果型和抗性基因协同对番茄黄化曲叶病毒带毒量的影响

以12份番茄种质为试材,其具有2类果实大小和3种不同抗性基因,通过检测番茄黄化曲叶病毒病田间抗性和带毒量指标,探索果实大小、抗病基因与田间抗性、带毒量之间的关系。结果显示,在自然传毒情况下,所有番茄材料都能检测到病毒感染。在番茄定植后28 d,小果型番茄M8(I)、M5(I)、M3(I)、M7(I)、M9(I)和M11(HR)带毒量均较低,大果型番茄M6(S)、M10(S)、M4(S)和M2(S)带毒量均较高,且小果型番茄田间发病率明显低于大果型番茄。除了Ty-1/ty-1单基因抗性不受番茄果实大小影响外,携带其他单基因或聚合基因抗性的番茄种质均与果实大小有关。在此节点上,带毒量越高抗性越弱,带毒量越低抗性越强。总体来说,在遭受番茄黄化曲叶病毒侵染时,小果型番茄田间抗性强于大果型番茄。

冠菌素提高番茄对番茄黄化曲叶病毒抗性的分析

番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)在生产上是一种毁灭性病害,而目前针对该病害尚无有效的防治措施。冠菌素可在植物抗逆反应中发挥一定作用,然而冠菌素提高番茄对TYLCV抗性的研究还鲜有报道。为探究冠菌素提高番茄抗番茄黄化曲叶病的机制,以番茄感病品种浦粉一号为试验材料,在盆栽试验中,通过qPCR的方法来检测叶片中TYLCV病毒含量,分别采用氮蓝四唑还原法、愈创木酚比色法和紫外吸收法测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性,通过实时荧光定量PCR测定抗性相关基因表达量。在田间试验中,利用卷尺、游标卡尺等测定番茄植株叶片数、茎粗、开展度,并统计病情指数和植株发病率。结果表明,冠菌素处理显著降低TYLCV含量约83.5%(P<0.000 1),显著增加了POD、SOD的活性(P<0.0001、P<0.05),上调编码叶绿素a/b结合蛋白基因Cab-1A和Cab-1D,诱导番茄抗病信号通路上FLS2和PR-1a1上调表达。田间试验结果表明,冠菌素处理降低了植株平均病情指数和发病率,并显著增加了番茄植株的开展度(P<0.000 1)。综上所述,冠菌素可以降低番茄植株叶片中TYLCV含量,影响番茄抗氧化酶活性并增加抗性相关基因的表达量。研究结果可为冠菌素在番茄抗TYLCV过程中的应用提供理论依据。

番茄黄化曲叶病毒病的发生与防控

随着番茄种植规模化发展,番茄黄化曲叶病毒病发生率逐渐提高,严重时会造成重大经济损失。该文总结了该病的病原特征、传播渠道与发生症状,阐述了农业防治、物理防治、生物防治、化学防治等防控措施,以期有效降低该病造成的损失,确保种植效益。

不同番茄品种对黄化曲叶病毒病抗性差异性初探

作者以9个番茄品种的实生苗和其嫁接苗为试验材料,开展了番茄黄化曲叶病毒病抗性差异比较试验。试验结果表明,苍南2821和倍盈对黄化曲叶病毒具有一定的抗性,尤其嫁接苗抗性更好,病株率分别为3.89%和11.67%、病情指数分别为2.41和4.56,病株率和病情指数均显著低于其他品种;此外,同一番茄品种嫁接苗的抗性普遍好于实生苗。因此,苍南2821和倍盈的嫁接苗可作为浙江兰溪地区秋茬番茄备选品种。

和田地区设施番茄抗黄化曲叶病毒病的比较试验

为筛选出和田地区设施番茄高抗黄化曲叶病毒病品种,为设施番茄黄化曲叶病毒病的防治及抗病品种的选择提供依据。结果表明,供试品种均发现不同程度的黄化曲叶病毒侵染,番茄品种间株高、茎粗和叶片数随着黄化曲叶病毒发病率和病情指数的增加而呈下降趋势。叶绿素相对含量(SPAD值)、叶片净光合速率(Pn)和产量以特美特36号最高,与优拉578和东风199差异不显著,但显著高于其他处理。品种戴安娜、优拉578、东风199、澳粉1号、芬娜和艾利斯相对抗病指数为0.86~0.99,为高抗品种。从抗病性、植株性状、叶片光合参数和产量等指标进行综合分析,以品种特美特36号、东风199和优拉578表现较好,可作为新疆和田地区设施秋茬番茄抗黄化曲叶病毒病首选品种。

番茄黄化曲叶病毒安徽分离物的基因组结构特征及变异分析

利用滚环扩增(RCA)技术从安徽淮北番茄温室表现曲叶症状的番茄上获得番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)的2个分离物全基因组。2个TYLCV DNA-A核苷酸序列全长均为2781 nts,共编码6个ORF。序列比对结果表明,2个TYLCV安徽分离物DNA-A核苷酸序列同源性为99.7%,与已报道的国内外其他24个TYLCV各分离物同源性高达97.8%~99.9%。系统进化分析显示,TYLCV安徽分离物与来自吉林、沈阳、天津、邯郸和山东的5个TYLCV分离物亲缘关系最近。

侵染假酸浆的泰国番茄黄化曲叶病毒全基因组结构特征

为明确假酸浆Nicandra physalodes叶片黄化、皱缩症状是否由菜豆金色花叶病毒属病毒侵染引起,本研究利用分子检测方法和生物信息学技术鉴定了假酸浆样品中的病毒种类。从采集的病样中克隆并获得了2条菜豆金色花叶病毒属病毒DNA-A全序列和1条beta卫星全序列,经全序列分析发现,该双生病毒的两条DNA-A全序列与泰国番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl Thailand virus,TYLCTHV)云南分离物TYLCTHV-YN1732一致性最高,达99.3%,亲缘关系较近;beta卫星的全序列与云南番茄曲叶beta卫星(tomato leaf curl Yunnan betasatellite,TLCYnB)的分离物YN5230一致性最高,达99.3%,亲缘关系较近。重组分析显示,假酸浆上分离的TYLCTHV-YN5735-12是一个重组病毒,有两个重组事件,一个主要发生在AV 1的编码区,由中国番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV)和广西大戟曲叶病毒(euphorbia leaf curl Guangxi virus,EuLCGXV)重组形成,另一个重组事件主要发生在基因间隔区(IR区),由泰国烟草卷叶病毒(tobacco leaf curl Thailand virus,TbLCTHV)和TYLCTHV重组形成。研究结果表明,假酸浆是TYLCTHV的新寄主,这是单组分菜豆金色花叶病毒属病毒及其伴随beta卫星侵染假酸浆的首次报道。

番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)基因介导抗病性研究进展

番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)已经遍布世界各地,也是限制我国番茄主产区生产的主要因素,由于TYLCV易变异,常规育种单一基因抗性难以持久,本文总结了国内外利用TYLCV病毒来源基因(V1、C1等)介导抗性的研究,并且分析了其产生广谱抗性的原因。

优质串收抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)樱桃番茄新品种‘圣婴'的选育

‘圣婴'是以22-2-3-2-4-1为母本,M10-2为父本杂交选育而成的抗番茄黄化曲叶病毒的高档串收樱桃番茄品种。无限生长类型,早中熟,植株长势强,第一花序着生于第7—9节,花序间隔3—4叶,花序顺直美观,每花序小花数14—16个,果实近圆形,大小均匀,果实硬度好,单果重20—25 g,可溶性固形物含量8.0%,成熟果亮红色,着色均匀,口感佳,商品性好,串收性强,抗黄化曲叶病毒病和根结线虫,适宜保护地栽培。

中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCV-CHI)外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

经PCR获得了中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCV-CHI)外壳蛋白(CP)基因,并克隆到pGEM-7Zf(+)载体上.序列分析表明,TYLCV-CHI感染番茄或烟草时,CP基因的核苷酸序列发生变化,并且在烟草上随感染时间的延长,突变频率增高.连接到含有编码tRNAarg4基因argU的表达载体pSBET后,TYLCV-CHI CP基因在大肠杆菌中以包含体形式得到大量表达(约33 ku).以表达的蛋白作抗原免疫家兔,制备了抗TYLCV-CHI CP的抗血清.ELISA实验表明,该血清与抗原特异反应,血清效价为1:3000.Western印迹实验还表明,该血清除了与感染TYLCV-CHI的番茄、烟草有特异免疫反应外,还与感染南瓜曲叶病、烟草曲叶病的叶片有免疫反应,表明这些病毒之间有明显的血清学关系.

河北省石家庄市番茄黄化曲叶病毒及其伴随DNAβ的分子鉴定及序列分析

在河北石家庄市的番茄上分离得到番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)及其伴随卫星DNA(Betasatellite DNA,又称DNAβ),对其进行分子鉴定及序列分析,明确TYLCV石家庄分离物及其伴随DNAβ分子结构特征及其进化起源。根据已报道的TYLCV及其伴随DNAβ序列设计引物,分别扩增TYLCV石家庄分离物及其伴随DNAβ的全长序列并测序。在NCBI上选取国内外有代表性的TYLCV序列和DNAβ序列,使用MEGA 6.0软件和DNAMAN软件对石家庄TYLCV分离物及其伴随DNAβ进行遗传变异分析。结果表明:TYLCV石家庄分离物全长为2781 bp,共有6个ORFs,将该分离物定名为TYLCV-SJZ2021。基因组序列比对发现,TYLCV-SJZ2021与山东省的分离物同源性最高(99%);与2015年本实验室报道的TYLCV石家庄分离物相似度为98.67%,存在37处碱基差异,均属于TYLCV以色列株系。TYLCV-SJZ2021的伴随DNAβ全长1343 bp,其上有病毒在细胞间移动相关蛋白的BC1编码区,序列比对发现该DNAβ与河南TYLCV伴随DNAβ分子最为相似(98%)。从分子水平上鉴定了TYLCV-SJZ2021及其伴随DNAβ的分类地位,为防治该病毒病害及其抗病育种奠定了基础。

抗番茄黄化曲叶病毒病(TYLCVD)番茄品种奥美拉1618的选育

抗病品种的选育是防治番茄黄化曲叶病毒(TYLCVD)最经济有效的措施.奥美拉1618是以T12-041A为母本,以T12-055A为父本,通过常规杂交育种技术,并结合分子标记辅助技术选育的杂交一代番茄新品种.该品种具有丰产、果实商品性优良、综合抗性强的特点,同时可抗番茄黄化曲叶病毒病、灰叶斑、番茄花叶病毒(ToMV)、枯萎病,中抗冠状根腐,适宜在我国喜食红果而TYLCVD发生严重的地区种植,尤其是我国华南地区.

陕西省番茄黄化曲叶病毒基因间隔区缺失突变体的鉴定与不同分离物间群体进化研究

为明确番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)基因组的变异情况,分别从陕西省杨凌区、泾阳县、大荔县和阎良区采集了表现为番茄黄化曲叶病症状的抗病品种番茄样品20份以及感病品种番茄样品4份。经TYLCV特异性引物检测,24个样品均为阳性。通过全长扩增测序获得了15个TYLCV分离物的基因组序列。序列分析显示,其中7个分离物基因组大小为正常的2781 bp,而有8个TYLCV分离物基因组大小为2768 bp。与正常基因组相比,这8个分离物在基因间隔区(intergenic region,IR)的TATA-box与保守9核苷酸序列之间发生了13个核苷酸的缺失。对我国不同地区TYLCV分离物全基因组序列进行变异分析,发现IR区域是发生核苷酸变异最大的区域。系统进化分析表明,本研究分离到的15个TYLCV分离物均属于TYLCV-Israel进化分支下的中国亚群,其中8个TYLCV IR缺失突变体与国内已报道的IR缺失突变体BJ04和BJ06亲缘关系较远,而与本研究中分离得到的正常TYLCV分离物亲缘关系最近,疑似为陕西地区出现的一类新TYLCV IR缺失突变体。本研究首次对我国不同地区多个TYLCV分离物出现IR区缺失现象进行了报道。

寡糖·链蛋白和噻虫嗪组合对番茄黄化曲叶病毒病的防效试验

为探究寡糖·链蛋白和噻虫嗪组合对番茄黄化曲叶病毒病的防控效果,选用6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂、25%噻虫嗪水分散粒剂及6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂+25%噻虫嗪分散粒剂对番茄黄化曲叶病毒病进行田间防治试验。结果表明:25%噻虫嗪水分散粒剂灌根显著降低了烟粉虱虫口数;6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂喷施+25%噻虫嗪水分散粒剂灌根处理效果最好,番茄黄化曲叶病毒发病率和病情指数显著低于空白对照,防控效果为74.25%,番茄株高、叶长、叶宽、SPAD值、氮含量、叶片净光合速率(Pn)及产量均显著高于对照,比对照增产52.82%。综上所述,6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂和25%噻虫嗪水分散粒剂组合使用可有效防控番茄黄化曲叶病毒病和烟粉虱的发生,达到增产增效的目的。

GroEL基因抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的研究

利用烟粉虱体内GroEL基因,构建了具有抗生素标记的SUC2-GroEL和无抗生素标记的CaMV35S-PDRB10 2个植物表达载体。通过农杆菌介导法转化番茄,获得抗性再生苗。对抗性植株进行PCR、RT-PCR以及病毒检测。PCR检测结果表明:SUC2-GroEL载体和CaMV35S-PDRB10载体转化的阳性植株分别有11株和9株。RT-PCR检测结果显示:SUC2-GroEL载体和CaMV35S-PDRB10载体转化植株分别有6株和2株检测到GroEL基因特异条带,说明GroEL基因在转录水平得到表达。农杆菌病毒接种和带毒烟粉虱传毒检测结果显示,SUC2-GroEL载体转基因植株3、4和5号和CaMV35S-PDRB10载体转基因植株5号均未表现发病症状,证明利用GroEL基因抗番茄黄化曲叶病毒具有可行性,而且SUC2启动子诱导的GroEL抗性更加理想。

应对抗番茄黄化曲叶病毒番茄品种抗性退化的策略

由黄化曲叶病毒引起的番茄黄化曲叶病是番茄生产中最为严重的病害之一,选育抗病品种是防治该病的重要措施。结合多年研究结果及生产实践经验,提出了应对抗番茄黄化曲叶病毒番茄品种抗性退化的三条策略——切断病毒传播途径,加强田间种植管理,采用不同抗性品种轮换种植。

RNA干扰V1和C1提高番茄植株对番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的抗性

为了获得高抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)番茄材料,本研究通过人工设计以TYLCV病毒基因V1、C1为靶标的双链RNA(dsRNA),通过农杆菌介导法转化番茄,探索RNAi技术在番茄抗TYLCV中的防御效果。结果表明,通过RNAi技术干扰TYLCV V1和C1基因可以延缓病毒症状的发生,提高番茄植株对TYLCV的抗性。田间试验结果发现,以TYLCV V1和C1为靶标的RNAi株系RNAi-CP-2和RNAi-Rep-12,不仅可以干扰病毒V1、C1的表达,而且可以干扰TYLCV其他4个基因V2、C2、C3和C4,表明RNAi技术可以在靶标基因附近传递,影响相邻其他基因的表达。本研究结果为番茄抗病毒研究奠定了理论基础。

抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)樱桃番茄新品种丽晶T2的选育

丽晶T2是以PHM12-11为母本,PDM12-3C2-9为父本配制而成的圆球形粉果樱桃番茄一代杂种,无限生长类型,中早熟,高抗番茄花叶病毒(ToMV),抗番茄黄化曲叶病毒(TY),果实硬度中上,不易裂果,单果质量20 g左右,可溶性固形物含量8.5%,果实粉亮,商品性好。秋冬茬栽培平均每667 m2产量6 800 kg,适合北方地区保护地秋延迟和秋冬茬栽培。