疏水作用柱层析技术纯化HBsAg条件的筛选

在应用流水作用柱层析纯化HBsAg中，对流水介质的功能基类型、交联密度、盐的浓度、操作温度等决定疏水性强弱的因素作了比较研究。结果表明，应用以C4为功能基的Butyl—Sepharose（6～8μmol／ml）和以C3为功能基的Propyl－Sepharose（20～22μmol／ml）疏水介质、8％（NH4）2SO4，18～24℃等条件纯化HBsAg时结果较理想。

三元配合物Zn(L-tyr)(Aa)分子内配体间疏水作用

应用pH电位滴定法研究了三元配合物Zn(L tyr)(Aa)[L tyr(酪氨酸根),Aa =L val(缬氨酸根),L php(苯丙氨酸根)],L trp(色氨酸根)]在水和x=0 20、0 40及0 60二氧六环 水混合溶剂中的稳定性[t=25℃,I=0 1mol/LNaClO4]。三元配合物相对稳定性用δK=ΔlogK[=logβZnZn(L tyr)-logKZnZn(Aa)]-ΔlogK(s)Zn(L tyr)(Aa)-logKZn[=1/2ΔlogK(L tyr)+ΔlogK(Aa)+log2]表示。结果表明:与L 丙氨酸(L ala)配合物Zn(L tyr)(L ala)相比,所有这些配合物均具有相对较高的δK值,表明配合物分子内存在着额外的稳定化作用。这种稳定性化作用可能主要归因于三元配合物分子内氨基酸侧链之间的疏水作用,并且这种作用随着氨基酸侧链结构及溶剂极性变化而变化。

金属螯合亲和色谱中的疏水作用

通过考察盐溶盐和盐析盐浓度对蛋白质在IDA裸柱和金属螯合柱上保留行为的影响,详细研究了金属螯合色谱中的疏水作用,疏水作用的发生、形成的条件以及不同条件下对蛋白质保留值的贡献。实验结果表明,在高浓度和低浓度的盐溶盐以及低浓度盐析盐中,蛋白质在金属螯合柱上的保留主要受静电和配位作用控制,而疏水作用对蛋白质的保留影响很小。对弱亲和性的金属螯合柱以静电作用为主,其大小可用参数Q表征;对强亲和性的IDA-Cu(Ⅱ)柱以配位作用为主。仅在高浓度的盐析盐中,金属螯合柱才呈现较强的疏水作用,支配蛋白质保留。实验证明,金属螯合色谱中疏水作用主要来自固定相间隔臂中的疏水碳链和盐析盐对蛋白质的增疏作用,利用这种疏水作用有可能改善金属螯合色谱分离的选择性。

疏水作用对可再分散聚合物乳胶粉水分散性的影响机理研究

通过改变壳层单体中苯乙烯(St)与甲基丙烯酸甲酯(MMA)的比例,合成一系列疏水作用递减的核壳结构聚合物乳液,并将它们干燥制备成聚合物乳胶粉。研究壳层疏水作用对乳液碱中和过程、乳胶粉微观形貌和水分散性能的影响,并探讨其对水分散性的作用机理。研究结果表明,乳胶粒径随羧基中和而逐渐增大,壳层疏水作用对乳胶粒的中和膨胀有显著抑制作用;疏水性增强使乳胶粉颗粒聚集融合更加严重,水分散性和分散稳定性也随之降低。完全中和使乳胶粒壳层羧基电离生成强亲水性羧酸根负离子,乳胶粒因聚合链间电荷排斥作用形成"绒毛结构"和厚水化层,粒径因而显著增大。随着壳层疏水性的增强,疏水缔合作用与电荷排斥作用相抵消,阻碍疏松"绒毛结构"的生成,碱扩散难度因而增大,壳层羧基中和不完全,导致乳胶粒亲水基团减少,电荷密度降低,水分散过程中乳胶粒之间的溶剂渗透压和电荷排斥作用减弱,颗粒难以迅速分离,水分散性变差;疏水缔合作用导致乳胶粒在喷雾干燥过程中凝聚融合成大颗粒乳胶粉,分散时水分向胶粉内部扩散难度增大,但沉降速度加快,导致分散稳定性降低。

疏水作用色谱填料研究进展

疏水作用色谱法（HIC）是一种有效的蛋白质分离纯化方法。综述了HIC填料的基质和配基的发展过程，举例说明了不同HIC填料对蛋白质的分离纯化效率，指出了制备型HIC填料的现状及其发展趋势。

新型单分散聚合物基质高效疏水作用色谱填料的合成及性能研究

以自行合成的8.0μm大孔单分散亲水性交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球为基质,采用化学改性方法合成了邻二醇配基新型高效疏水作用色谱填料。详细评价了该填料对蛋白质的分离性能、动力学吸附容量、质量回收率、硫酸铵起始浓度和流动相pH值对蛋白保留的影响。结果表明,这种高效疏水作用色谱填料的分离性能优良,分离了5种标准蛋白,对溶菌酶的活性回收率为96%±5%,吸附容量高达36.5 g/L。

高效疏水作用色谱分离高原春小麦淀粉酶

疏水作用色谱是色谱学科的一个分支.它与反相色谱一样都具有疏水性的特点.因此,疏水性活性蛋白在疏水柱上比较强的保留,而亲水性的活性蛋白不保留或保留很弱.采用盐溶液作为流动相,在疏水柱上活性蛋白不会产生不可逆吸附,活性蛋白的三维结构不被破坏,失活率低,一般不超过10%,所以,高效疏水作用色谱对活性蛋白的分离和测定是比较理想的方法.

脲、盐酸胍对碳氢链疏水作用的影响

本文测定了不同脲、盐酸胍浓度下,Triton X-100溶液的临界胶团浓度(cmc)和肌酸激酶分子在溶液中的暴露巯基数.通过计算脲、盐酸胍引起的Triton X-100胶团化过程中碳氢链的疏水能改变值,得到了评价脲、盐酸胍对碳氢链疏水作用影响的参数,盐酸胍降低碳氢链疏水能的能力是脲的3.5倍.实验结果还表明,盐酸胍引起肌酸激酶内埋巯基暴露的能力约为脲的3.2倍,这意味着在一定浓度范围内脲、盐酸胍引起肌酸激酶变性的主要因素是它们降低了碳氢链的疏水作用.

拉曼光谱方法研究疏水作用对四甲基脲氢键形成的影响

测得了四甲基脲(TMU)与水,甲醇和乙醇及N,N-二甲基甲酰胺(DMF)与水二元体系的拉曼光谱,分析二元溶液混合体系中羰基伸缩振动的频移随体积比变化的规律,从光谱的变化中可以得出羰基频移经历两个阶段:首先,羰基伸缩振动随体系中氢键受体体积比的增加向低波数方向移动;其次,当二元混合体系中体积比超过一个临界值后,羰基伸缩振动振动频率不变,变化的仅仅是相对强度。通过分析临界体积比可以得出TMU与水相互作用中水是以较大缔合分子形式存在;而TMU与甲醇、乙醇,DMF与水相互作用中是以单分子或小的缔合分子形式存在的。

高效疏水作用色谱填料的合成及其在重组人干扰素纯化中的应用

The synthesis of packing of oxygen-ethane as end-ligand bonded to silica andseparation for recombinant human interferons(rhIFN) in high-performance hydrophobicinteraction chromatography has been studied in this paper. It was showed that the packingsynthesized was not only suitable for separating standard proteins, but also for different rhIFNs,i. e., rhIFN-αA expressed in yeast, rhIFN-αA and rh1FN-γ in E. colt. The purify of threerhIFNs purified by one-step HPHIC, which rhIFN-γ expressed in E. colt was recognized as80%, rhIFN-αA expressed in yeast as 70%, and rhIFN-αA expressed in E. colt as 30%, wasmore than that of other chromatography besides affinity chromatography.

疏水作用和蛋白质

疏水作用及疏水和亲水的平衡在蛋白质结构与功能的方方面面都起着重要的作用。本文将以此为主题，就４０年来，疏水作用对蛋白质影响的研究作一概要的回顾。１．“疏水作用”这一概念的提出１９５９年，Ｋａｕｚｍａｎｎ在《蛋白质化学进展》上发表了一篇题为“影响蛋白质...

疏水作用色谱中流动相组成对溶质保留行为的影响

首次研究了疏水作用色谱 (HIC)中芳香醇同系物在不同种类盐流动相中的保留行为。以计量置换保留模型中的参数Z分析了HIC中小分子与生物大分子保留行为的差别 ,以及不同流动相组成对两种类型溶质的洗脱范围及洗脱能力的影响。与反相色谱相似 ,芳香醇在HIC中的保留仍存在同系物规律。比较了小分子和生物大分子在不同盐溶液中的Z值变化 ,表明流动相中的盐仅改变小分子与固定相的水合程度 ,而对生物大分子 ,除改变其和固定相水合程度外 。

疏水作用层析纯化脂肪酶

报道了以对β-硫酸酯己砜基苯胺（SESA）为活化剂制备疏水作用层析剂方法及其柱层析纯化脂肪酶的工艺条件。实验结果表明：活化剂对-β-硫酸酯己砜基苯胺（SESA）最适用量为1．0g／g湿纸纤维素。笨胺：丙酮比为1：4．以0．2mol／L磷酸缓冲液（pH8.0）=1mol／LNaCl为淋洗剂，以0．2mol／L磷酸缓冲液（pH8．0）＋8％吐温80为洗脱刘纯化脂肪酶具有较好的分辨率，酶活回收率64．0％，比活提高6．70倍。

疏水作用色谱法同时纯化及复性基因重组人干扰素-α

使用高效疏水作用色谱直接从大肠杆菌表达的基因重组人干扰素 α(rhIFN α)包涵体的裂解液中纯化了rhIFN α ,并在纯化的同时获得了高的复性效率 ,使复性和纯化一步完成 ,大大地简化了操作步骤。用凝胶排阻色谱对该法纯化的rhIFN α进行了纯度测定 ,纯度达到 95 %以上。该法的活性回收率分别比稀释法和透析法高 1 0倍和 1

钴(Ⅱ)氨基酸配合物分子内配体间疏水作用

应用pH电位滴定法研究了二元配合物Co(Aa) 2 [Aa-=苯丙氨酸根 (L phe) ,缬氨酸根 (L val) ,亮氨酸根 (L leu) ,异亮氨酸根 (L ile) ,色氨酸根 (L trp) ]在水溶液中的稳定性 [T =2 5℃ ,c=0 1mol/LNaClO4]。配合物Co(Aa) 2 相对于母体配合物Co(Aa) + 稳定性用ΔlogK[ΔlogK =logKCo(Aa)Co(Aa) 2 logKCoCo(Aa) ]表示。结果表明 :与L 丙氨酸 (L ala)配合物Co(L ala) 2 相比 ,所有这些氨基酸配合物Co(Aa) 2 均具有相对较大的ΔlogK ,表明这些配合物分子内存在着额外的稳定化作用。这种稳定性化作用可能主要归因于配合物分子内氨基酸侧链之间的疏水作用 。

基于疏水作用的陶瓷浆料自发凝固成型研究进展

自发凝固成型是一种新型的陶瓷浆料原位固化成型方法,通过吸附在陶瓷颗粒表面的分子链间弱作用(氢键,疏水作用)实现浆料的固化,具有普适性和适于常温大气环境操作的特点,已成为先进陶瓷制备领域的研究热点。本文简述发现兼具分散和凝固功能的阴离子型高分子分散剂的历程,以及自发凝固成型与其它原位固化成型的异同。在此基础上,基于疏水作用设计合成了系列自发凝固成型剂,进而满足以不同尺寸颗粒为原料的致密陶瓷和泡沫陶瓷的自发凝固成型。综述了面向实际应用所开发的陶瓷无界面连接、晶粒定向构造、干燥脱水等关键技术,以及致密陶瓷和泡沫陶瓷制备等研发进展,展望了未来自发凝固成型的发展方向。

疏水作用对光化学和光物理过程的影响——Ⅰ.不良溶剂中长链β-萘甲酸烷基酯的簇集和激基缔合物的形成

本文研究了不同链长的β-萘甲酸烷基酯(A)在乙二醇-水(EG-HO)和二甲基砜-水(DMSO-HO)混合溶剂中的荧光光谱,以及添加物(无机盐、长链饱和烷烃、糖淀粉)对A荧光的影响.长链A在混合溶剂中很容易形成激基缔合物,表明疏水作用促使长链分子相互簇集.测定了不同链长的分子发生簇集的临界浓度和临界溶剂组成.分别添加长链烷烃和糖淀粉都能引起激基缔合物的荧光强度减弱和单体荧光强度的增强,表明A和长链烷烃共簇集,与糖淀粉形成包结物.研究了在簇集体中A形成激基缔合物的动力学和热力学,测定了激基缔合物形成和解离速率常数、活化能和热焓的变化.证明在簇集体中基态发色基团之间并不具有激基缔合物的构型.在一定温度下,簇集体会发生相变.

疏水作用色谱用球状交联聚乙烯醇的制备

采用悬浮聚合法成功地制备了PVA白球。本文对水溶液中PVA含量、甲醛用量、表面活性剂、油水体积比、搅拌速度及反应温度等影响因素进行了研究和探索。实验得到了最佳工艺条件为:50ml 15％PVA分散在300ml的油相中,以3.0g油酸钠和5.0ml Span-80作表面活性剂,用10 ml甲醛溶液作交联剂,在88℃和400 r/min的条件下进行悬浮聚合,制备得到了缩醛化度为30％的球状PVA颗粒,其中粒径0.30～0.45mm(40～60目)者约占80％。

锌(Ⅱ)-氨基酸配合物分子内配体间疏水作用

应用 p H电位滴定法研究了配合物 Zn( Aa) 2 [Aa-=L- val(缬氨酸根 ) ,L- phe(苯丙氨酸根 ) ,L- trp(色氨酸根 ) ,L- tyr(酪氨酸根 ) ]在水和 2 0 %、40 %及 60 %二氧六环 /水溶液中的稳定性 [t=2 5℃ ,c=0 .1 mol/L Na Cl O4]。配合物 Zn( Aa) 2 相对于母体配合物 Zn( Aa) + 稳定性用Δlog K=log KZn( Aa)Zn( Aa) 2 - log KZn Zn( Aa) 表示。结果表明 :与 L-丙氨酸 ( L- ala)配合物 Zn( L- ala) 2 相比 ,所有这些氨基酸配合物 Zn( Aa) 2 均具有相对较大的 Δlog K值 ,表明这些配合物分子内存在着额外的稳定化作用。这种稳定性化作用可能主要归因于配合物分子内氨基酸侧链之间的疏水作用 。

疏水作用色谱介质的合成及色谱特性研究

利用国产大孔硅胶作基质合成了疏水填料．按照高效疏水作用色谱法，采用梯度洗脱方式分离了６种标准蛋白及唾液中α－淀粉酶和基因工程生产的γ－干扰素．柱子不可逆吸附小、被试验的α－淀粉酶和溶菌酶活性几乎定量被回收．应用合成的色谱填料研究了洗脱剂中盐浓度和温度对蛋白质保留行为的影响，论证了合成填料的色谱属性．