番石榴叶总黄酮对实验性糖尿病小鼠血糖水平的影响

诱导链脲佐菌素性高血糖小鼠模型,观察番石榴叶总黄酮对高血糖小鼠血糖、血脂水平的影响,比较给药前后体重及心脏、肝脏、肾脏和胰腺的脏器指数变化.发现番石榴叶总黄酮能降低链脲佐菌素性高血糖小鼠血糖水平.

大孔吸附树脂分离纯化番石榴叶总黄酮的研究

考察大孔吸附树脂吸附分离番石榴叶总黄酮的工艺条件.以静态饱和吸附量、静态洗脱率、动态饱和吸附量、动态洗脱率为考察指标,比较了D101、AB-8两种大孔树脂分离纯化番石榴叶总黄酮的优劣.又以总黄酮回收率为指标,对最佳树脂吸附工艺参数进行了研究.在考察的2种树脂中,AB-8型树脂最适于番石榴叶总黄酮的分离纯化,其工艺条件为:4倍树脂体积50%乙醇洗脱,速度2mL/min.树脂可重复使用4次,其平均总黄酮回收率为87.47%,所得总黄酮纯度为74.03%

番石榴叶总黄酮对2型糖尿病模型小鼠肝糖异生ERRγ/CREBH信号通路相关因子的影响

目的:探讨番石榴叶总黄酮(GLTF)对2型糖尿病(T2DM)模型小鼠肝脏雌激素相关受体γ(ERRγ)/环磷酸腺苷应答元件结合蛋白H(CREBH)通路相关因子的影响,探讨其降血糖作用的具体机制。方法:取健康雄性ICR小鼠,采用高糖高脂饲料喂养联合多次腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法建立T2DM模型。将造模成功的小鼠按血糖值随机分为模型组、二甲双胍组(阳性对照,0.17 g/kg)、消渴降糖胶囊组(阳性对照,0.75 g/kg)和GLTF低、高剂量组(0.047、0.094 g/kg),每组12只;另选12只正常小鼠作为正常组。除正常组和模型组小鼠灌胃等体积水外,其余各组小鼠灌胃相应药物溶液10 mL/kg,qd,连续21 d。给药结束后,检测各组小鼠空腹血糖值、血清胰岛素水平,计算胰岛素敏感指数(ISI);采用苏木素-伊红染色法观察小鼠肝脏和胰腺组织病理学变化;采用免疫印迹法检测小鼠肝组织中ERRγ、CREBH的蛋白表达水平;采用实时定量聚合酶链式反应法检测小鼠肝组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC1α)、CREB调节转录辅激活因子2(TORC2)的mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠空腹血糖和血清胰岛素水平均显著升高,ISI值显著降低(P<0.01);肝组织病变明显、可见大量空泡;胰腺组织中胰岛数目减少、体积变小,胰岛细胞呈轻度空泡病变;肝组织中ERRγ、CREBH的蛋白表达水平及PGC1α、TORC2的mRNA表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,GLTF各剂量组小鼠上述血糖、胰岛素指标及病理学变化均明显改善;肝组织中ERRγ、CREBH的蛋白表达水平及PGC1α、TORC2的m RNA表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:GLTF对T2DM模型小鼠具有明显降糖及肝、胰腺组织保护作用;其降血糖作用的机制可能与抑制肝脏ERRγ/CREBH信号通路有关。

番石榴叶总黄酮抑制泡沫细胞形成及LOX-1表达的实验研究

目的研究番石榴叶总黄酮抑制泡沫细胞形成及LOX-1表达的作用。方法建立THP-1单核-巨噬细胞源性泡沫细胞模型,根据CCK-8法测定的番石榴叶总黄酮对该细胞的安全浓度范围,将配制的番石榴总黄铜溶液在其安全范围内选取低、中、高三个剂量组,以无血清培养液的空白对照组及ox-LDL模型组为对照。采用油红O染色观察细胞内脂质堆积情况,酶偶联比色法检测细胞内总胆固醇含量,Western blot法检测LOX-1的蛋白表达水平。结果三个剂量组细胞内总胆固醇含量均低于模型组(P<0.05),并随番石榴叶总黄酮浓度升高而下降;三个剂量组的LOX-1蛋白表达均低于模型组(P<0.05),抑制作用随剂量升高而增强。结论番石榴叶总黄酮通过抑制LOX-1的表达,减少巨噬细胞摄取ox-LDL,抑制泡沫细胞形成,从而起到抗动脉粥样硬化的作用。

番石榴叶总黄酮对AngⅡ诱导的乳鼠心肌细胞肥大的抑制作用及机制

目的 观察番石榴叶总黄酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的乳鼠心肌细胞肥大的抑制作用,并探讨其作用机制。方法 体外分离培养乳鼠心肌细胞,将细胞分为模型组和番石榴叶总黄酮低、中、高剂量组。模型组加入AngⅡ0.1μmol/L诱导心肌细胞肥大,番石榴叶总黄酮低、中、高剂量组先分别加入番石榴叶总黄酮50、100、150μg/mL预处理24h,然后加入AngⅡ0.1μmol/L培养24h。另设正常对照组,加入含10%FBS的DMEM高糖培养基培养24h,后改以含0.1%FBS的DMEM进行无血清培养48h。采用免疫荧光染色法测算细胞面积,Bradford法检测心肌细胞总蛋白含量,Western blotting法检测心肌细胞中血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)、蛋白激酶C(PKC)蛋白表达。结果 与正常对照组比较,模型组和番石榴叶总黄酮低、中、高剂量组心肌细胞面积均增加;与模型组比较,番石榴叶总黄酮低、中、高剂量组心肌细胞面积缩小,其中高剂量组小于低、中剂量组(P均<0.01)。与对照组比较,模型组心肌细胞内总蛋白含量升高(P<0.05);与模型组比较,番石榴叶总黄酮各剂量组总蛋白含量均减少,其中高剂量组少于中、低剂量组(P均<0.05)。与对照组比较,模型组心肌细胞中AT1R、PKC蛋白表达升高(P均<0.01)。结论 AngⅡ可诱导乳鼠心肌细胞肥大,番石榴叶总黄酮预处理可抑制心肌细胞体积增大、总蛋白合成,从而抑制心肌肥厚;该机制与调控AT1R-PKC通路有关。

番石榴叶总黄酮对糖尿病大鼠肾脏Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的探讨番石榴叶总黄酮(TFPGL)对糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用及机制探讨。方法雄性SD大鼠24只,按随机数字表法分成对照组、糖尿病组、TFPGL治疗组,每组8只,后2组大鼠采用单次腹腔注射链脲佐菌素(55 mg/kg)诱导糖尿病模型,TFPGL治疗组加用200 mg/kg TFPGL灌胃。12周后收集血、尿及肾组织,检测血糖(BS)、血尿素氮(BUN)、尿蛋白/尿肌酐比值(ACR)及血清肌酐(SCr)的变化,HE染色检测肾脏病理改变,免疫荧光、免疫组织化学染色及Western blot检测肾脏核因子NF-E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)表达。结果与对照组相比,糖尿病组BS、BUN、ACR及SCr明显升高,Nrf2表达增加,HO-1表达下降(均P<0.05);而给予TFPGL治疗后,BS、BUN、ACR及SCr较糖尿病组明显降低,Nrf2、HO-1表达明显增加(均P<0.05)。结论 TFPGL对糖尿病大鼠肾脏病变具有一定的治疗效果,其机制可能与降低血糖和激活Nrf2/HO-1信号通路有关。

番石榴叶总黄酮对高血压模型大鼠心肌肥厚的改善作用

目的研究番石榴叶总黄酮对高血压模型大鼠心肌肥厚的改善作用。方法从60只健康SD大鼠中随机取10只作为正常组;另外50只大鼠复制高血压模型,将其中建模成功的44只采用随机体质量排序法分为模型组、茴香霉素组[p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)激活剂,1 mg/kg]、番石榴叶总黄酮+茴香霉素组(200 mg/kg番石榴叶总黄酮+1 mg/kg茴香霉素)、番石榴叶总黄酮组(200 mg/kg),每组11只。正常组和模型组大鼠灌胃3%羟甲基纤维素钠溶液,其余各组大鼠灌胃相应药液,每天1次,连续6周。检测大鼠血压(收缩压、舒张压、平均动脉压)水平和心脏指数、左心室指数;检测大鼠心肌组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6水平;观察大鼠心肌组织的病理形态学变化;检测大鼠心肌组织中p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白的表达水平。结果与正常组比较,茴香霉素组、模型组大鼠的收缩压、舒张压、平均动脉压水平,心脏指数、左心室指数和心肌组织中TNF-α、IL-1β、IL-6水平以及p-p38 MAPK、p-ERK1/2、p-JNK蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05);心肌细胞肥大,心肌纤维走向紊乱,心肌纤维间结缔组织疏松水肿、增生,炎症细胞浸润增多等。与茴香霉素组、模型组比较,番石榴叶总黄酮+茴香霉素组、番石榴叶总黄酮组大鼠上述指标水平均显著降低(P<0.05);心肌细胞稍大、排列尚可,心肌细胞肥大程度及结缔组织疏松水肿、增生情况减轻,且番石榴叶总黄酮组的改善效果更为显著(P<0.05)。结论番石榴叶总黄酮可降低高血压模型大鼠的血压水平,并改善其心肌肥厚,其作用机制可能与抑制p38 MAPK信号通路活性及炎症因子表达有关。

番石榴叶总黄酮对糖尿病小鼠肝脏葡萄糖代谢及胰岛素信号通路的影响

目的:研究番石榴叶总黄酮对糖尿病小鼠肝脏葡萄糖代谢及胰岛素信号通路相关分子表达的影响,探索其降糖作用机制。方法:雄性BALB/c小鼠,腹腔注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ)60 mg·kg-1连续5 d后,血糖仪检测空腹血糖水平,以连续3 d空腹血糖浓度>11.1 mmol·L-1为糖尿病模型成功标准。糖尿病小鼠随机分为模型组和番石榴叶总黄酮低、中、高剂量治疗组,每组10只,另设10只正常小鼠。低、中、高剂量治疗组分别以番石榴叶总黄酮0.093,0.186,0.372 g·kg-1灌胃,正常组和模型组以等体积蒸馏水灌胃,2周后测其空腹血糖、病理观察胰岛数目及形态学改变、荧光PCR法检测肝葡萄糖激酶(glucokinase,GK),葡萄糖激酶调节蛋白(glucokinase regulatory protein,GKRP),葡萄糖转运蛋白-2(glucose transporter 2,GLUT-2),胰岛素生长因子-1(insulin growth factor-1,IGF-1),胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1),胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate-2,IRS-2)表达。结果:与正常组比,模型组小鼠体重明显降低(P<0.01),血糖明显升高(P<0.01);胰岛变性明显,胰岛数目明显减少、体积变小、甚至消失;肝GK,GLUT2,IGF-1,IRS-1和IRS-2表达下降,GKRP表达增高。与模型组比,番石榴叶总黄酮治疗组血糖明显降低(P<0.05),胰岛数目明显增多;GK,GLUT2,IGF-1,IRS-1和IRS-2表达升高,GKRP表达下降,中剂量组治疗效果最好(P<0.05)。结论:番石榴叶总黄酮低、中、高剂量均能明显降低STZ糖尿病小鼠血糖水平,可能与其增强肝脏GK,GLUT2,IGF-1,IRS-1,IRS-1表达,降低肝GKRP表达及促进胰岛再生有关。

番石榴叶总黄酮促进糖尿病模型小鼠胰岛再生机制

目的:观察番石榴叶总黄酮对链脲佐菌素(streptozocin,STZ)糖尿病模型小鼠胰腺组织中胰腺十二指肠同源盒因子-1(pancreas-duodenumhomeobox-1,PDX-1),神经元素3(neurogenin 3,Ngn3),NK6转录因子相关基因座1(NK6 transcription factor related locus 1,Nkx6.1)表达的影响,探讨其促进胰岛β细胞再生的机制。方法:将STZ糖尿病模型小鼠随机分为模型组和治疗组,治疗组包括番石榴叶总黄酮低、高剂量组及二甲双胍组,另设10只正常小鼠为正常组。番石榴叶总黄酮低、高剂量组按小鼠体重分别以番石榴叶总黄酮0.198,0.396 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,二甲双胍组以二甲双胍0.087 5 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,正常组和模型组以等体积蒸馏水灌胃,2周后检测其空腹血糖、体重,苏木素-伊红(HE)染色观察胰岛病理形态学改变,实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测胰腺组织内胚胎期胰岛β细胞发育相关转录因子PDX-1,Ngn3,Nkx6.1 mRNA相对表达量。结果:与正常组比较,STZ糖尿病模型小鼠胰腺组织中PDX-1,Ngn3,Nkx6.1表达量明显下降(P<0.01);与模型组比较,番石榴叶总黄酮治疗组PDX-1,Ngn3,Nkx6.1 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:番石榴叶总黄酮能上调糖尿病小鼠胰腺组织中PDX-1,Ngn3,Nkx6.1的表达;胰岛β细胞再生机制可能与PDX-1,Ngn3,Nkx6.1 mRNA表达的上调有关。

番石榴叶总黄酮对慢性胰腺炎小鼠纤维化的影响

目的：探讨番石榴叶总黄酮（total flavonoids from Psidium guajava leaves,TFPGL）对慢性胰腺炎（chronic pancreatitis,CP）小鼠纤维化的影响及其机制。方法：将50只C57BL/6小鼠随机均分为正常组,CP模型组,oxidized ATP（oxATP）组,TFPGL低、高剂量组。后4组小鼠腹腔注射雨蛙素50μg·kg^-1·h^-1（溶于200μL生理盐水）,每天6次,每周3 d,连续6周,建立慢性胰腺炎小鼠模型。6周后,oxATP组腹腔注射oxATP（15μg·kg^-1·d^-1,溶于200μL生理盐水）2周,TFPGL低、高剂量组分别予以TFPGL 0.186,0.372 g·kg^-1·d^-1灌胃2周。同时,正常组小鼠腹腔注射与模型组等体积、等频率的生理盐水。苏木素-伊红（HE）染色评估胰腺损伤程度;天狼星红染色检测胰腺组织胶原含量;免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）,核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（nucleotide binding oligomerization domain-like receptor 3,NLRP3）,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1）的蛋白表达水平;酶联免疫吸附法测定胰腺组织中IL-1β（interleukin-1β）,IL-18水平。结果：与正常组比较,雨蛙素注射后胰腺损伤加重（P〈0.01）,Caspase-1,NLRP3,α-SMA,IL-1β,IL-18水平升高（P〈0.01）。天狼星红染色显示胰腺组织细胞周围胶原Ⅰ（ColⅠ）,胶原Ⅲ（ColⅢ）含量较正常组升高（P〈0.01）。与模型组比较,oxATP组及TFPGL低、高剂量组炎症损伤及纤维化程度均减轻,表现为天狼星红染色程度减轻（P〈0.05,P〈0.01）,Caspase-1,NLRP3,α-SMA,IL-1β,IL-18水平均降低（P〈0.05,P〈0.01）。结论：TFPGL可通过抑制P2X7R介导NLRP3炎性体信号途径活化显著减轻慢性胰腺炎模型小鼠的慢性炎症及纤维化程度。

番石榴叶总黄酮对糖皮质激素处理大鼠血清学的影响

探讨番石榴叶总黄酮对糖皮质激素处理大鼠血清学的影响。方法:24只4.5月龄SPF级雌性SD大鼠,按照体重随机分为空白对照组(CON)、模型组(GC)、模型+给药组(GC+FH),每组8只。醋酸泼尼松连续给药12周,每天给药1次,同时采用番石榴叶总黄酮灌胃给药进行干预。实验结束时,大鼠麻醉后进行心脏采血,分离出血清,检测血清甘油三酯(TG)、葡萄糖(Glu)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量。结果:糖皮质激素处理大鼠血清TG、Glu、MDA含量上升(P<0.05),SOD含量下降(P<0.05),血清学代谢出现异常;给予番石榴叶总黄酮干预后,大鼠血清TG、Glu、MDA含量下降(P <0. 05),SOD含量上升(P<0.05),血清学代谢得到改善。结论:番石榴叶总黄酮可预防糖皮质激素引起的大鼠血清学代谢异常。