方法 用肽糖苷酶F释放EPO中与天冬酰胺连接的寡糖 ,再用唾液酸酶脱去糖末端的唾液酸 ,采用荧光试剂APTS标记后 ,以毛细管凝胶电泳 激光诱导荧光法分离和检测糖的各种形态。结果 EPO样品含有大致相同的N 连接糖谱 ;去唾液酸后的N 连接糖组分的保留时间延长 ;体内生物学活性不同的样品 ,其N 连接糖也有差异。 结论此法可用于判断EPO产品的来源及批间差异 ,与肽图相结合可作为EPO的指纹鉴别图谱 。

饮用水中溴酸盐检测方法的分析

目前,在生产饮用水中O3被作为低毒消毒剂来使用,但是人们发现在臭氧消毒的过程中水中含有的溴化物会被O3氧化为溴酸盐。过量食用或长期食用溴酸盐会对人体的血管以及肾脏等部位诱发疾病。因此,如何有效地检测出饮用水中的溴酸盐显得攸关重要。本文主要对直接进样抑制电导检测离子色谱法、柱后衍生光度检测离子色谱法、高效液相色谱法及毛细管-电泳电化学法检测饮用水中溴酸盐的方法进行了研究。

深圳市场4种国产农产品转基因成分监测结果

目的:为了解并掌握目前深圳市居民食品中转基因成分的实际情况,避免“家底不清”,更有效地对本市的食品安全进行系统监测和预警,为政府制定食品卫生政策提供科学依据和切实保障居民的健康安全利益。方法:按照深圳市食品污染物监测项目方案,首次对本市市场上的4种国产农产品中转基因成分进行监测,采用PCR凝胶电泳法对79份玉米、马铃薯、大豆、西红柿进行检测并用实时荧光PCR方法进行验证。结果:在79份抽检样品中,共检出含有转基因成分的样品4份,总检出率为5.1%。结论:我市食品中转基因成分存在的情况不容忽视,转基因食品未作任何标识的问题普遍存在,值得管理部门高度重视。应加强对流通市场上食品中转基因成分的监测和转基因食品标识的管理。

金樱子饮片HPCE指纹图谱研究

目的:初步建立金樱子饮片的HPCE指纹图谱分析方法,分析比较金樱子及金樱子炮制品的指纹图谱。方法:采用高效毛细管电泳法,以三萜类作为参照物,测定金樱子及金樱子炮制品的指纹图谱,并进行模糊聚类法分析并评价其相似度。结果:初步建立了以9个共有峰为特征指纹信息的金樱子饮片HPCE指纹图谱;少数金樱子饮片的指纹图谱有一定差异,生品与炮制品指纹图谱中的共有峰相对峰面积差异显著。结论:采用高效毛细管电泳法测定金樱子指纹图谱准确性高,具有较好的重复性,可作为金樱子饮片质量的评价依据。

丹参HPCE-DAD指纹图谱的研究

目的:建立丹参HPCE-DAD指纹图谱分析方法,评价丹参药材的质量。方法:用高效毛细管电泳技术对丹参药材进行分析,测定其指纹图谱,并作模糊聚类法分析和相似度评价。结果:初步建立了以10个共有峰为特征指纹信息的HPCE指纹图谱;发现少数丹参药材样品HPCE指纹图谱有一定差异。结论:方法准确可靠,重现性好,可作为丹参药材内在质量评价的依据。

杜仲饮片HPCE指纹图谱的研究

目的:建立杜仲饮片HPCE指纹图谱分析方法,并对杜仲及其炮制品的指纹图谱进行比较。方法:采用高效毛细管电泳法进行色谱分离,以60 mmol/L硼砂-20 mmol/L磷酸二氢钠-10%甲醇(pH=10.0)为运行缓冲液,分离电压为20 kV,波长为210 nm,以松脂醇二葡萄糖苷为参照物,测定其指纹图谱,并作模糊聚类法分析和相似度评价。结果:初步建立了以10个共有峰为特征指纹信息的杜仲饮片HPCE指纹图谱;发现少数杜仲饮片的指纹图谱有一定差异,生品与其炮制品的指纹谱中共有峰相对峰面积差异显著。结论:该方法准确可靠,重现性好,可作为杜仲饮片内在质量评价的依据。

2型糖尿病患者血清HDL亚类组成的研究

目的 研究２型糖尿病患者血清ＨＤＬ亚类组成及相对百分含量的变化。方法 采用双向电泳－免疫印迹检测法分析了３８例正常对照及３８例患者血清ＨＤＬ亚类组成及相对百分含量。结果 患者血清中前β１－ＨＤＬ（Ｐ＜０．００１）、前β２－ＨＤＬ及ＨＤＬ３ａ。（Ｐ＜０．０５）含量显著增加，而ＨＤＬ２ａ（Ｐ＜０．０５）及ＨＤＬ２ｂ（Ｐ＜０．００１）含量显著减少。患者空腹血糖及血清ＴＧ浓度与前β１－ＨＤＬ、ＨＤＬ３ｃ及ＨＤＬ３ａ水平呈显著正相关，而与ＨＤＬ２ｂ水平呈显著负相关。结论 ２型糖尿病患者血清ＨＤＬ颗粒直径呈变小趋势，提示患者ＨＤＬ成熟代谢过程受阻。