电转移中蛋白质的透膜现象及其对蛋白质印迹结果的影响

探讨了电转移中蛋白质的透膜现象及其对蛋白质印迹结果的影响 .采用抗凋亡抑制蛋白 Survivin的抗体 ,对细胞裂解液进行蛋白质印迹 .与常规操作方法不同之处是 :在电转移的凝胶“三明治”中 ,重叠放置两张硝酸纤维素膜 .电转移后 ,对两张膜同时进行免疫印迹 .在特定的转移条件下 ,两张膜的免疫印迹都出现了Survivin蛋白的特异印迹带 ,证实了电转移中存在着蛋白质的透膜现象 .转移时间、电流强度和蛋白质的分子质量 ,都是影响蛋白质透膜的相关因素 .电转移中蛋白质的透膜 ,可以产生“印迹复制失真”的效应 ,从而最终影响蛋白质印迹定性和定量的结果 .所得实验结果和结论 ,揭示了蛋白质印迹技术方法学中一个需要加以充分关注的问题 。

酶联免疫电转移印迹技术(EITB)检测抗EB病毒特异性DNA酶抗体

本研究用酶联免疫电转移印迹技术,检测血清中抗 EB 病毒特异性 DNA 酶抗体,试图建立一种可常规应用于临床的检测方法。结果表明:50例鼻咽癌患者血清中,26例在52～59KD 范围内出现由4条阳性显带融合而成的阳性反应区;健康成人和其他头颈部肿瘤患者血清无一例在此区域内出现阳性显带,表明其特异性甚高。

日本血吸虫各期虫体的酶联免疫电转移印迹分析及抗原定位研究

本文采用酶联免疫电转移印迹技术（EITB）分析、比较日本血吸虫不同发育时期虫体特定的组分蛋白分子、雌虫、雄虫和虫卵抗原分别与相应的雌、雄虫和虫卵免疫血清反应呈现17、20和8条蛋白带，这三种抗原与其它不同时期虫体免疫血清反应，三者间及彼此间均出现交叉反应，而雌、雄虫和虫卵抗原与其它寄生虫感染血清作用没发现有叉及反应。应用间接荧光抗体试验（IFA）和免疫酶染色试验（IES）对日本血吸虫抗原进行定位研究，其结果相似。血吸虫主要抗原物质来源于成虫表皮、肠上皮和卵内的毛蚴.

猪囊尾蚴囊液抗原的免疫金电转移印斑技术分析

猪囊尾蚴囊液抗原的免疫金电转移印斑技术分析山东省寄生虫病防治研究所（济宁２７２１３３）刘玉冰，尹舜，张洪花，刘克义，李桂萍，葛凌云诊断用抗原的纯度严重影响着囊虫病免疫诊断的特异性及敏感性，为进一步寻找猪囊尾蚴囊液抗原的特异性部分，我们应用电转移印斑技...

小鼠骨骼肌电转移hPDN1Q基因可以减轻CCl_4诱导的急性肝损伤

目的研究人Q型对氧磷酶1(human paraoxonase 1 Q,hPON1Q)转基因表达对小鼠四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_4)诱导急性肝损伤的缓解效果,为防治肝脏疾病寻找新的途径。方法小鼠骨骼肌直接注射含hPON1Q的真核表达质粒裸DNA并用电刺激介导表达,测量血清芳香酯酶的活性变化显示hPON1Q转基因表达效果,并使用血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)为指标及肝组织病理切片检测肝损伤的程度。结果hPON1Q转基因表达小鼠血清中芳香酯酶活性提高约50%,并可持续到16d以后。使用PON1裸DNA电刺激治疗组比对照组小鼠在用CCl_4诱导24h后血清芳香酯酶活性高60%,两种血清转氨酶指标及肝组织切片的病理学分析表明肝脏损伤程度有明显的减轻。结论电刺激介导的重组人PON1Q基因裸DNA在小鼠体内的表达对CCl_4诱导的肝损伤具有显著的防护作用。

传声器自由场互易校准中电转移阻抗的测量与处理

电转移阻抗的准确测量是实现传声器自由场互易校准的关键。基于VB和MATLAB软件平台设计了传声器电转移阻抗的测量和数据处理系统。利用PULSE分析仪、互易校准仪和适调放大器等组成的测量系统，提取电转移阻抗信号；数据处理部分采用傅里叶逆变换（IFFT）和时间加窗技术对声信号进行处理，有效去除驻波、电串扰和反射波等干扰信号，得到理想的电转移阻抗；最后实现传声器自由场灵敏度的准确计算。

不同种属细菌之间的质粒DNA电击转移

以电场强度１２．５ｋｖ／ｃｍ，ＲＣ设定值为５ｍｓ为条件，将ｐＢＣ１１质粒ＤＮＡ从枯草杆菌向大肠杆菌电击转移，一次可得２２０个转移子。大肠杆菌种内的质粒电击转移，一次可得４２００个转移子。但质粒从大肠杆菌向枯草杆菌以及枯草杆菌种内的质粒电击转移效率都较低。实验表明，高电场脉冲可使质粒ＤＮＡ突破细胞间的屏障实现直接转移。

口蹄疫病毒非结构蛋白3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测

【目的】口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测。【方法】利用原核表达系统表达了FMDV NSP 3A、3B和富含B细胞抗原位点序列的2C蛋白。利用高浓度尿素裂解包涵体,采用稀释法和氧化型、还原型谷胱甘肽系统相结合方法对2C蛋白进行复性。用金属鳌合亲合层析的方法对表达的FMDV NSP 3A、3B和2C进行纯化。采用ELISA方法对比检测了3种纯化蛋白在检测羊血清NSP抗体的效果。【结果】检测得知3A和3B为可溶性表达蛋白,2C以包涵体形式表达。通过Western-blot分析,表明纯化后蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应。纯化的3A、3B和复性后的2C融合蛋白与3ABC抗原的检测结果具有很高的符合性。【结论】该研究为建立鉴别FMDV自然感染动物和灭活疫苗免疫动物的酶联免疫电转移印迹技术(EITB)提供了所需的材料。

半干式蛋白质电泳印迹的影响因素及条件优化

采用蛋白质分子量标准物和纯化的重组蛋白质进行半干式蛋白质印迹,探讨半干式电泳印迹的多种因素对印迹效果的影响。结果表明:在不同电转移条件下,均存在不同程度的蛋白质透膜转移现象,当电流强度恒定时,电转移时间过长和上样量过大是造成实验中透膜转移而丢失的主要原因,可根据待测蛋白质的分子量和表达丰度确定恰当的电转移时间和上样量。

甲型肝炎病毒编码区cDNA在减毒伤寒杆菌中的高效表达

使甲型肝炎病毒基因组ｃＤＮＡ能够在减毒伤寒杆菌中表达，从而通过口服此种减毒伤寒杆菌达到对甲肝免疫的作用。将甲肝病毒编码区ｃＤＮＡ插入高效表达质粒ＰＢＶ２２１，转化大肠杆菌ＤＨ５α，筛选并鉴定阳性克隆。将阳性克隆用电转移法转化减毒的伤寒杆菌ＢＲＤ５０９。用温度诱导法诱导目的基因在伤寒杆菌中表达。通过Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ和ＥＬＩＳＡ检测表明，表达蛋白可与人抗甲肝ＩｇＧ发生特异性反应。用此伤寒杆菌口服或腹腔注射免疫小鼠，小鼠血清检测到抗甲型肝炎病毒的抗体。结论：甲肝病毒ｃＤＮＡ可以在减毒伤寒杆菌中表达，且表达的蛋白质在体内、外有免疫原性。

电容式传声器自由场互易校准数据处理系统设计

基于LabVIEW和Matlab软件开发平台设计了传声器自由场互易校准数据处理系统,该系统可以有效提取电转移阻抗信号,计算声中心和灵敏度级,并通过软件测试证明了系统的可行性。

Power Project Starts Operation for Guangdong

The third circuit of the Tianshengqiao (TSQ)Guangdong 500-KV AC power transmission and transformation project, one of China's key projects for transmitting power from west to east in China, began operation on June 25. Its operation marks the use of the fourth channel for power transmission from the west to South China's Guangdong Province aswell as successful completion of the second campaign to fulfill the State's plan to transmit 10 GW of electric power from west to Guangdong Province in the 10th Five-Year period (2001～2005).

《摩擦起电》实验这样做效果更好

《摩擦起电》一课有两个实验,第一个实验:经过摩擦的物体能吸引轻小物体。第二是氖泡发光实验,证实摩擦后的物体确实带电。这是本课的重点和难点。我是这样做这两个实验的: 第一个实验:用毛皮摩擦过的塑料尺接近轻小的纸屑,发现吸引。然后。

打手机省钱有窍门

手机用户如果能详细了解目前各项通信资费政策,善于使用各种新业务,就会发现很多节省手机话费的办法。充分利用短消息业务按中国移动现行收费标准,一条信息无论发往本地或是外地甚至国外,均只需发送方支付0.1元,而接收方不需付费。该业务无月租,无需申请便自动开通。比如,两部本地手机通话总共要0.

手机省钱有窍门

手机的使用其实并不那么简单,如果你能了解到它的很多附加功能,也许还会剩下不少话费呢。

囊尾蚴病是秘鲁癫痫的主要原因

为了调查囊尾蚴病与癫痫之间的联系,秘鲁研究人员采用酶联免疫电转移印迹(EITB)测试法在利马一家神经病医院498名连续门诊病人的血清中检出了猪肉绦虫抗体。经神经病学和脑电描记术检查之后,病人被分为癫痫或非癫痫两种类型,人数分别为189名和309名。