棉铃虫甾醇载体蛋白2原核表达及纯化

甾醇载体蛋白2(SCP-2)在昆虫体内甾醇吸收及运输过程中有着重要的生理功能。试验构建重组表达质粒pET-22b/HaSCP2,转化至E.coli BL21(DE3)进行诱导表达,并对IPTG浓度、诱导时间及温度进行优化,经Ni柱分离纯化后分析其与胆固醇结合活性。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白相对分子质量约为16 ku,且在25℃,IPTG终浓度0.2 mmol·L^(-1)下诱导10 h为最佳诱导表达条件。经荧光探针8-苯胺-1-萘磺酸(1,8-ANS)竞争分析,胆固醇与HaSCP-2结合半数有效浓度(EC50)为29.03μmol·L^(-1)。该研究为深入研究棉铃虫SCP-2的功能以及后续HaSCP-2抑制剂的筛选研究奠定了基础。

甾醇载体蛋白2抑制剂的研究进展

农业害虫对杀虫剂抗性的持续增加,严重威胁着农业可持续发展和人类生存。高效、安全的新型农药的创制是有效控制害虫的重要保证。胆固醇是昆虫细胞膜和脂蛋白的重要组成成分,是类固醇激素的合成前体。但昆虫本身缺乏合成胆固醇的关键酶,无法从头合成胆固醇,需要从植物中摄取。甾醇载体蛋白2(SCP-2)在昆虫转运胆固醇的过程中起着关键作用。SCP-2可以作为筛选高效安全新农药的潜在靶标。本文就近几年筛选出的甾醇载体蛋白2抑制剂进行了总结。

昆虫甾醇载体蛋白2及其抑制剂

农业害虫防治对提高农作物产量的意义深远,传统农药的长期大量使用使得害虫抗性问题越来越严重,开发绿色新靶标位点农药成为害虫防治的紧迫任务。本文综述分析了胆固醇在昆虫正常发育繁殖过程中起着重要抑制作用,其阻断植物甾醇是获取途径是开发新型杀虫剂的有效途径。