番荔枝总内酯纳米混悬剂的制备及其体外抗肿瘤作用研究

目的制备番荔枝总内酯纳米混悬剂,并对其体外抗肿瘤作用进行研究。方法使用反溶剂沉淀法中的超声法制备番荔枝总内酯纳米混悬剂,考察其处方和制备工艺参数;动态光散射法测定其粒径和电位,透射电镜考察其粒径分布和形态;并对其人工胃肠液稳定性进行考察;采用MTT比色法比较番荔枝总内酯纳米混悬剂和溶液对HepG2细胞毒性差异。结果制备方法为将10 mg番荔枝总内酯与1 mg PGDA共溶于1 mL有机溶剂中,超声(250 W)快速注入到5 mL水中,减压旋转蒸发除去有机溶剂,调整总体积至5 mL。番荔枝总内酯纳米混悬剂平均粒径为(146.0±2.4)nm,多分散指数(PDI)为0.184±0.02,Zeta电位(26.0±2.0)mV,纳米混悬剂几乎呈类球型,粒径分布接近于正态分布,分布比较均匀;人工胃肠液内4 h稳定存在,粒径基本不发生变化;对HepG2细胞增殖均有一定的抑制作用,番荔枝总内酯纳米混悬剂组的细胞增殖抑制效果均优于溶液组。结论制备了以PGDA为载体的番荔枝总内酯纳米混悬剂,解决了药物的难溶和给药问题,为番荔枝总内酯的纳米剂型研究提供了参考。

番荔枝总内酯平衡溶解度和油水分配系数的测定

目的:测定番荔枝总内酯的平衡溶解度以及表观油水分配系数,为体内吸收和设计其新剂型提供参考。方法:采用饱和法和超声振荡法分别测定番荔枝总内酯在不同溶剂中的平衡溶解度以及在正辛醇-水/缓冲溶液中的表观油水分配系数,采用比色法测定番荔枝总内酯的含量。结果:番荔枝总内酯在水和石油醚中的溶解度分别为0.06g·L-1和1.27g·L-1,其在乙醚中的溶解度最高,为482.28g·L-1;超声振荡80min后P值达到平衡,25℃下番荔枝总内酯的表观正辛醇/水分配系数P为54.91(logP=1.74),在pH 6.8的缓冲溶液中的表观分配系数最大为32.03(logP=1.51)。结论:番荔枝总内酯易溶于常用的有机溶剂,在中等极性溶剂的溶解度较大;平衡方法、平衡时间及pH对油水分配系数都有一定的影响。

番荔枝总内酯的急性毒性和蓄积毒性评价

目的观察番荔枝总内酯的急性毒性和蓄积毒性反应,探讨其对小鼠主要器官的损害。方法急性毒性实验:昆明种小鼠60只分成6组,每组10只,给药组分别予剂量为120、150、187.5、234.4和293 mg·kg^(-1)的番荔枝总内酯灌胃,对照组予豆油灌胃,采用Bliss法计算半数致死量(LD_(50))。蓄积毒性实验:昆明种小鼠40只,分为给药组(30只)和对照组(10只),给药组以4 d为一期,连续给药。第一期给药剂量为0.1倍LD_(50),以后各期给药剂量顺次按1.5倍递增,直至给药组小鼠合计死亡数达到总数一半,对照组予豆油灌胃。实验过程中观察小鼠的一般生理情况,实验结束后,检测血清中的丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)的水平,观察心、肝、脾、肺、肾、胸腺和胃各脏器组织的病理学变化来探讨番荔枝总内酯的毒性靶器官。结果番荔枝总内酯单次灌胃小鼠的LD_(50)为176.9 mg·kg^(-1)(8.5 g·kg^(-1)生药量)。番荔枝总内酯持续给药可引起小鼠摄食量减少,体重下降,同时导致血清中AST、ALT和BUN水平升高,与对照组比较差异显著(P<0.05或P<0.01);肝细胞和肾细胞出现水肿,细胞体积增大,胞浆疏松淡染,其中肾小囊腔见红染的渗出物,肾小球体积减小。结论番荔枝总内酯在小鼠体内具有中等蓄积性毒性,肝脏和肾脏为主要的毒性靶器官。

番荔枝子不同部位提取物总内酯含量及其急性毒性比较

目的:测定番荔枝子的醇提物与石油醚萃取物总内酯含量;观察番荔枝子醇提物及其石油醚萃取物的急性毒性,评价其安全性。方法:渗漉法制备番荔枝子醇提物,并从醇提物中萃取得到石油醚部位,对醇提物及石油醚萃取物同时进行急性毒性试验,比较LD50值。同时,测定醇提物及石油醚萃取物的番荔枝总内酯含量。结果:番荔枝子醇提物的LD50值为(1.04±0.18)g.kg-1[折合成生药量为(4.34±0.75)g.kg-1],石油醚萃取物LD50值为(2.53±0.39)g.kg-1[折合成生药量为(14.10±2.17)g.kg-1],而醇提物的番荔枝总内酯含量为12.00%,石油醚萃取物的番荔枝总内酯含量为9.84%,且石油醚中番荔枝总内酯量占整个醇提物中总内酯量的61.36%。结论:番荔枝子石油醚萃取物中含低极性番荔枝内酯较多,其毒性也降低。