番茄LE-ACC_2合酶基因5′端前导序列分离方法的研究

通过ＰＣ／Ｇｅｎｅ软件对 Ｒｏｔｔｍａｎｎ等人发表的番茄 ＬＥ－ＡＣＣ２合酶的 ５’端 ２．０ Ｋｂ的前导序列作分析，设计了４对特异引物；以番茄果实、叶片的总ＤＮＡ为模板，采用特异ＰＣＲ扩增技术获得了 ２．０， １．８７， １．５８， １．２８ Ｋｂ ４个特异片段，用 Ｔ－Ｖｅｃｔｏｒ技术构建了１个克隆（２．０ Ｋｂ）、３个亚克隆（１．８７，１．５８，１．２８ Ｋｂ），对４个克隆产物进行了 ＤＮＡ序列测定，借助 ＰＣ／Ｇｅｎｅ软件对所获得的各克隆序列进行综合处理与分析，获得了番茄 ＬＥ－ＡＣＣ２ ５’端前导序列的同源率为９９．９％，但第－９７９位的 Ｃ和第－１０７６位的 Ｔ分别为 Ｔ和 Ｃ所替代。对利用 ＰＣＲ技术分离大片段ＤＮＡ的各环节作了较详细的研究。