疏水层析介质苯基-琼脂糖凝胶合成与吸附性能的研究

以琼脂糖凝胶为基质 ,与 2 ,3-环氧丙烷苯基醚反应后 ,制得疏水层析介质苯基 -琼脂糖凝胶。考察了它的物化性能及对多种蛋白、基因产品的吸附与分离性能 ,结果表明其吸附性能、分离纯化性能、化学稳定性均与国外同类产品相近。对链激酶的纯化收率大于 95 % ;人血 B因子的纯化倍数为 2 6 ,收率大于 95 %。

间臂和丁基密度对疏水层析分离纯化重组乙肝病毒表面抗原的影响

以国产高交联度的快流速琼脂糖为基质,合成了针对纯化中国仓鼠卵巢细胞表达乙肝病毒表面抗原(CHO-HBsAg)的不同间臂(3C、8C和10C)和不同配基密度的丁基疏水介质。配基密度的增加和间臂C链的延长都会增加介质的疏水性,从而影响其对CHO-HBsAg的分离效果。采用正交实验考察了配基密度、盐浓度、pH值三个影响因素对不同间臂疏水介质性能的影响。以分离CHO表达的乙肝病毒表面抗原(CHO-HBsAg)的收率和纯化倍数为主要指标。根据正交试验结果,分离效果最佳的介质间臂为8C、配基密度为22μmol/mL。该介质在硫酸铵浓度9%、pH7.0条件下,CHO-HBsAg的收率可以接近100%,纯化倍数达到60。