膜片钳技术在心血管及药理学研究中的应用

膜片钳技术是一种以记录通过细胞膜上的各种离子通道的离子电流来反映细胞膜上单一的或多个的离子通道活动的技术。通过微电极与细胞膜之间形成紧密接触，采用电压钳或电流钳技术对生物膜上离子通道的电活动进行记录。可测量1μA的电流灵敏度，1μm的空间分辨率和10μs的时间分辨率，为从分子水平了解生物膜离子通道的开启和关闭、动力学选择性和通透性等膜信息提供了直接的手段。膜片钳技术的发展不过20多年时间，但却广泛的应用于心血管生理学、病理生理学及药理学的研究中，

膜片钳技术在高血压研究中的应用

膜片钳技术（patch-clamp technique）是1976年由Nehetr和Sakroann在电压钳的基础上发展而来的一种记录细胞膜离子通道电生理活动的技术。通过微电机与细胞膜之间形成紧密接触,采用电压钳或电流钳技术对生物膜上离子通道的电活动进行记录。

大鼠伏隔核神经元膜特性及乙醇对其影响

目的 :观察伏隔核神经元的膜特性及致醉剂量的乙醇 (44mmol L)对其影响。 方法 :在大鼠伏隔核脑片上 ,采用细胞内电流钳记录技术。结果 :所观察到的神经元包括五种类型 ,神经元的静息膜电位 (mV)为 - 79.1± 2 .4 ,输入阻抗 (MΩ)为 4 8.4± 2 .3,锋电位的幅度 (mV)平均为 98.5± 4 .1;致醉剂量的乙醇 (44mmol L)对大部分伏隔核神经元的膜电位、输入阻抗及I V曲线无明显影响。 结论 :在伏隔核内 ,存在多种膜特性类型的神经元 ;致醉剂量的乙醇对大鼠伏隔核神经元的膜特性无明显影响 ,说明乙醇对伏隔核神经元的抑制作用主要并不是通过影响膜特性来实现的。

依托咪酯对大鼠海马CA1区神经元动作电位及离子通道的影响

目的研究依托咪酯对大鼠海马CA1区胞体动作电位及配体门控离子通道的影响。方法 40只雄性大鼠快速断头,取出海马组织并用切片机切出400μm厚度的海马脑片,随机平分为4组:脂肪乳剂组(空白组)、依托咪酯组(对照组)和2个实验组(依托咪酯+DIDS组与依托咪酯+四乙铵组)。用全细胞电流钳技术给予不同强度的刺激,记录各组在不同刺激强度下对大鼠海马CA1区神经元动作电位发放的情况。结果脂肪乳剂不影响胞体动作电位的频率和幅值。10μmol·L-1依托咪酯脂肪乳剂能明显减少胞体动作电位的数目,同时动作电位的幅值也减小;逐渐增大刺激的强度,胞体动作电位产生的个数会相应地增加,但幅值无明显变化。DIDS+依托咪酯组在20 min后减少动作电位数目,且随着刺激强度的增加,动作电位衰减的时间逐渐延长。加入K+通道阻滞剂(四乙胺)后,不影响依托咪酯对动作电位产生的抑制。结论依托咪酯脂肪乳剂抑制神经元动作电位发放的作用,可能主要通过开放氯通道、增加氯离子内流来实现;而钾通道对依托咪酯的抑制作用影响轻微。