双酚A对颗粒细胞激素生成及相关甾体生成酶的影响

目的探讨双酚A(BPA)对大鼠颗粒细胞雌、孕激素生成及相关甾体生成酶的影响。方法采用大鼠卵巢颗粒细胞进行体外培养,72h后给予不同浓度的BPA(0、10-7、10-6、10-5、10-4M)处理,继续培养48h后,收集细胞培养液,用超敏感的固相放射免疫方法测定孕酮和雌二醇(E2)的浓度;用荧光实时定量PCR法测定颗粒细胞内芳香化酶(P450arom)、胆固醇侧链裂解酶(P450Scc)和类固醇合成急性调节蛋白(StAR)的mRNA表达水平。结果在BPA作用下,颗粒细胞孕酮分泌量在10-7M到10-5M组逐渐升高(P<0.05),但在10-4M剂量组出现意外陡降(P<0.01);而E2的分泌量则随BPA浓度的增加而下降(P<0.01)。P450arom mRNA表达显著降低;P450Scc表达量亦在10-7M到10-5M组逐渐升高(P<0.05),而10-4M组出现显著降低(P<0.01)。StARmRNA表达在10-4M组增高(P<0.05)。结论BPA能直接作用于卵巢颗粒细胞,通过作用于P450arom,P450Scc等相关酶的表达以及类固醇合成的限速因子-StAR的表达,而影响颗粒细胞雌孕激素的分泌。

丙戊酸钠对卵泡内膜细胞雄激素分泌及相关甾体合成酶改变的影响

目的:研究丙戊酸钠(VPA)对卵泡内膜细胞睾酮生成以及细胞色素P45017α羟化酶(CYP17)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)和类固醇激素急性调节蛋白(StAR)mRNA的影响。方法:采用猪的卵泡内膜细胞进行体外原代培养,并给予不同浓度的VPA(0mg/L、50mg/L、100mg/L和250mg/L)处理,48h后收集培养液,采用ELISA法检测细胞睾酮的分泌,采用荧光实时RT-PCR(TaqMan.assay)方法检测卵泡内膜细胞中CYP17、P450scc和StARmRNA表达。结果:VPA刺激了卵泡内膜细胞睾酮的分泌(P<0.05),且CYP17(P<0.01)、P450scc(P<0.01)和StAR(P<0.01)mRNA表达增加。结论:VPA可直接作用于卵泡内膜细胞,改变CYP17、P450scc和StARmRNA表达,引起雄激素的分泌变化。临床上长期服用VPA的癫痫妇女出现类似于PCOS患者的生殖内分泌功能紊乱,可能与该药物本身作用有密切联系。

丙戊酸钠对人卵巢黄素化颗粒细胞激素分泌及相关甾体合成酶mRNA影响

目的 丙戊酸钠 (VPA)为抗癫痫的有效药物 ,长期应用可引起类似于多囊卵巢综合征 (PCOS)生殖内分泌功能紊乱 ,本研究通过人黄素化卵巢颗粒细胞原代培养体系 ,研究VPA对黄素化颗粒细胞的激素生成及类固醇激素生成急性调节蛋白 (StAR)、胆固醇侧链裂解酶 (P4 5 0scc)和芳香化酶(P4 5 0arom)的mRNA影响。方法 收集体外受精 -胚胎移植 (IVF ET)时的人黄素化颗粒细胞进行体外培养 ,适时给于不同浓度的VPA(0、10 0、2 5 0mg·L-1)处理 ,2d后收集培养液、细胞 ,采用放射免疫方法测定颗粒细胞分泌孕酮及雌二醇的量 ,并以细胞蛋白浓度校正激素含量。采用荧光实时RT PCR (TaqMan assay)方法检测颗粒细胞中StAR、P4 5 0scc和P4 5 0arommRNA表达。结果 VPA刺激人黄素化颗粒细胞的孕酮 (P <0 0 5 )和雌二醇 (P <0 0 1)的分泌 ,且StARmRNA (P <0 0 1)、P4 5 0scc(P <0 0 5 )和P4 5 0arom(P <0 0 1)表达增加。结论 VPA可直接作用于黄素化颗粒细胞 ,通过改变StAR、P4 5 0scc和P4 5 0arommRNA的表达 ,而引起孕酮和雌二醇的分泌变化 ,而临床上长期服用VPA的癫痫妇女出现类似于PCOS患者的生殖内分泌功能紊乱可能与该药物本身作用有密切联系 ,同时提示了非遗传因素即环境因素在PCOS发病中也发挥一定作用。