番泻叶苷A对糖尿病肾病大鼠足细胞自噬的影响

目的探究番泻叶苷A(sennoside A,SA)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠足细胞自噬及上皮-间质转化(EMT)的影响及可能的作用机制。方法随机选择10只雄性Wistar大鼠作为正常组,剩余大鼠尾静脉注射55 mg·kg^(−1)链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导DN大鼠模型。将成模大鼠随机分为模型组、SA低剂量组、SA高剂量组及贝那普利组,每组10只。SA低剂量组、SA高剂量组大鼠每日分别灌胃给予SA 40、80 mg·kg^(−1),贝那普利组大鼠每日灌服给予盐酸贝那普利10 mg·kg^(−1),模型组及正常组大鼠每日灌服等量生理盐水,连续给药21 d。检测24 h尿白蛋白(albumin,Alb)含量、大鼠空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、血肌酐(serum creatinine,Scr)和血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平;染色观察肾组织学变化;透射电镜观察肾脏组织自噬体形成情况;蛋白印迹法(Western blotting)检测肾组织中微管相关蛋白1轻链3(icrotubule associated protein 1 light chain 3,LC3)、Bcl-2相互作用蛋白1(Bcl-2 interacting protein 1,Beclin-1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、波形蛋白(vimentin,Vim)、沉默信息调节因子1(silencing information regulator 1,Sirt1)和肾病蛋白nephrin蛋白的相对表达水平。结果与正常组比较,其他4组大鼠24 h Alb含量、FBG及Scr、BUN水平升高,肾小球和肾小管发生病理损伤,胶原纤维及糖原明显沉积,肾小球系膜及基底膜增厚,肾组织中自噬体数量减少,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1、E-cad、nephrin及Sirt1蛋白的相对表达量降低,Vim蛋白的相对表达量升高(P<0.05);与模型组比较,3个给药组大鼠24 h Alb含量、FBG及Scr、BUN水平降低,肾小球和肾小管病理损伤情况呈不同程度减轻,胶原纤维及糖原沉积减弱,肾小球系膜及基底膜增厚情况改善,自噬体数量增加,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1、E-cad、nephrin及Sirt1蛋白的相对表达量升高,Vim蛋白的相对表达量降低(P<0.05);SA低剂量组、SA高剂量组及贝那普利组对DN大鼠的作用效果逐渐增强(P<0.05)。结论SA可改善DN大鼠肾功能障碍,其作用机制可能与激活Sirt通路进而促进足细胞自噬并减轻EMT有关。

番泻苷B通过Wnt/β-catenin通路抑制视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞增殖、凋亡和侵袭

目的探究番泻苷B对视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞增殖、凋亡、侵袭及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法通过采用不同剂量(0、5、10、20μmol/L)番泻苷B处理HXO-Rb44细胞,将细胞随机分为4组:Control组,番泻苷B 5、10、20μmol/L组。MTT法检测细胞活力;克隆形成实验检测克隆形成率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Transwell检测侵袭细胞数;细胞成球实验检测细胞成球直径和细胞成球数目;蛋白质印迹检测cleaved caspase-3、caspase-3、MMP-2、MMP-9、SOX2、OCT4、CD44、Wnt1、β-catenin蛋白表达。结果与Control组比较,番泻苷B 10、20μmol/L组细胞活力、克隆形成率显著降低(P<0.05),细胞凋亡率和cleaved caspase-3/caspase-3表达显著升高(P<0.05),侵袭细胞数和MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低(P<0.05),细胞成球直径、细胞成球数目和SOX2、OCT4、CD44蛋白表达显著降低(P<0.05),Wnt1、β-catenin蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论番泻苷B可抑制视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞增殖、侵袭和干细胞样特性,诱导细胞凋亡,抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化。

液质联用法定性检测熟大黄配方颗粒中的土大黄苷和番泻苷A

目的:应用液质联用法定性检测熟大黄配方颗粒中土大黄苷和番泻苷A。方法:采用HPLC-MS/MS法同时检测土大黄苷和番泻苷A,使用Welch UHPLC XB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.8μm),采用0.1%甲酸水-甲醇梯度洗脱,柱温35℃,流速0.3 mL·min^(-1),采用ESI离子源,多反应模式(MRM)模式。结果:该方法对土大黄苷和番泻苷A的检出浓度分别为:2.0 ng·mL^(-1)、8.0 ng·mL^(-1),用该方法检测了山东省内市售的8批熟大黄配方颗粒,均未检出土大黄苷和番泻苷A。结论:该方法专属性强,灵敏度好,能快速定性检查熟大黄配方颗粒中是否含有土大黄苷和番泻苷A,可用于熟大黄(药用大黄)配方颗粒的质量控制。

番泻叶化学成分与药理研究进展

番泻叶所属豆科植物尖叶番泻叶(cassia angustifolia vahl)和狭叶番泻叶(cassia acutifoliadelile)的干燥小叶。番泻叶植物性味甘、苦、寒,归大肠经,具有泻热通便的功效,并有致泻、止血、抗菌、肌肉松弛和抗胃黏膜损伤的作用,临床上主要用于治疗便秘、急性胃及十二指肠出血、急性胰腺炎、胆囊炎、慢性肾功能衰竭等疾病[1]。

正交实验法优化番泻叶的提取工艺

[目的]优选番泻叶中番泻苷的最佳提取工艺。[方法]建立同时测定番泻叶中番泻苷A和番泻苷B含量的方法,以番泻苷A、B的含量为指标,在单因素考察的基础上,进行正交实验优选最佳提取工艺。[结果]番泻叶中番泻苷的最佳提取工艺为10倍量0.5%的碳酸氢钠60℃搅拌提取1 h。[结论]优化后的提取工艺稳定可靠,可为番泻苷相关研究和实际生产提供依据。

HPLC测定番泻叶中5种主要化学成分的含量

目的：建立番泻叶中主要化学成分的含量测定方法。方法：采用HPLC，DiamonsilC18柱（4.6mm×250mm，5μm），流动相乙腈-1％冰醋酸梯度洗脱（10：90-15：85-18：82-20：80-25：75），流速1mL·min^-1，柱温40℃，检测波长270nm。结果：5种化学成分均达到基线分离，各成分都有较宽的线性范围和良好的线性关系。结论：本法快速、灵敏、准确，可靠，重复性好，可用于中药番泻叶药材的质量控制。

HPLC测定番泻总苷提取物中番泻苷A、番泻苷B的含量

目的:建立测定番泻总苷提取物中番泻苷A和番泻苷B的含量方法(高效液相法)。方法:采用ZORBAX Ec lipseXDB-C8柱,以乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液为流动相梯度洗脱,340 nm为检测波长。结果:番泻苷A在0.218 8μg到1.094 0μg范围内呈良好的线性关系(r=1.000 0),番泻苷B在0.262μg到1.310μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9)。结论:采用HPLC直接测定番泻叶中番泻苷A和番泻苷B的含量,方法简单快捷,结果可靠,可作为番泻总苷提取物质量控制的方法。

番泻叶致小鼠急性腹泻模型的建立

本研究旨在建立小鼠急性腹泻模型。取昆明小白鼠30只,随机分为3组,分别为模型组1、模型组2及对照组,每只分别灌胃1 g/mL番泻叶水煎液0.2 mL、0.3 mL和生理盐水0.2 mL。每天两次,连续5天。观察小鼠排便情况,并记录稀便率、稀便级、腹泻指数。试验第六天,每组随机选取小鼠5只采集血清,测定血糖和甘油三酯。采血后断颈处死,采集回肠和盲肠标本,制作苏木精-伊红(HE)染色病理切片。通过指标稀便率、稀便级、腹泻指数及体重分析,两种番泻叶浓度均可明显致小鼠急性腹泻(P<0.05),并对小鼠血糖水平无明显影响(P>0.05),但高浓度番泻叶使甘油三酯血液水平有明显降低(P<0.01)。饲喂番泻叶组小鼠的回肠盲肠黏膜均无明显坏死和炎症反应,但高浓度番泻叶会影响肠道黏膜下层间隙并使少量绒毛上皮细胞脱落。结果表明两种浓度番泻叶均可建立小鼠急性腹泻模型,但灌胃0.3 mL番泻叶组效果更明显。

HPLC法测定番泻叶中番泻苷A、番泻苷B的含量

目的建立测定番泻叶中番泻苷A和番泻苷B含量的方法(高效液相法)。方法采用ZORBAX Eclipse XDB-C8柱,以乙腈-0.1%三氟乙酸水溶液为流动相梯度洗脱,340nm为检测波长。结果番泻苷A在0.2188μg～1.0940μg范围内呈良好的线性关系(r=1.0000),番泻苷B在0.262μg～1.310μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999)。结论采用HPLC直接测定番泻叶中番泻苷A和番泻苷B的含量,方法简单快捷,结果可靠,可作为番泻叶质量控制的方法。

番泻叶治疗便秘作用机制的研究进展

便秘在我国是最常见的胃肠道症状之一,据统计,我国便秘总体患病率高达3%~11%。番泻叶(Senna)以其价格低廉、见效快等优势成为全世界应用最广泛的刺激性泻剂之一,其通便作用机制主要为调节肠神经系统、影响胃肠平滑肌、影响Cajal间质细胞、调节水通道蛋白以及干预肠道微生态等。本文通过搜集近5年的中英文文献资料,从番泻叶治疗便秘的临床研究、作用机制、不良反应等方面进展作一综述,以期为其相关制剂的研发提供理论依据。

番泻叶颗粒剂的研制及应用

参照《中国药典》及相关文献 ,考察了 30 %乙醇、5 0 %乙醇、70 %乙醇、95 %乙醇对活性成分番泻苷的浸出率。结果发现以 5 0 %乙醇为溶媒浸出率最高。从而确定了番泻叶颗粒剂的制剂工艺。同时制定出番泻叶颗粒剂的相关定性、定量及剂量标准。

番泻的不同部位中番泻苷A、B的含量研究

通过方法学考察,确定了简便、快速的番泻苷A、B HPLC含量检测法,其条件为Supersil-T C18柱,流动相为乙腈-0.4%磷酸水,其检测的波长为340 nm,柱温在25℃;流速为1.0 mL·min^-1;进样量是10μL。从研究我们可以发现,番泻叶以及番泻豆荚等不同部位中番泻苷A、B的含量得出,番泻豆荚中番泻苷A和B中的总含量要比番泻叶高,而且在不同部位含量也是不一样的:豆荚壳>叶片≈叶柄>果柄>种子。

番泻叶治疗腰椎术后便秘60例疗效观察

目的:观察番泻叶浸剂对腰椎术后便秘的临床疗效。方法:收集2019年1月—2020年10月江西中医药大学附属医院脊柱骨科病房收治的腰椎术后便秘患者120例,随机分为观察组和对照组,各60例。2组患者分别采用口服番泻叶浸剂和乳果糖口服溶液治疗。比较2组患者服药后的首次通气时间、首次通便时间、便秘症状消失时间、便秘症状积分及临床疗效。结果:治疗后,2组患者首次通气、首次通便及便秘症状消失时间比较,差异有统计学意义(P<0.05);2组患者便秘症状积分比较,第1天差异无统计学意义(P>0.05),第2天开始观察组积分明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);2组总有效率比较,对照组为86.67%,观察组为91.67%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:番泻叶浸剂、乳果糖口服溶液治疗腰椎术后便秘均有良好疗效,但番泻叶浸剂缓解便秘症状相对较快,恢复胃肠道功能更有效。

番泻叶苷A基于AMPK/Nox4信号通路对糖尿病肾病小鼠的作用

目的探讨番泻叶苷A(sennoside A,SA)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠糖脂代谢和肾功能的影响及作用机制。方法取80只小鼠,64只以高脂喂养联合链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)注射法建立DN模型,随机分为模型组及SA低剂量、中剂量和高剂量组,各16只,剩余16只未建立模型的小鼠作为对照组。SA低剂量、中剂量和高剂量组每天分别腹腔注射SA(15、30、60 mg·kg^(-1))3 mL,对照组和模型组注射生理盐水3 mL。连续28 d。比较各组小鼠肾脏指数、肾功能指标、糖脂代谢、形态学差异、转化生长因子-β_(1)(transforming growth factor-β_(1),TGF-β_(1))、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylated AMP-activated protein kinase,p-AMPK)以及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphatase oxidase 4,Nox4)蛋白的表达水平。结果SA各剂量组肾脏指数、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、24 h尿总蛋白(24 hours urinary total protein,24 h UTP)、血清肌酐(serum creatinine,Scr)、胆固醇(cholesterin,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、空腹血糖(fasting plasma glucose,FBG)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin A1c,HbAlc)、TGF-β_(1)、TNF-α和MDA水平及Nox4蛋白水平较模型组降低;高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、SOD水平和p-AMPK蛋白水平较模型组升高;且均呈剂量依赖性(P<0.05)。结论SA可有效恢复DN小鼠肾功能,改善糖脂代谢紊乱,降低炎症反应和氧化应激损伤,其可能与调控AMPK/Nox4信号通路有关。

利那洛肽联合聚乙二醇对比番泻叶联合聚乙二醇在便秘病人肠道准备中的应用

目的对比利那洛肽联合聚乙二醇(PEG)与番泻叶联合聚乙二醇对便秘病人肠道准备的有效性及安全性。方法选取2020年10月至2022年5月在蚌埠医学院附属阜阳医院行肠镜检查的便秘病人150例,按数字表法分为A、B、C三组,每组50例。肠镜检查前,A组病人服用利那洛肽+2L PEG、B组病人服用番泻叶颗粒+2L PEG、C组病人服用3L PEG,其中C组为对照。主要观察指标为肠道准备效果,该指标根据波士顿肠道准备量表(BBPS)进行评分,次要观察指标为息肉检出率、再次肠道准备意愿及不良反应发生率。结果A组病人三段BBPS评分[(2.22±0.65)分、(2.12±0.66)分、(2.12±0.69)分]、B组病人三段BBPS评分[(2.08±0.75)分、(2.02±0.74)分、(1.86±0.76)分]均优于C组[(1.70±0.54)分、(1.60±0.58)分、(1.46±0.50)分](均P<0.05)。A、B组总BBPS评分[(6.46±1.05)分、(5.96±1.03)分]优于C组(5.00±0.99)分(均P<0.05),A组病人总BBPS评分优于B组(6.46±1.05)分比(5.96±1.03)分(P<0.05),A组病人各段BBPS评分与B组,差异无统计学意义(P>0.05)。A组病人息肉检出率、腹胀发生率优于C组[48%(24/50)比10%(5/50)、12%(6/50)比34%(17/50)](均P<0.017),B组病人腹胀发生率、再次肠道准备意愿优于C组[8%(4/50)比34%(17/50)、4%(2/50)比24%(12/50)](均P<0.017),A组病人息肉检出率、腹胀及恶心发生率、再次肠道准备意愿较B组差异无统计学意义[48%(24/50)比13%(26/50)、12%(6/50)比8%(4/50)、10%(5/50)比10%(5/50)、8%(4/50)比4%(2/50)](均P>0.017)。三组病人腹痛发生率差异无统计学意义[4%(2/50)、6%(3/50)、14%(7/50)](均P>0.017)。结论利那洛肽联合PEG可提高病人肠道准备质量、提高病变检出率、降低不良反应发生率、提高再次肠道准备意愿,是一项更为优化的肠道准备方案。

番泻叶及其伪品的鉴别

对番泻叶正品及各伪品进行了性状鉴别,并以正品为对照做了理化比较,结果表明:正品与各伪品间有一定的差异,可准确的予以鉴别。

高效毛细管电泳法测定番泻叶中番泻苷A的含量

目的:对番泻叶中的有效成分番泻苷A进行含量测定。方法:采用毛细管胶束电动色谱,熔融石英毛细管柱(57cm×75μm,有效长度50cm),电解缓冲液:37.5mmol·L^(-1)Tris,25％乙腈,1mmol·L^(-1)SDS,稀磷酸调pH至8.9;柱温:25℃;柱上紫外检测波长:214nm。结果:回归方程为Y=-921.4+2 158 848X,r=0.9998,平均回收率为99.56％,RSD为1.2％(n=5)。结论:本方法简便、快速,重现性好。