赖型017株钩体疏水外膜蛋白及其免疫特征的研究

采用低浓度非离子型去污剂ＴｒｉｔｏｎＸ－１１４（ＴＸ－１１４）抽提和分离问号状钩端螺旋体（钩体）黄疸出血群赖型０１７株（０１７），选择性地将钩体外膜蛋白分离为ＴＸ－１１４疏水相和亲水相两个部分。疏水相外膜蛋白含５条主要蛋白区带，其分子量分别为６６ｋｄ、３９ｋｄ、３５ｋｄ、２７ｋｄ和１６ｋｄ，其中仅３９ｋｄ外膜蛋白区带可特异地分别被抗全０１７血清、抗０１７外膜血清和抗０１７保护性单克隆抗体Ｅ４Ｂ７Ｇ５所识别。本研究结果表明经ＴＸ－１１４抽提分离的３９ｋｄ疏水外膜蛋白为０１７钩体稳定的免疫原，在研究钩体保护性抗原和构建基因工程疫苗中有十分重要的研究价值。

保护性MbE_4B_7G_5对问号状钩体疏水外膜蛋白OmpL_(39)的免疫印迹分析

选用具有高效价、特异性的黄疸出血群保护性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）Ｅ４Ｂ７Ｇ５，用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ，对ＴｒｉｔｏｎＸ－１１４（ＴＸ－１１４）抽提的６株问号状钩体（０１７、６０１、６０３、６０９、６２０、２４５株）的疏水外膜蛋白进行分析鉴定。结果表明，提纯的０１７、６０１、６０３、６０９株问号状钩体３９ｋｄ疏水外膜蛋白（ＯＭＰ）有明显的免疫反应，而６２０、２４５株此带区无明显的免疫识别。这一结果提示：用ＭｂＥ４Ｂ７Ｇ５筛选问号状钩体保护性抗原，分离、纯化３９ｋｄ的疏水外膜蛋白（ＯｍｐＬ３９）在构建钩体基因工程疫苗中有重要的研究价值。

钩端螺旋体疏水外膜蛋白(OmpL39)对豚鼠免疫功能影响的研究

目的研究钩体蛋白抗原的免疫保护力及其机制。检定纯化的强毒０１７钩体相对分子质量为３９×１０３的疏水外膜蛋白（ＯｍｐＬ３９）对豚鼠的免疫保护力。对免疫应答期豚鼠红细胞免疫功能的变化进行观察，以期对钩体基因疫苗的研制提供依据。方法用ＴＸ－１１４抽提钩体的不同蛋白成分，分三批对３６只豚鼠进行免疫保护力试验，检测红细胞免疫功能ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ、ＲＢＣ－ＩＣＲ、ＲＦＥＲ、ＲＦＩＲ的变化；用χ２检验、ｔ检验处理数据，进行分析。结果ＯｍｐＬ３９在豚鼠体内能产生高效价的显凝抗体（ＭＡＴ：１３２００）。ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ、ＲＢＣ－ＩＣＲ均明显升高（Ｐ＜０．０５）；红细胞免疫粘附因子促进率（ＲＦＥＲ）上升，抑制率（ＲＦＩＲ）下降，两者比值显著增大（Ｐ＜０．０５）。结论ＯｍｐＬ３９对豚鼠有有效的免疫保护力，在免疫应答期除增强体液免疫外。