类固醇生成急性调控蛋白作用的分子病理机制研究进展

类固醇生成急性调控蛋白 (steroidogenic acute regulatory protein,St AR)基因突变是引起先天性类脂性肾上腺皮质增生症 (congenital lipoid adrenal hyperplasia,CL AH)的原因。 CL AH是一种常染色体隐性遗传病 ,患者从胆固醇向孕酮转换的能力严重受损 ,主要临床表现包括 :基因型为 4 6 ,XY或 4 6 ,XX患者均呈女性外生殖器表现型 ,在出生后可有失盐型表现且严重程度不等 ,肾上腺及性腺细胞内胆固醇聚集 ,导致细胞损伤。近年来 St AR作用的分子病理生理学机制研究取得了系列进展 ,本文拟对此进行综述。

血清FKN、vasohibin-1及D-二聚体在慢性阻塞性肺疾病肺急性加重期患者中的动态变化及诊断价值分析

目的探讨血清不规则趋化因子(FKN)、血管生成抑制蛋白(vasohibin-1)及D-二聚体在慢性阻塞性肺疾病肺急性加重期(AECOPD)患者中的动态变化及其诊断价值。方法回顾性选取2020年1月至2022年12月西安交通大学第一附属医院榆林医院收治的106例AECOPD患者为观察组,另选取同期来体检的100名健康志愿者为对照组。比较观察组与对照组患者血清FKN、vasohibin-1、D-二聚体表达水平,并分析观察组患者入院第1天、第3~5天、第7~9天血清FKN、vasohibin-1、D-二聚体表达水平。采取慢性阻塞性肺疾病评定量表(CAT)对患者预后进行评价,取患者中位分值,将CAT评分≥23.43分的患者设为预后不良组(n=21),将<23.43分的患者设为预后良好组(n=85)。建立Logistics回归模型分析影响AECOPD预后不良的因素。建立受试者操作特征(ROC)曲线确定血清FKN、vasohibin-1、D-二聚体对AECOPD的诊断价值。结果观察组FKN、vasohibin-1、D-二聚体表达水平分别为(13.57±3.67)μg/L、(641.53±87.47)ng/L、(2.14±0.32)mg/L,均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。入院第7~9天的FKN、vasohibin-1、D-二聚体表达水平分别为(9.78±1.57)μg/L、(416.79±57.33)ng/L、(0.95±0.14)mg/L,均明显低于入院第3~5天与入院第1天,差异均有统计学意义(P<0.05)。预后良好组的年龄、FKN、vasohibin-1、D-二聚体水平与预后不良组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistics回归模型分析显示,FKN、vasohibin-1、D-二聚体是AECOPD患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,FKN、vasohibin-1、D-二聚体、3者联合的曲线下面积(AUC)分别为0.618、0.674、0.520、0.818。FKN、vasohibin-1、D-二聚体3者联合对AECOPD的诊断敏感度、特异度高于3者单一诊断。结论血清FKN、vasohibin-1及D-二聚体参与AECOPD患者的病情变化过程,可监测这3个指标的动态变化来评估患者病情演变和预后情况,且3者联合检测可以提高对AECOPD患者的判断准确度。

脑源性神经营养因子调控人黄素化颗粒细胞甾体激素合成

目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)对人黄素化颗粒细胞分泌雌激素和孕激素及甾体生成急性调控蛋白(STAR)的影响.方法黄素化壁层颗粒细胞来自进行体外受精-胚胎移植的26例患者,年龄26～30岁,均为输卵管因素和男性因素不孕者.利用原代培养细胞技术培养人黄素化颗粒细胞,分别加入不同浓度的BDNF,收集细胞培养上清液,检测雌二醇和孕酮浓度.用RT-PCR检测黄素化颗粒细胞中STAR mRNA表达的变化.结果BDNF可抑制人黄素化壁层颗粒细胞分泌孕激素,呈浓度依赖性,但BDNF浓度超过50 ng/ml时抑制作用不再增强.BDNF对人黄素化壁层颗粒细胞合成雌二醇的浓度无明显影响.BDNF可降低STARmRNA表达,呈浓度依赖性.结论BDNF可调节人黄素化卵巢颗粒细胞合成孕酮,是重要的卵巢内调节因子.BDNF可能通过抑制STARmRNA的表达以减少孕酮的生成并参与黄体的退化过程.

尼古丁对胎儿宫内发育的影响及其甾体激素合成干扰机制

目的探讨孕期尼古丁暴露所致胎儿宫内发育迟缓(IUGR)的甾体激素合成干扰机制。方法选用Wistar雌性和雄性大鼠,适应性喂养1周后,每晚18:00按雌∶雄=2∶1合笼,次晨检见阴栓者记为受孕0日。尼古丁组从孕8日起皮下注射尼古丁1.0 mg/kg,2次/d,给药容积为2 m L/kg,直至孕21日。对照组给予等容量的生理盐水。处死孕鼠,收集血清,摘取并冻存肾上腺和胎盘组织。剖腹取胎,记录胎盘质量、胎鼠体质量及其他发育指标,摘取并冻存孕21日胎鼠肾上腺。用放射免疫法检测孕鼠血清皮质酮、胎盘催乳素和雌三醇水平。观察胎盘组织病理学改变。用实时定量RT-PCR方法检测肾上腺St AR和P450scc、胎盘2型11β羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD-2)、肾上腺细胞色素P450 1A1(CYP1A1)及其芳烃受体(AhR)的mRNA表达。结果从孕8日开始皮下注射尼古丁明显导致大鼠IUGR的发生(P<0.01)。尼古丁使孕鼠血清皮质酮水平在孕中期及孕晚期均明显升高(P<0.05)。相对于对照组,孕中期及孕晚期尼古丁组孕鼠肾上腺St AR和P450scc的mRNA表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01),但是胎鼠肾上腺的St AR和P450scc的mRNA表达水平则有下降趋势(P=0.16,P=0.11)。同时,尼古丁组足月大鼠胎盘迷路区的病理形态学发生了明显的改变,包括迷路区出血和滋养层细胞变性;并使孕中、晚期反映胎盘功能的孕鼠血清胎盘催乳素水平(P<0.05)、血清雌三醇水平以及胎盘11β-HSD-2的mRNA表达显著下降(P<0.05)。尼古丁对母鼠肾上腺的CYP1A1和AhR的mRNA表达有一定的诱导作用,但是对胎鼠肾上腺的CYP1A1和AhR的mRNA表达没有明显影响。结论孕期接触尼古丁可明显导致IUGR的发生,且与母体及胎儿甾体激素内环境紊乱密切相关。

胸腺基质淋巴细胞生成素促进纤维化并激活MRC-5细胞中的丝裂原活化蛋白激酶

急性肺损伤（acute lung injury,ALI）是一种可以危及生命的低氧性呼吸紊乱发生率和死亡率极高。ALI通常表现为广泛炎症和肺纤维化,伴有促炎、促纤维化因子和胶原蛋白蓄积。胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）在炎症调控过程中发挥着重要作用,但其对肺纤维化和ALI的作用尚不清楚。

纳洛酮辅助HFNC在慢性阻塞性肺疾病急性加重期合并Ⅱ型呼吸衰竭中的应用效果

目的探究纳洛酮辅助经鼻高流量湿化氧疗(HFNC)在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)合并Ⅱ型呼吸衰竭患者中的应用效果。方法选取2020年1月—2023年1月收治的AECOPD合并Ⅱ型呼吸衰竭120例,按治疗方法分为对照组和研究组,每组60例。对照组给予HFNC,研究组给予纳洛酮辅助HFNC。比较2组临床疗效,治疗前后肺功能指标[第1秒用力呼气容积(FEV1)、FEV1/用力肺活量(FVC)、肺总量(TLC)]、临床症状[急性生理功能和慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分]、动脉血气分析指标[动脉血氧分压(PaO_(2))、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))、动脉血氧饱和度(SaO_(2))]、炎症-应激指标[C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)]、血清颗粒蛋白前体(PGRN)、血管生成素-2(Ang-2)水平;记录2组不良反应发生情况。结果研究组治疗总有效率91.67%(55/60)高于对照组76.67%(46/60)(P<0.05)。研究组治疗3、7 d后FEV1、FEV1/FVC、TLC、GCS评分、PaO_(2)、SaO_(2)、SOD高于对照组,APACHEⅡ评分、PaCO_(2)及血清CRP、PCT、MDA、PGRN、Ang-2水平低于对照组(P<0.05)。2组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用纳洛酮辅助HFNC治疗AECOPD合并Ⅱ型呼吸衰竭能更有效改善患者肺功能及氧合状态,减轻炎症反应、氧化应激程度,下调血清PGRN、Ang-2水平,从而增强疗效,且具有一定安全性。

促性腺激素释放激素激动剂对卵巢黄素化颗粒细胞甾体激素合成急性调节蛋白表达的影响

自上世纪90年代开始，促性腺激素释放激素激动剂（gonadotropin-releasinghormoneagonist，GnRH—a）被广泛用于辅助生育技术领域控制性超排卵治疗中。近年来，人们逐渐认识到GnRH-a在提高获卵数量和妊娠率的同时，存在着对垂体和卵巢黄体的过度抑制作用。前期研究显示，在不同剂量GnRH-a降调节方案中，启动日血清黄体生成素（LH）、雌二醇水平以及人绒毛膜促性腺激素（hCG）注射日的LH、雌二醇、孕酮水平存在差异。本研究针对这一现象，通过对GnRH-a降调节的体外受精-胚胎移植（invitrofertilizationandembryotransfer，IVF-ET）周期中卵巢黄素化颗粒细胞甾体激素合成的关键性调节蛋白——甾体激素合成急性调节蛋白（steroidogenicacuteregulatoryprotein，StAR）表达的实验研究，探讨GnRH-a剂量对黄体功能影响的程度和机制，为选择GnRH-a降调节方案和改善黄体支持方案提供实验依据。

不同麻醉方法调控气腹所致应激反应的对比研究

目的探讨不同麻醉方法调控气腹所致应激反应的程度，为临床选择合理的麻醉方法。方法将90例腹腔镜气腹病人随机分为3组：硬膜外组(A组)，全麻组(B组)，全麻复合硬膜外组(C组)。观察记录麻醉前、气腹前、气腹后20min、放气后20min血液中肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、肝脏分泌的急性反应蛋白(CRP)浓度，同时常规监测MAP、HR、SPO2。结果三组患者中气腹时A组和B组的应激反应显著增强(P<0．05)，且与C组比较差异有显著性(P<0．05)，表现为E、NE、CRP在气腹后20min明显升高(P<0．05)，而C组病人在气腹前后则无明显变化。结论气腹对机体呼吸、循环和内环境干扰导致应激反应显著增强，而全麻复合硬膜外阻滞可明显降低气腹所致的应激反应，是气腹下腹腔镜手术较好的麻醉方法。

大鼠心肌缺血性损伤时促红细胞生成素对蛋白激酶C的调控

前期研究已证实，促红细胞生成素（EPO）能减轻心脏急性缺血再灌注损伤，但在防止细胞凋亡过程中对重要信号因子蛋白激酶C（PKC）的影响目前报道尚少。我们通过同系大鼠心脏移植建立心肌缺血模型，给予EPO及PKC干预，观察EPO对于PKC的调控作用。

循环EphA2、PGRN与冠状动脉疾病患者内皮炎症及黏附因子的相关性

[目的]探讨促红细胞生成素产生肝细胞受体A2(EphA2)、颗粒蛋白前体(PGRN)与冠状动脉疾病(CAD)患者内皮炎症及黏附因子的相关性。[方法]入选2020年1月—12月复旦大学附属中山医院心内科收治的拟行冠状动脉造影的73例CAD患者,入院次日晨空腹采集肘静脉血5 mL,ELISA测定血清中EphA2、PGRN水平,Premixed Luminex测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)及γ干扰素(IFN-γ)水平。[结果]急性冠状动脉综合征(ACS)患者血清EphA2、氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)及肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)心肌损伤标志物水平较慢性冠状动脉综合征(CCS)患者升高6.3倍、15倍、161倍、13倍、2.5倍(P<0.001),血清TNF-α、IL-6和VCAM-1较CCS患者升高37.9%、500.0%、196.6%(P<0.01),血清PGRN水平较CCS患者未见明显升高(P=0.051)。血清EphA2、PGRN、IL-6、VCAM-1预测ACS的曲线下面积(AUC)分别为0.932、0.646、0.926和0.861。血清EphA2、VCAM-1、IL-6、TNF-α、MCP-1均与Gensini评分正相关(r=0.533,P<0.001;r=0.549,P<0.001;r=0.621,P<0.001;r=0.263,P=0.027;r=0.264,P=0.026)。血清EphA2与IL-6、VCAM-1呈正相关(r=0.565,P<0.001;r=0.474,P<0.001)。未见PGRN与各炎症因子和黏附因子之间的相关性(P>0.05)。血清PGRN、EphA2与心肌损伤标志物呈正相关(P<0.05)。[结论]本研究从临床的角度支持EphA2参与斑块损伤急性期内皮炎症过程,同时提示EphA2、PGRN有望成为干预内皮炎症与预测动脉粥样硬化病变进展的潜在靶点。

甾体类受体共激活因子3基因在结直肠癌中的表达与扩增及其意义

目的探讨甾体类受体共激活因子3(SRC-3)基因在结直肠癌(CRCs)中的蛋白表达与基因扩增及其临床病理学意义。方法运用免疫组织化学和荧光原位杂交方法对60例结直肠癌组织中SRC-3基因的表达与扩增进行检测,结合其临床病理学资料,分析它们之间的相关性。结果在60例CRC患者中,有23例(38%)肿瘤组织出现SRC-3蛋白的过度表达,而且与肿瘤的临床分期有显著的相关性(P<0.01),62%的DukesC或D期CRC呈现出SRC-3蛋白的过度表达;而74%早期(DukesA或B期)的CRC则表现为SRC-3蛋白的正常表达。在荧光原位杂交实验中,有47例的CRC组织的荧光信号得以成功检测,其中6例(13%)CRC出现SRC-3基因高水平的扩增,而且全部出现SRC-3蛋白的过度表达;9例(19%)为SRC-3基因低水平的扩增,其中6例呈现SRC-3蛋白的过度表达;余下的32例无SRC-3基因扩增的CRC中,仍有9例(28%)肿瘤组织出现SRC-3蛋白的过度表达。91%的SRC-3蛋白过度表达者中同时出现P53蛋白的过度表达。结论SRC-3基因的异常和过度表达可能通过影响P53基因的功能,在CRC的发生发展中起着重要的作用;在SRC-3基因表达的调控中,可能存在着SRC-3基因扩增以外的其他调节机制。

StAR在雌性SD大鼠海马、基底前脑及前额叶皮层中的表达与ChAT正相关

目的:探讨基底前脑胆碱能系统(basal forebrain cholinergic system,BFCS)中是否存在神经甾体的合成及局部合成的神经甾体与BFCS功能之间的关系。方法:利用免疫荧光及Western Blot方法检测甾体合成急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,StAR)及胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)在1月龄、6月龄及24月龄雌性SD大鼠海马、基底前脑及前额叶皮层中的表达情况,并对StAR与相应脑区中ChAT的表达量进行相关性分析。结果:海马、基底前脑及前额叶皮层多种形态的细胞中均存在StAR的表达。StAR与ChAT在1月龄及24月龄组的表达量均显著低于6月龄组(P<0.05),24月龄组的表达量均略低于1月龄组(P>0.05),且StAR的表达量均与相应脑区中ChAT的表达量正相关。结论:BFCS中存在神经甾体的合成,且局部合成的神经甾体与BFCS功能状态密切相关。

FSH激活的ERKl/2信号通路在GC细胞增殖分化过程中的作用

为探明由促卵泡刺激素(FSH)激活的胞外信号调节蛋白激酶l/2(ERKl/2)通路在颗粒细胞(GC)增殖分化过程中的作用,以分离培养的SD大鼠GC为材料,研究了FSH激活的ERK1/2通路对GC增殖和分化的影响。结果显示:FSH快速诱导了ERK1/2的磷酸化,这种诱导作用具有时间依赖性,FSH作用0.33h时其磷酸化水平达到最高,用磷酸蛋白激酶A(PKA)的特异性抑制剂H89抑制PKA活性,显著降低了FSH和腺苷酸环化酶激活剂(forskolin)对ERK1/2的激活作用。以增殖细胞核抗原(PCNA)为GC增殖指标,以甾体生成快速调节蛋白(StAR)和甾体生成为GC分化指标,检测发现50ng/mL的FSH以时间依赖方式诱导了PCNA蛋白的表达,FSH处理2h,PCNA蛋白水平达到最高;用UO126(ERK1/2的特异性抑制剂)阻断ERK1/2通路发现,FSH对PCNA和甾体生成的促进作用明显减弱;激光共聚焦检测结果进一步显示,与对照组相比,FSH组StAR信号明显增强,抑制ERK1/2活性显著降低了StAR的荧光强度。可见,FSH激活的ERK1/2通路促进了PCNA和甾体的生成,诱导了GC的增殖和分化。

黄连素对多囊卵巢综合征大鼠卵巢血供的影响

目的:探讨黄连素对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢血供的影响。方法:30只大鼠随机分为模型组、实验组和阳性对照组,采用脱氢表雄酮(DHEA)皮下注射构建PCOS大鼠;另选10只仅皮下注射大豆油作为对照组,1次/d,连续注射20 d。实验组和阳性对照组分别灌胃黄连素(80 mg/kg)和罗格列酮(3 mg/kg),模型组和对照组灌胃生理盐水(10 mL/kg),1次/d,连续干预22 d。检测大鼠血清睾酮(T)和游离睾酮(FT)含量,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠卵巢组织形态及微血管密度(MVD),原位杂交法与免疫组化法分别检测大鼠卵巢组织血管内皮生长因子(VEGF)mRNA水平与甾体类生成快速调节蛋白(StAR)蛋白表达。结果:模型组大鼠卵巢组织MVD、VEGF mRNA表达及StAR蛋白相对表达量较对照组升高,实验组和阳性对照组较模型组降低,且实验组低于阳性对照组(P<0.05)。结论:黄连素可通过调控PCOS大鼠卵巢组织血供及血管生成而改善卵巢组织形态,同时可通过下调StAR蛋白表达改善高雄激素血症。

先天性类脂质性肾上腺增生症的研究进展

先天性类脂质性肾上腺增生症(CLAH)是先天性肾上腺增生症(CAH)中最为严重的一种类型,主要是由类固醇生成急性调控蛋白(StAR)基因和编码胆固醇侧链裂解酶(P450scc)基因突变引起,是一种常染色体隐形遗传疾病。典型的CLAH多在患儿出生不久后即出现失盐及肾上腺功能不全的症状,如脱水、低钠血症、高钾血症等,同时合并有性发育障碍、皮肤色素沉着,治疗上多以对症治疗及皮质激素治疗为主,若不及时治疗,有可能出现肾上腺危象,危及患者生命。目前CLAH具体发病机制不详,本文主要就CLAH、StAR、P450scc及三者之间的联系予以(综述),以期为CLAH的研究进展提供参考依据。

先天性类脂质性肾上腺皮质增生症临床及基因突变特点:病例报告及文献复习

目的探讨类固醇生成急性调控蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,StAR)基因突变致先天性类脂质性肾上腺皮质增生症(congenital lipoid adrenal hyperplasia,CLAH)的临床特征及分子遗传学特点。方法回顾性分析2020年1月广东省妇幼保健院收治的1例CLAH患儿的临床资料,采用高通量测序及Sanger测序进行基因分析。在万方数据库、中国知网、PubMed等数据库中检索StAR基因突变致CLAH的相关文献,检索时间为2000年1月1日至2020年12月31日,对文献报道的病例结果进行整理分析。结果本例患儿在4月龄发现反复呕吐、皮肤色素沉着等症状,实验室检查发现低血钠、高血钾,皮质醇、17-羟孕酮、雄烯二酮、睾酮、孕酮等类固醇激素均明显低下。肾上腺CT示双侧肾上腺正常结构消失。基因检测发现存在StAR基因c.772C>T(p.Q258X)及c.229C>T(p.Q77X)复合杂合突变,父母验证发现上述2个突变分别遗传自其父亲和母亲,确诊为StAR基因突变致CLAH。经糖、盐皮质激素替代治疗后症状逐渐好转,随访至1周岁,生长发育正常。本研究经文献检索,共检索到中文文献10篇,英文文献4篇,合并本例共报道32例CLAH。综合分析显示大部分CLAH患儿在婴儿期发病,常见的临床表现依次为皮肤色素沉着、呕吐和生长发育迟缓,社会性别均为女性;实验室检查提示大部分患儿有低钠血症、高钾血症,皮质醇、17-羟孕酮、雄烯二酮、睾酮等类固醇激素明显低下;经糖、盐皮质激素替代治疗后监测生长发育均正常;StAR基因突变的常见位点为c.772C>T(p.Q258X)。结论CLAH为先天性肾上腺皮质增生症的罕见类型,常在婴儿期起病,常表现为皮肤色素沉着,水、电解质紊乱,外阴呈女性化等。及时、合适的激素替代治疗可以改善患儿临床表现及预后,基因检测有助于CLAH的诊断。p.Q258X突变可能是中国人群StAR基因的热点突变。

生长因子和癌化学疗法

随着对血液调控机理的大量研究,一些影响血细胞增殖和分化的糖蛋白被识别并以重组体的形式制造出来,这些糖蛋白,也就是菌落刺激因子,包括红细胞生成素、粒细胞菌落刺激因子(G-CSF)、粒细胞巨噬细胞菌落刺激因子(GM-CSF)、巨噬细胞菌落刺激因子(M-CSF)和白细胞介素3(IL-3)。人们把G-CSF的重组体叫Filgrastim和Sargramostim,GM-CSF的重组体叫Ecogramostim和Molgramostim,红细胞生成素的重组体叫epoetin。

血清CRP、FSH等临床检验指标水平与急性颅脑损伤程度及预后的相关性分析

目的探讨血清CRP、FSH等临床检验指标水平与急性颅脑损伤程度及预后的相关性.方法选取本科收治的72例急性颅脑损伤患者(研究组)和50例体检正常者(对照组),比较2组患者的相关血清指标等水平差异情况.结果研究组患者空腹血液相关检验指标水平均显著高于对照组体检者(P<0.05);研究组患者入院时空腹血液相关检验指标水平随着急性颅脑损伤程度的增加而升高(P<0.05);研究组患者预后相关影响因素包括入院GCS评分、伤后入院时间、血清CRP、FSH、LH D-二聚体及血糖水平(P均<0.05);经Logistic回归分析发现,入院GCS评分≤8分、伤后入院时间>6 h、CRP>35.0mg/L、血糖>10.0mmol/L、FSH>12.0U/L、LH>22.0IU/L及D-二聚体>1.0mg/L均是影响研究组患者预后的独立危险因素(P均<0.05).结论对于急性颅脑损伤患者CRP、FSH等血清指标水平可反映其疾病的严重程度及预后.

先天性类脂质性肾上腺增生症2例临床特点及分子遗传学研究

先天性类脂质性肾上腺增生症（congenital lipoid adrenal hyperplasia，CLAH）最早于1957年由Prader及Siebenmann描述，是一种常染色体隐性遗传病，属于先天性肾上腺皮质增生症中的一种严重类型。其发病是由于编码类固醇生成急性调控蛋白（StAR）基因突变或编码胆固醇侧链裂解酶（P450scc）的CYPllAl基因突变所致。