肾肿瘤剜除术对局限性肾癌病人肾功能、肾实质及畸胎瘤衍生生长因子-1的影响

目的探讨肾肿瘤剜除术对局限性肾癌病人肾功能、肾实质及畸胎瘤衍生生长因子-1(Cripto-1)的影响。方法2016年2月~2021年6月我院确诊并进行治疗的局限性肾癌病人100例,根据治疗方法不同将病人分为研究组(60例)和对照组(40例)。研究组采用腹腔镜肾肿瘤剜除术,对照组采用开放肾部分切除术。记录两组病人手术时间、肾动脉阻断及住院时间、术中出血量,比较两组病人手术前后肾功能、肾实质与血清Cripto-1水平。结果研究组病人术中出血量(89.65±20.22)ml,住院时间(8.25±2.25)天,对照组分别为(126.69±25.63)ml和(11.40±3.52)天,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。术后3个月研究组肾小球滤过率(GFR)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平分别为(85.24±2.25)ml/min、(10.47±2.14)mmol/L、(80.65±10.28)μmol/L,对照组分别为(118.65±3.20)ml/min、(13.41±2.25)mmol/L、(97.45±11.25)μmol/L,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。术后研究组肾实质体积丢失值积(9.86±2.20)cm^(3),低于对照组的(15.96±3.25)cm^(3),差异有统计学意义(P<0.05)。术后3个月,研究组血清Cripto-1水平(1.01±0.55)ng/ml,低于对照组的(2.55±0.85)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肾肿瘤剜除术能有效减少局限性肾癌病人术中出血量,缩短住院时间,降低病人血清Cripto-1水平,同时保留更多的正常肾实质,改善肾功能。

小干扰RNA下调畸胎瘤衍生生长因子-1基因表达对黑素瘤细胞黏附、侵袭和尿激酶纤溶酶原激活物的影响

目的观察畸胎瘤衍生生长因子-1（TDGF-1）基因小干扰RNA对黑素瘤细胞黏附和侵袭的影响。方法培养人黑素瘤A-375、C-918及M14细胞株，以实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）方法检测TDGF—1基因mRNA水平，筛选出TDGF-1表达最高者。采用TDGF-1基因小干扰RNA（siRNA）转染黑素瘤细胞株，分别以FQ—PCR和免疫荧光方法观察TDGF-1基因mRNA和蛋白水平，然后以噻唑蓝（MMT）法检测细胞黏附，以Boyden方法检测癌细胞侵袭力。结果FQ-PCR方法显示，A-375、C-918及M14细胞株TDGF-1 mRNA水平分别为0．589±0．081、0．712±0．065、1．517±0．085；以TDGF-1 siRNA转染黑素瘤M14细胞后，癌细胞TDGF-1基因mRNA和蛋白表达明显下降，且呈浓度依赖性（P〈0．01）；细胞黏附结果显示，Con-A、Con—B、3．125nmol／L、6．250nmol／L和12．500nmol/L组吸光度A值分别为0．89±0．15、0．85±0．12、0．62±0．09、0．51±0．08、0．33±0．06。Boyden小室试验结果显示，Con-A、Con-B、3．125nmol／L、6．250nmol／L和12．500nmol／L组穿膜细胞数分别为（37．8±1．6）、（36．9±1．5）、（21．8±1．2）、（11．6±0．8）和（5．6±0．5）个。酶联免疫吸附试验（ELISA）结果显示，Con—A、Con-B、3．125nmol／L、6．250nmol／L和12．500nmol／L组尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）含量分别为（85．2±1．8）、（84．8±1．5）、（51．6±1．2）、（35．6±0．8）、（17．8±0．6）ng／L。结论TDGF-1基因在黑素瘤细胞黏附和侵袭中发挥着重要作用；以siRNA转染黑素瘤细胞，可抑制黑素瘤细胞黏附和侵袭能力，抑制uPA是其重要机制之一。

沉默畸胎瘤衍生生长因子-1基因对胰腺癌细胞株PANC1侵袭力的影响

目的 探讨TDGF-1基因沉默对胰腺癌细胞株PANC1侵袭力的影响.方法 设计并合成3个（S1、S2、S3）靶向TDGF-1基因的小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）,筛选出沉默效果最好的siRNA.以该siRNA的不同浓度（3.125、6.25、12.5 nmol/L）转染PANC1细胞,并设对照组和脂质体组.采用实时定量PCR和Western blotting检测TDGF-1 mRNA和蛋白表达,以软琼脂集落培养试验和Boyden小室检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力,并将转染48 h的细胞接种裸鼠,观察癌细胞的体内侵袭.结果 siRNA转染组细胞的TDGF-1 mRNA和蛋白表达水平呈浓度和时间依赖性下降,且较脂质体组明显降低（P值均＜0.01）.对照组细胞集落形成数和穿膜细胞数分别为19.8±2.2和49.8±2.6;siRNA组呈浓度依赖性明显减少,12.5 nmol/L转染组分别为5.6±1.2和8.1±1.1.对照组、脂质体组和12.5 nmol/L转染组接种4周后裸鼠种植瘤体积分别为（2.228±0.026）cm3、（2.186±0.028）cm3和（0.728±0.023）cm3.对照组和脂质体组种植瘤侵犯周围肌层组织,转染细胞组未见侵犯.结论 采用RNA干扰技术沉默PANC 1细胞的TDGF-1基因表达可抑制癌细胞的侵袭力.

急性白血病患者骨髓细胞畸胎瘤衍生生长因子-1及CD34的表达

目的:检测畸胎瘤衍生生长因子-1(Cripto-1)及CD34抗原在白血病(AL)患者骨髓细胞的表达情况。方法:应用流式细胞术检测63例初治AL患者[其中急性髓系白血病(AML)49例,急性淋巴细胞白血病(ALL)14例]及16例对照人群骨髓细胞中Cripto-1及CD34抗原的表达。结果:Cripto-1在AL患者及正常对照组的阳性表达率分别为26.98%和0(P=0.007),CD34的阳性表达率分别为60.32%和0(P<0.001)。ALL患者中未检测到Crip-to-1的表达,AML患者中Cripto-1及CD34的表达具有关联性(χ2=9.095,rP=0.396,P=0.003)。结论:AL患者Cripto-1及CD34表达升高。Cripto-1/CD34共同高表达是AL的一个不良预后因素。

沉默畸胎瘤衍生生长因子-1基因表达对前列腺癌细胞迁移能力的影响

目的探讨小干扰RNA（siRNA）沉默畸胎瘤衍生生长因子-1（TDGF-1）基因对人前列腺癌细胞PC3迁移的影响及机制。方法通过Silintfect分别将阴性对照siRNA、TDGF-1 siRNA转染到PC3细胞，空白（Blank）组无需特殊处理。分别纯化各组所提取的总RNA和蛋白；运用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法检测TDGF-1 mRNA和蛋白表达变化、Western blot法测上皮-间充质转化（EMT）相关标志物蛋白：波形蛋白（Vimentin）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）的表达变化。Transwell观察细胞迁移能力的变化。结果与阴性对照（0.988±0.011）、空白组（1.000±0.000）比较，实验干扰组（0.250±0.046）的TDGF-1 mRNA相对表达量明显降低（P＝0.007，P＝0.006）。干扰组的TDGF-1、N-cadherin、Vimentin蛋白的表达量较阴性对照、空白组明显降低，E-cadherin蛋白则显著升高。Transwell实验结果示实验组[（84.667±7.572）个]细胞的迁移能力较空白组[（174.333±10.017）个]、阴性对照组[（168.333±4.041）个]明显减弱（P＝0.022，P＝0.025）。结论下调TDGF-1基因的表达能够减弱细胞的迁移能力，其机制可能与EMT有关。

大肠癌患者血清畸胎瘤衍生生长因子1临床检测意义

目的:探讨检测大肠癌患者血清畸胎瘤衍生生长因子1(teratocarcinoma-derived growth factor1,TDGF1)水平的临床意义。方法:应用sandwich-酶联免疫吸附法(ELISA)技术检测39例大肠癌患者和36例健康者血清中TDGF1含量。结果:大肠癌患者血清TDGF1水平明显高于对照组(P<0.0001);大肠癌患者血清TDGF1含量和患者的年龄、性别及组织病理分化程度无关,而与淋巴结转移、肝转移和Duke′s分期密切相关。结论:血清TDGF 1有可能成为一个新的肿瘤标志物而用于评价大肠癌进展的指标。

畸胎瘤衍生生长因子1在胰腺癌中的表达及其预后价值

目的研究畸胎瘤衍生生长因子1(Cripto-1)在胰腺癌中的表达情况,明确Cripto-1表达水平的临床意义。方法以免疫组织化学染色的方法检测正常胰腺组织、胰腺癌及相应癌旁组织、慢性胰腺炎等相关组织中Cripto-1的表达水平,探讨胰腺癌组织中Cripto-1表达水平与临床病理参数之间的关系及预后价值。结果Cripto-1在慢性胰腺炎、胰腺癌组织及其转移灶中的表达水平显著高于正常胰腺组织(P=0.019,P=0.025,P=0.018)。Cripto-1在低分化胰腺癌组织中高表达。Cripto-1高表达的胰腺癌患者生存期短于Cripto-1低表达的患者(8个月比16个月,χ^(2)=4.787,P=0.029),但多因素分析提示Cripto-1表达水平与胰腺癌患者预后无相关性(HR=1.341,95%CI=0.800~2.248,P=0.266)。结论Cripto-1可能在胰腺癌的早期发生和发展过程中发挥重要作用,Cripto-1表达水平可能对胰腺癌患者预后有一定指导意义。

胰岛素样生长因子-1对胶质瘤C6细胞垂体瘤转化基因的影响

目的:探讨胰岛素样生长因子-1(Insulin-like-growth factor-1,IGF-1)在体外对胶质瘤C6细胞垂体瘤转化基因(pituitary tumor transforming gene,PTTG)表达的影响。方法:体外培养胶质瘤C6细胞,给与不同浓度的IGF-1(0.1、1.0、10.0ng/ml)作用24h后半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测PTTG mRNA,Western blot检测PTTG蛋白表达。结果:不同浓度IGF-1作用后C6细胞PTTGmRNA表达与蛋白水平均增高,差异有统计学意义(P<0.01),且随着浓度的增加,其升高越明显。结论:IGF-1可以上调PTTG的表达,并剂量依赖性。

肺癌患者血清畸胎瘤衍生生长因子、VEGF和TK1水平及临床意义

目的探讨血清畸胎瘤细胞衍生生长因子(PCDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)及细胞质胸苷激酶1(TK1)与肺癌临床病理参数的相关性,判断其在肺癌联合诊断中的价值。方法用ELISA法检测123例肺癌患者、60例肺良性疾病患者和61例体检健康者血清PCDGF、VEGF的含量;酶免疫点印迹化学发光法检测标本中TK1的含量。结果肺癌组血清PCDGF、VEGF、TK1含量分别为18.27(6.24,58.86)ng/mL、1072.73(272.42,2 686.46)ng/mL和1.59(0.21,8.21)pmol/L,均显著高于肺良性疾病组及健康对照组(Z分别为81.349、85.769和18.818,P均<0.05)。血清PCDGF含量与肿瘤分期、淋巴结转移均有统计学意义(Z分别为8.063、2.488,P均<0.05)。VEGF含量对区分不同组织学类型肺癌具有统计学意义(Z=6.634,P<0.05)。经直线相关性分析表明,血清PCDGF与VEGF含量间无相关性(r=0.017,P=0.786)。PCDGF诊断肺癌的敏感性为83.7%,三项联合检测的敏感性最高为95.9%,TK1的特异性最高为90.7%,而三项指标的准确性均较低。结论PCDGF、VEGF、TK1含量在肺癌患者血清中显著增高。PCDGF与肺癌分期、淋巴结转移相关,有望作为肺癌诊断及恶性程度评价的潜在血清标志物。

结肠腺癌组织中Cripto-1蛋白和锌指转录因子Snail与基质金属蛋白酶-9的表达及临床意义

目的研究结肠腺癌组织中畸胎瘤衍生生长因子-1(Cripto-1)、锌指转录因子(Snail)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况及临床病理特征。方法回顾性分析2020年1月至2021年8月于韶关市粤北人民医院胃肠外科92例行手术切除结肠腺癌患者的临床资料,手术切除标本92个。另选取癌旁不典型增生组织56例和正常结肠组织35例作为对照。采用免疫组化检测并比较Cripto-1、Snail和MMP-9在结肠腺癌组织、不典型增生和正常结肠黏膜组织中的表达情况,采用Spearman相关分析Cripto-1、Snail和MMP-9与结肠腺癌临床病理特征的相关性。结果结肠腺癌、不典型增生、正常结肠组织的CR-1、Snail和MMP-9阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05);结肠腺癌及不典型增生组织中CR-1、Snail和MMP-9阳性率均高于正常结肠组织,结肠腺癌组织中Snail和MMP-9阳性率均高于不典型增生组织,差异均有统计学意义(P<0.05);结肠腺癌组织与不典型增生组织中CR-1阳性率比较差异无统计学意义。肿瘤的浸润深度、临床TNM分期及淋巴结转移情况不同的患者Cripto-1、Snail和MMP-9在结肠腺癌组织中的表达阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤浸润T3~T4、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移的患者结肠腺癌组织中CR-l、Snail和MMP-9的表达阳性率均高于肿瘤浸润T1~T2、临床分期Ⅰ~Ⅱ期和无淋巴结转移的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结肠腺癌组织中CR-1表达与Snail和MMP-9的表达呈正相关(r>0,P<0.05),MMP-9表达与Snail表达亦呈正相关(r>0,P<0.05)。结论Cripto-1、Snail和MMP-9在结肠癌的浸润和转移中起协同调节作用。

肿瘤转移相关基因-1和血管内皮生长因子在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的探讨肿瘤转移相关基因-1(MTA-1)和血管内皮生长因子(VEGF)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学法检测2010年1月1日至2015年5月31日收治的43例DLBCL和20例淋巴结反应性增生患者组织中MTA-1和VEGF蛋白的表达情况。分析MTA-1和VEGF表达蛋白之间及其与DLBCL临床病理特征间的相关性。结果 MTA-1在DLBCL组织中的阳性表达率为69.8%(30/43),高于淋巴结反应性增生患者组织中35.0%(7/20),差异有统计学意义(χ2=6.808,P=0.009)。VEGF在DLBCL组织中的阳性表达率为46.5%(20/43),高于淋巴结反应性增生患者组织中20.0%(4/20),差异有统计学意义(χ2=4.069,P=0.039)。DLBCL组织中MTA-1和VEGF表达水平与LDH、分期、IPI评分有关(P<0.05)。DLBCL组织中MTA-1与VEGF表达水平呈正相关(r=0.411,P=0.018)。结论 DLBCL组织中MTA-1和VEGF的高表达与DLBCL的发生发展有关,两者可能起协同作用。

胶质瘤中间质细胞衍生因子-1及神经生长因子的表达及临床意义

目的探讨间质细胞衍生因子-1(SDF-1)及神经生长因子(NGF)在胶质瘤中的表达及临床意义。方法收集手术切除的人脑胶质瘤病理标本86例为观察组,其中观察组按不同病理级别分为Ⅰ级15例为Ⅰ组,Ⅱ级24例为Ⅱ组,Ⅲ级26例为Ⅲ组,Ⅳ级21例为Ⅳ组,同期随机选择颅脑外伤患者正常脑组织标本84例为对照组,2组组织均使用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测SDF-1与NGF mRNA,同时采用免疫组化法检测2组组织中SDF-1与NGF蛋白的表达情况。比较2组组织中SDF-1与NGF mRNA及蛋白表达情况。结果观察组SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率均高于对照组(P<0.05);Ⅳ组SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率均高于Ⅲ组;Ⅲ组SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率均高于Ⅱ组;Ⅱ组SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率均高于Ⅰ组,胶质瘤组织中SDF-1与NGF mRNA基因表达量及蛋白阳性率随病理级别的增高而增高(P<0.05);胶质瘤组织中SDF-1 mRNA表达量及蛋白阳性率呈正相关(r=0.95,P<0.05),NGF mRNA表达量及蛋白阳性率呈正相关(r=0.96,P<0.05);SDF-1和NGF高表达均是预测胶质瘤预后不良的独立因素(P<0.01),SDF-1和NGF的高表达与胶质瘤患者整体不良预后显著相关。结论胶质瘤中SDF-1与NGF高表达对病变进展有一定促进作用,二者与肿瘤的病理级别密切相关,两者相互作用,SDF-1与NGF在胶质瘤的发生发展中扮演重要的角色,有望为胶质瘤的临床检测及治疗提供新思路。

丹参离子导入对糖尿病视网膜病变全视网膜光凝术患者的应用效果及对血管内皮生长因子、基质细胞衍生因子-1表达的影响

目的:探讨丹参离子导入对糖尿病视网膜病变全视网膜光凝术患者的应用效果及对血清血管内皮生长因子(VEGF)和基质细胞衍生因子-1(SDF-1)表达的影响。方法:选取60例糖尿病视网膜病变患者,随机分为对照组和观察组,每组30例。两组患者均行全视网膜光凝术治疗,对照组采用0.9%氯化钠注射液导入,观察组采用丹参离子导入,均连续治疗3d。比较两组患者术前1d、术后4周时的出血灶面积、微血管瘤个数及血清血管内皮生长因子(VEGF)和基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的表达水平,记录两组患者并发症发生率,评估临床疗效。结果:观察组总有效率为83.3%(25/30),高于对照组的60.0%(18/30),差异有统计学意义(P<0.05)。术后4周时,两组患者出血灶面积均较术前1d缩小(P<0.05),且观察组小于对照组(P<0.05);两组患者微血管瘤个数均较术前1d减少(P<0.05),且观察组少于对照组(P<0.05);两组患者血清VEGF、SDF-1水平均较术前1d降低(P<0.05),且观察组均低于对照组(P<0.05)。观察组并发症发生率为6.7%(2/30),低于对照组的20.0%(6/30),但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:丹参离子导入可降低糖尿病视网膜病变全视网膜光凝术患者VEGF和SDF-1的表达,改善其临床症状,减少并发症发生。

胃肠道间质瘤中血小板衍生生长因子受体-α的表达及其临床意义

目的探讨血小板衍生生长因子受体-α(PDGFR-α)在胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromaltumors,GIST)中的表达,分析其与胃肠道间质瘤临床病理特征的关系。方法收集河北医科大学第四医院病理科1992—2002年收治的胃肠道间叶源性肿瘤手术切除患者169例,经复查存档切片及病理诊断无误后,再选取相应的存档蜡块,用免疫组织化学法确诊为消化道间质瘤113例,采用免疫组织化学法检测其PDGFR-α、PDGFR-β及CD117的表达情况,并与56例非胃肠道间质瘤患者进行对照研究。结果113例胃肠道间质瘤中PDGFR-α表达阳性者73例,表达阳性率为64.60%,胃肠道间质瘤和非胃肠道间质瘤患者PDGFR-α、CD117的表达阳性率间差异有统计学意义(P<0.05);极低危险性、低度危险性、中度危险性和高度危险性患者的PDGFR-α、PDGFR-β及CD117的表达阳性率间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论PDGFR-α联合CD117对胃肠道间质瘤,特别是对一些CD117表达阴性的胃肠道间质瘤的诊断及鉴别诊断具有重要的临床意义,但其不能作为胃肠道间质瘤分化程度的评定指标。

肺癌表皮生长因子受体基因突变与间变性淋巴瘤激酶及原癌基因1-受体酪氨酸激酶基因融合突变情况与临床病理特征的关系

目的分析肺癌表皮生长因子受体(EGFR)基因突变、间变性淋巴瘤激酶(ALK)及原癌基因1-受体酪氨酸激酶(ROS1)基因融合突变情况与临床病理特征的相关性。方法选取2019年1月至2021年1月本院收治的100例肺癌患者为研究对象,采用突变扩增系统(ARMS)检测EGFR基因突变与ALK及ROS1基因融合突变表达情况,分析EGFR、ALK、ROS1基因融合突变与临床病理特征的关系。结果EGFR基因突变型61例,野生型39例,ALK基因融合阳性率10.00%,ROSI基因融合阳性率10.00%。突变型腺癌与腺鳞癌构成比均小于野生型,差异有统计学意义(P<0.05);两种分型患者年龄比较差异无统计学意义。ALK基因融合检测阳性10例,阴性患者90例,两种分型性别与年龄比较差异无统计学意义;其中阳性患者以腺鳞癌为主,阴性患者以腺癌为主,差异有统计学意义(P<0.05)。ROS1基因融合阳性与阴性患者性别比较差异有统计学意义(P<0.05);两种分型患者年龄、病理类型比较差异无统计学意义。结论肺癌患者EGFR基因突变发生率较高,且以腺癌类型患者为主,ALK与ROS1基因融合突变不常见,但能提示肺癌特点分子亚型。

血小板衍生生长因子受体-β信号促进突变型p53介导MDA-MB-231细胞阿霉素耐药

目的探讨血小板衍生生长因子受体-β(platelet-derived growth factor receptor-beta,PDGFR-β)信号与三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞阿霉素耐药的关系及机制。方法采用流式细胞术、MTS法检测PDGF-DD(PDGFR-β特异性配体)对阿霉素所致的细胞G_2期阻滞、细胞凋亡及死亡情况的影响;qPCR和Western blot检测突变型p53、cdk1、PDGFR-β、p21、bax、hsp90及TopBP1表达水平,以研究PDGF-DD、Wortmannin(PI3K抑制剂)对突变型p53及其功能的影响;利用siRNA干扰技术、qPCR探讨突变型p53、PDGF-DD和耐药相关基因表达的关系。结果 PDGF-DD明显提高阿霉素条件下细胞存活率、降低细胞凋亡率、一定程度改善细胞G_2期阻滞,显著提高突变型p53蛋白水平并改变其下游基因cdk1、PDGFR-β、p21、bax表达,但突变型p53 mRNA变化差异不具统计学意义(P>0.05)。PDGF-DD显著上调hsp90(突变型p53蛋白稳定因子)和TopBP1(突变型p53功能促进蛋白)mRNA和蛋白水平,Wortmannin处理后表达明显下降。PDGF-DD明显提高耐药相关基因FOXC2、twist、snail、nanog、oct4mRNA水平,p53 siRNA处理后mRNA表达显著下降。结论 PDGF-DD/PDGFR-β信号能诱导MDAMB-231细胞发生阿霉素耐药,通过PI3K途径转录水平上调hsp90和TopBP1表达、稳定并促进突变型p53介导细胞耐药是其重要机制之一。

GLI-1参与表皮生长因子介导的前列腺癌ARCaP_E细胞体外侵袭活性强化的实验研究

目的:探讨Hedgehog(HH)信号通路效应蛋白GLI-1在表皮生长因子(EGF)介导的人前列腺癌AR-CaPE细胞系体外侵袭活性增强中的作用。方法:以人前列腺癌ARCaP细胞系作为研究模型,免疫荧光技术鉴定ARCaPE内EGF受体(EGFR)和GLI-1的表达情况;100 ng/ml EGF体外作用于ARCaPE后,观察细胞的形态及体外侵袭能力的变化,采用Western印迹检测细胞内ERK信号通路成分和GLI-1蛋白的表达变化情况;Transwell侵袭实验检测EGF(100 ng/ml)与GLI-1拮抗剂GANT61(10μmol/L)单独或联合作用对ARCaPE细胞体外侵袭能力的影响。结果:ARCaPE细胞同时表达EGFR与GLI-1蛋白;EGF诱导上皮样外观的ARCaPE细胞向间质样外观的AR-CaPM转化,增强ARCaPE细胞的体外侵袭能力并显著上调细胞内p-ERK和GLI-1蛋白的表达水平(P<0.05);GANT61明显抑制ARCaPE细胞的体外侵袭能力且减弱EGF对细胞侵袭能力的增强效应(P<0.05)。结论:HH信号通路和EGF/ERK信号通路之间存在一定的相互作用,GLI-1可能在EGF介导的人前列腺癌ARCaPE细胞体外侵袭活性增强过程中发挥着重要作用。

靶向IGF-1基因的siRNA抑制胶质瘤生长的体内外实验研究

目的观察靶向IGF-1基因的小干扰RNA（siRNA）在体内和体外对胶质瘤生长的抑制作用。方法采用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）和Western印迹测定干扰后IGF-1的表达水平；采用Transwell体外侵袭试验进行细胞体外的侵袭力分析；用流式细胞仪检测细胞凋亡率；应用裸鼠成瘤实验测定IGF-1基因表达下调后胶质瘤C6细胞在体内致瘤能力的改变。结果靶向IGF-1基因的siRNA可以有效抑制IGF-1基因的表达，使IGF—1 mRNA表达减少50％～80％，蛋白表达减少60％，流式细胞术检测细胞凋亡率明显提高（P〈0．01），降低了在裸鼠体内成瘤的能力。结论siRNA介导的IGF-1基因下调可明显抑制胶质瘤细胞的生长。IGF-1可以作为胶质瘤基因治疗的一个新的靶点。

TDGF-1基因下调对人鼻咽癌细胞生长迁移侵袭的影响

目的探讨TDGF-1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人鼻咽癌细胞迁移侵袭的影响。方法根据TDGF-1基因序列特点设计了siRNA,转染人鼻咽癌CNE-2细胞,分别采用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测TDGF-1基因的mRNA和蛋白水平,以软琼脂集落形成试验观察癌细胞锚着不依赖性增殖能力,以划痕试验方法评测癌细胞的迁移能力;用Boyden模型观察癌细胞侵袭能力。结果 TDGF-1基因siRNA转染组TDGF-1 mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性(均P<0.001)。体外试验发现,TDGF-1 siRNA转染可有效抑制鼻咽癌细胞集落生长、侵袭和迁移能力,且与浓度相关(均P<0.005)。结论 TDGF-1在鼻咽癌细胞生长、迁移、侵袭中起着重要的作用;采用TDGF-1 siRNA转染可抑制鼻咽癌细胞侵袭。

靶向胰岛素样生长因子受体的RNA干扰技术抑制胶质瘤生长

目的研究靶向胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)的小干扰RNA(siRNA)对胶质瘤生长的抑制作用。方法逆转录-聚合酶链反应和W estern b lot测定RNA干扰后IGF-1R表达水平;采用Transwell体外侵袭实验进行细胞体外的侵袭力分析;流式细胞仪检测细胞凋亡率;裸鼠成瘤实验测定IGF-1R基因表达下调后胶质瘤C6细胞在体内致瘤能力的改变。结果靶向IGF-1R基因的siRNA可以有效抑制IGF-1R基因的表达,使IGF-1R mRNA表达减少60%,蛋白表达减少50%;流式细胞术检测到细胞凋亡率明显升高(P<0.01);裸鼠体内成瘤能力降低。结论siRNA介导的IGF-1R基因下调能明显抑制胶质瘤细胞生长。