番荔枝总内酯纳米混悬剂的制备及其体外抗肿瘤作用研究

目的制备番荔枝总内酯纳米混悬剂,并对其体外抗肿瘤作用进行研究。方法使用反溶剂沉淀法中的超声法制备番荔枝总内酯纳米混悬剂,考察其处方和制备工艺参数;动态光散射法测定其粒径和电位,透射电镜考察其粒径分布和形态;并对其人工胃肠液稳定性进行考察;采用MTT比色法比较番荔枝总内酯纳米混悬剂和溶液对HepG2细胞毒性差异。结果制备方法为将10 mg番荔枝总内酯与1 mg PGDA共溶于1 mL有机溶剂中,超声(250 W)快速注入到5 mL水中,减压旋转蒸发除去有机溶剂,调整总体积至5 mL。番荔枝总内酯纳米混悬剂平均粒径为(146.0±2.4)nm,多分散指数(PDI)为0.184±0.02,Zeta电位(26.0±2.0)mV,纳米混悬剂几乎呈类球型,粒径分布接近于正态分布,分布比较均匀;人工胃肠液内4 h稳定存在,粒径基本不发生变化;对HepG2细胞增殖均有一定的抑制作用,番荔枝总内酯纳米混悬剂组的细胞增殖抑制效果均优于溶液组。结论制备了以PGDA为载体的番荔枝总内酯纳米混悬剂,解决了药物的难溶和给药问题,为番荔枝总内酯的纳米剂型研究提供了参考。

以泊洛沙姆188为稳定剂的番荔枝内酯纳米混悬剂的制备及其体内外研究

番荔枝内酯(annonaceous acetogenins,ACGs)是从番荔枝科番荔枝的种子中提取分离得到的有效部位,对多种肿瘤细胞具有良好的抗肿瘤活性。但溶解度差,毒副作用大,限制了其临床应用。本研究选择泊洛沙姆(Poloshamer-188,P188)作为药物载体,用反溶剂沉淀法制备ACGs纳米混悬剂(ACGs nanosuspensions,ACGs-NSps);动态光散射测量粒径;透射电镜考察形态;高效液相考察载药量和体外药物释放,并对ACGs-NSps的放置稳定性、在不同介质中的粒径变化、溶血性、冻干复溶等进行研究;用MTT法考察纳米混悬剂对肿瘤细胞的生长抑制情况,4T1荷瘤小鼠模型考察其体内抗肿瘤效果。结果表明,ACGs-NSps呈球形,平均粒径169.4±1.25 nm,多分散指数(polydispersity index, PDI)值为0.130±0.020, zeta电位-19.8 mV,载药量为48.18%,室温放置15天粒径未见显著变化,可以用0.5%葡萄糖和2%P188为联合保护剂进行冻干, 144 h缓慢释放累积达80.82%。纳米混悬剂在各生理介质可稳定存在,不溶血,既能口服也能静脉注射给药。体外细胞毒性实验中,与ACGs溶液相比, ACGs-NSps对多种肿瘤细胞的生长抑制作用(IC_(50)值)均显著优于ACGs溶液(4T1:0.892±0.124μg·mL^(-1)和2.495±0.108μg·mL^(-1),P <0.05;HeLa:0.747±0.051μg·mL^(-1)和2.204±0.064μg·mL^(-1),P <0.01;HepG2:2.265±0.081μg·mL^(-1)和4.159±0.071μg·mL^(-1),P <0.01;MCF-7:0.473±0.024μg·mL^(-1)和1.196±0.022μg·mL^(-1), P <0.05)。体内研究表明, ACGs-NSps每天口服给药(3 mg·kg^(-1))抑瘤率(67.23%)优于同剂量油溶液的抑瘤率(53.11%),与隔天静脉注射0.5 mg·mL^(-1)ACGs-NSps的抑瘤率(70.34%)相当。纳米混悬剂的制备,有效解决了ACGs的溶解性和给药问题。P188是FDA批准的静脉注射辅料,以P188为稳定剂的ACGs纳米粒,有望成为可在临床上应用的抗肿瘤药物。