果型和抗性基因协同对番茄黄化曲叶病毒带毒量的影响

以12份番茄种质为试材,其具有2类果实大小和3种不同抗性基因,通过检测番茄黄化曲叶病毒病田间抗性和带毒量指标,探索果实大小、抗病基因与田间抗性、带毒量之间的关系。结果显示,在自然传毒情况下,所有番茄材料都能检测到病毒感染。在番茄定植后28 d,小果型番茄M8(I)、M5(I)、M3(I)、M7(I)、M9(I)和M11(HR)带毒量均较低,大果型番茄M6(S)、M10(S)、M4(S)和M2(S)带毒量均较高,且小果型番茄田间发病率明显低于大果型番茄。除了Ty-1/ty-1单基因抗性不受番茄果实大小影响外,携带其他单基因或聚合基因抗性的番茄种质均与果实大小有关。在此节点上,带毒量越高抗性越弱,带毒量越低抗性越强。总体来说,在遭受番茄黄化曲叶病毒侵染时,小果型番茄田间抗性强于大果型番茄。

冠菌素提高番茄对番茄黄化曲叶病毒抗性的分析

番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)在生产上是一种毁灭性病害,而目前针对该病害尚无有效的防治措施。冠菌素可在植物抗逆反应中发挥一定作用,然而冠菌素提高番茄对TYLCV抗性的研究还鲜有报道。为探究冠菌素提高番茄抗番茄黄化曲叶病的机制,以番茄感病品种浦粉一号为试验材料,在盆栽试验中,通过qPCR的方法来检测叶片中TYLCV病毒含量,分别采用氮蓝四唑还原法、愈创木酚比色法和紫外吸收法测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性,通过实时荧光定量PCR测定抗性相关基因表达量。在田间试验中,利用卷尺、游标卡尺等测定番茄植株叶片数、茎粗、开展度,并统计病情指数和植株发病率。结果表明,冠菌素处理显著降低TYLCV含量约83.5%(P<0.000 1),显著增加了POD、SOD的活性(P<0.0001、P<0.05),上调编码叶绿素a/b结合蛋白基因Cab-1A和Cab-1D,诱导番茄抗病信号通路上FLS2和PR-1a1上调表达。田间试验结果表明,冠菌素处理降低了植株平均病情指数和发病率,并显著增加了番茄植株的开展度(P<0.000 1)。综上所述,冠菌素可以降低番茄植株叶片中TYLCV含量,影响番茄抗氧化酶活性并增加抗性相关基因的表达量。研究结果可为冠菌素在番茄抗TYLCV过程中的应用提供理论依据。

番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)基因介导抗病性研究进展

番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)已经遍布世界各地,也是限制我国番茄主产区生产的主要因素,由于TYLCV易变异,常规育种单一基因抗性难以持久,本文总结了国内外利用TYLCV病毒来源基因(V1、C1等)介导抗性的研究,并且分析了其产生广谱抗性的原因。

优质串收抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)樱桃番茄新品种‘圣婴'的选育

‘圣婴'是以22-2-3-2-4-1为母本,M10-2为父本杂交选育而成的抗番茄黄化曲叶病毒的高档串收樱桃番茄品种。无限生长类型,早中熟,植株长势强,第一花序着生于第7—9节,花序间隔3—4叶,花序顺直美观,每花序小花数14—16个,果实近圆形,大小均匀,果实硬度好,单果重20—25 g,可溶性固形物含量8.0%,成熟果亮红色,着色均匀,口感佳,商品性好,串收性强,抗黄化曲叶病毒病和根结线虫,适宜保护地栽培。

中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCV-CHI)外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

经PCR获得了中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCV-CHI)外壳蛋白(CP)基因,并克隆到pGEM-7Zf(+)载体上.序列分析表明,TYLCV-CHI感染番茄或烟草时,CP基因的核苷酸序列发生变化,并且在烟草上随感染时间的延长,突变频率增高.连接到含有编码tRNAarg4基因argU的表达载体pSBET后,TYLCV-CHI CP基因在大肠杆菌中以包含体形式得到大量表达(约33 ku).以表达的蛋白作抗原免疫家兔,制备了抗TYLCV-CHI CP的抗血清.ELISA实验表明,该血清与抗原特异反应,血清效价为1:3000.Western印迹实验还表明,该血清除了与感染TYLCV-CHI的番茄、烟草有特异免疫反应外,还与感染南瓜曲叶病、烟草曲叶病的叶片有免疫反应,表明这些病毒之间有明显的血清学关系.

番茄黄化曲叶病毒病的发生与防控

随着番茄种植规模化发展,番茄黄化曲叶病毒病发生率逐渐提高,严重时会造成重大经济损失。该文总结了该病的病原特征、传播渠道与发生症状,阐述了农业防治、物理防治、生物防治、化学防治等防控措施,以期有效降低该病造成的损失,确保种植效益。

抗番茄黄化曲叶病毒病(TYLCVD)番茄品种奥美拉1618的选育

抗病品种的选育是防治番茄黄化曲叶病毒(TYLCVD)最经济有效的措施.奥美拉1618是以T12-041A为母本,以T12-055A为父本,通过常规杂交育种技术,并结合分子标记辅助技术选育的杂交一代番茄新品种.该品种具有丰产、果实商品性优良、综合抗性强的特点,同时可抗番茄黄化曲叶病毒病、灰叶斑、番茄花叶病毒(ToMV)、枯萎病,中抗冠状根腐,适宜在我国喜食红果而TYLCVD发生严重的地区种植,尤其是我国华南地区.

不同番茄品种对黄化曲叶病毒病抗性差异性初探

作者以9个番茄品种的实生苗和其嫁接苗为试验材料,开展了番茄黄化曲叶病毒病抗性差异比较试验。试验结果表明,苍南2821和倍盈对黄化曲叶病毒具有一定的抗性,尤其嫁接苗抗性更好,病株率分别为3.89%和11.67%、病情指数分别为2.41和4.56,病株率和病情指数均显著低于其他品种;此外,同一番茄品种嫁接苗的抗性普遍好于实生苗。因此,苍南2821和倍盈的嫁接苗可作为浙江兰溪地区秋茬番茄备选品种。

和田地区设施番茄抗黄化曲叶病毒病的比较试验

为筛选出和田地区设施番茄高抗黄化曲叶病毒病品种,为设施番茄黄化曲叶病毒病的防治及抗病品种的选择提供依据。结果表明,供试品种均发现不同程度的黄化曲叶病毒侵染,番茄品种间株高、茎粗和叶片数随着黄化曲叶病毒发病率和病情指数的增加而呈下降趋势。叶绿素相对含量(SPAD值)、叶片净光合速率(Pn)和产量以特美特36号最高,与优拉578和东风199差异不显著,但显著高于其他处理。品种戴安娜、优拉578、东风199、澳粉1号、芬娜和艾利斯相对抗病指数为0.86~0.99,为高抗品种。从抗病性、植株性状、叶片光合参数和产量等指标进行综合分析,以品种特美特36号、东风199和优拉578表现较好,可作为新疆和田地区设施秋茬番茄抗黄化曲叶病毒病首选品种。

GroEL基因抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的研究

利用烟粉虱体内GroEL基因,构建了具有抗生素标记的SUC2-GroEL和无抗生素标记的CaMV35S-PDRB10 2个植物表达载体。通过农杆菌介导法转化番茄,获得抗性再生苗。对抗性植株进行PCR、RT-PCR以及病毒检测。PCR检测结果表明:SUC2-GroEL载体和CaMV35S-PDRB10载体转化的阳性植株分别有11株和9株。RT-PCR检测结果显示:SUC2-GroEL载体和CaMV35S-PDRB10载体转化植株分别有6株和2株检测到GroEL基因特异条带,说明GroEL基因在转录水平得到表达。农杆菌病毒接种和带毒烟粉虱传毒检测结果显示,SUC2-GroEL载体转基因植株3、4和5号和CaMV35S-PDRB10载体转基因植株5号均未表现发病症状,证明利用GroEL基因抗番茄黄化曲叶病毒具有可行性,而且SUC2启动子诱导的GroEL抗性更加理想。

RNA干扰V1和C1提高番茄植株对番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的抗性

为了获得高抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)番茄材料,本研究通过人工设计以TYLCV病毒基因V1、C1为靶标的双链RNA(dsRNA),通过农杆菌介导法转化番茄,探索RNAi技术在番茄抗TYLCV中的防御效果。结果表明,通过RNAi技术干扰TYLCV V1和C1基因可以延缓病毒症状的发生,提高番茄植株对TYLCV的抗性。田间试验结果发现,以TYLCV V1和C1为靶标的RNAi株系RNAi-CP-2和RNAi-Rep-12,不仅可以干扰病毒V1、C1的表达,而且可以干扰TYLCV其他4个基因V2、C2、C3和C4,表明RNAi技术可以在靶标基因附近传递,影响相邻其他基因的表达。本研究结果为番茄抗病毒研究奠定了理论基础。

抗番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)樱桃番茄新品种丽晶T2的选育

丽晶T2是以PHM12-11为母本,PDM12-3C2-9为父本配制而成的圆球形粉果樱桃番茄一代杂种,无限生长类型,中早熟,高抗番茄花叶病毒(ToMV),抗番茄黄化曲叶病毒(TY),果实硬度中上,不易裂果,单果质量20 g左右,可溶性固形物含量8.5%,果实粉亮,商品性好。秋冬茬栽培平均每667 m2产量6 800 kg,适合北方地区保护地秋延迟和秋冬茬栽培。

高抗番茄黄化曲叶病毒病番茄新品种浙粉702的选育

高抗黄化曲叶病毒病番茄新品种浙粉702是以自育株系材料T7969F2-19-1-1-3为母本、T4078F2-3-3-3为父本,结合分子标记辅助技术选育的杂交一代粉红大果型番茄品种。母本T7969F2-19-1-1-3系从以色列引进的耐贮运番茄品种NEMOTAMMI(F1)与抗叶霉病粉红株系材料T9179杂交分离后代中,经连续9代单株选择而成。父本T4078F2-3-3-3系从荷兰引进的抗TYLCVD番茄品种奇诺亚(F1)与粉红株系材料T9178杂交分离后代中,经连续8代单株选择而成。该品种2011年通过浙江省非主要农作物认定委员会认定。通过对浙粉702的农艺学、产量、品质和抗病等性状鉴定,结果表明:浙粉702品质优良,早熟,丰产,高抗番茄黄化曲叶病毒病和枯萎病,抗叶霉病和番茄花叶病毒病,适合我国喜食粉果地区种植,平均产量可达73.83 t/hm2。

上海地区番茄黄化曲叶病毒病的鉴定及嫁接接种法研究

番茄黄化曲叶病毒（tomato yellow leaf curl virus，TYLCV）是一种由烟粉虱（Bemisia tabaei）和嫁接传播的双生病毒，在热带、亚热带地区给番茄生产造成严重威胁。根据番茄黄化曲叶病毒的保守序列设计一对引物，运用PCR技术从上海地区的感病番茄中扩增出一条575bp的特异带，而健康植株无此带。测序表明该序列与番茄黄化曲叶病毒具有极高的同源性（97％～99％）。将健康接穗嫁接到感染番茄黄化曲叶病毒的番茄砧木上，间隔15d和30d，分别提取接穗的DNA，并用PCR法检测病毒，发现嫁接15d后在部分接穗中检测到TYLCV病毒，嫁接30d后在所有的接穗中均检测到病毒，因此，嫁接法可以作为番茄黄化曲叶病毒病的接种鉴定方法。

天津地区番茄黄化曲叶病毒DNA-A的克隆和序列分析

对天津发生的番茄黄化曲叶病毒进行了分子鉴定,并对DNA-A的全基因组进行了序列分析。结果表明,天津分离物与国内山东、安徽、上海和浙江等地的分离物及亚洲(韩国、日本、约旦、以色列)和北美洲(美国、墨西哥)分离物的同源性为93%以上;与科摩洛、马达加斯加等非洲国家的同源性为80%。天津地区的分离物与广东G3分离物和广西的分离物不是同一病毒。编码AC2蛋白的开放阅读框有2处碱基发生突变,导致氨基酸90位E→G和104位H→Y。

番茄黄化曲叶病毒对番茄叶片光合特性和叶绿体超微结构的影响

以番茄为试验材料,研究番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)侵染对植株叶片叶绿素含量、净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度和叶绿体超微结构的影响.结果表明:TYLCV侵染番茄后,叶片叶绿素a、b以及总叶绿素含量分别下降50.2%、24.19%和43.84%,叶片净光合速率和气孔导度分别下降43.28%、27.07%,胞间CO2浓度增加13.04%.与健康叶片相比,叶绿体变形,叶绿体基质片层大部分消解,基粒结构消失,叶绿体外膜和内膜剥离,质壁分离和细胞膜内陷,细胞器消解.研究表明,TYLCV侵染破坏了番茄叶片的叶绿体结构,严重影响番茄叶片的光合作用.

河北省番茄黄化曲叶病毒病的分子鉴定初报

双生病毒是一类具有孪生颗粒形态的植物单链病毒，目前双生病毒病害已在多个国家和地区的作物上造成严重危害。近年来，我国多省报道作物上有这类病毒的发生，且有逐年加重和扩散的趋势。根据危害番茄的双生病毒DNA-A序列保守区设计简并引物，对2009年4月采自河北省魏县表现叶片黄化、曲叶症状的4个番茄样品进行PCR检测，均为双生病毒阳性，对样品的扩增片断进行了克隆测序，经序列比对分析，与番茄黄化曲叶病毒（Tomato leaf curl virus，TYLCV）山东分离物（FJ646611．1）序列相似性为99．25％～99．55％，说明河北番茄黄化曲叶病由TYLCV引起。