Candida rugosa脂肪酶同工酶的分离及选择固定化

采用“界面亲和层析” ,从商品Candidarugosa脂肪酶 (CRL)中分离到三个同工酶 (CRL 1、CRL 2和CRL 3) ,它们在水 有机溶剂双液相体系中催化 (R ,S) 萘普生甲酯的不对称水解反应 ,具有不同的立体选择性 .分析表明 :CRL 1和CRL 2上不同程度地非共价结合有小分子的酸性化合物 ,阻碍了其活性位点处疏水腔的完全开放 ;CRL 3上不含有该小分子酸性化合物 ,活性位点处疏水腔可处于完全开放构象 .据此分别将CRL同工酶选择性地固定在不同的载体 (GDX10 1和YWG NH2 )上 .通过简单易行的选择吸附步骤 ,可同时达到同工酶的分离及固定化目的 。