疏肝理肺方对慢性应激性哮喘大鼠皮质酮及基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探讨不同浓度疏肝理肺方对慢性应激条件下哮喘大鼠皮质酮(CORT)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 48只健康雌性SD大鼠随机分为6组:正常组(A组)、应激模型组(B组)、地塞米松组(C组)、疏肝理肺方低浓度组(D组)、疏肝理肺方中浓度组(E组)、疏肝理肺方高浓度组(F组),每组8只。除正常组外,余各组采用氢氧化铝-卵清蛋白(OVA)致敏激发哮喘,同时加用慢性不可预见性温和应激法建立慢性应激模型。造模结束后取材,HE染色观察肺组织病理学改变,ELISA法检测血清CORT的含量,Western blot法测定肺组织MMP-9的表达。结果与A组相比,B组肺组织炎性细胞明显浸润,支气管平滑肌及基底膜增厚,黏膜肿胀,褶皱形成;C组和疏肝理肺方各浓度组上述表现较应激模型组减轻;疏肝理肺方低浓度组和高浓度组上述表现较中浓度组增强。B组CORT和MMP-9表达量较A组明显升高(P<0.05);C组和疏肝理肺方各浓度组CORT和MMP-9表达量较B组降低(P<0.05);疏肝理肺方低浓度组和高浓度组CORT和MMP-9表达量较中浓度组升高(P<0.05)。结论疏肝理肺方可通过抑制血清CORT及肺组织MMP-9的表达,有效缓解慢性应激条件下的哮喘大鼠气道重塑。

疏肝理肺方对应激条件下哮喘大鼠脑海马形态的影响

目的:探讨束缚应激哮喘大鼠应用疏肝理肺方药后脑海马形态结构的变化。方法:实验于2002-03/2003-01在上海中医药大学国家重点实验室完成。选择SD雄性大鼠56只,随机分为7组,正常组、哮喘组、应激组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组各8只。正常组和应激组大鼠给予1mL生理盐水腹腔注射,其余各组分别腹腔注射等量抗原液致敏,致敏第8天开始,每日将应激组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组大鼠双后肢用绷带立式固定2h给予束缚应激刺激,共进行3周;同时每日分别给予地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组大鼠地塞米松(0.75mg/片)1g/(L·kg)、理肺方(麻黄、桂枝、炙甘草、细辛、干姜、半夏、五味子及白芍均9g)28g/(mL·kg)和疏肝理肺方(在理肺方基础上增加柴胡9g及炙枳实9g)36g/(mL·kg)灌胃。在致敏第15天开始,每日给予哮喘组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组大鼠卵蛋白20g/L雾化吸入3min,共雾化2周。造模及治疗结束后,麻醉大鼠抽取腹主动脉血,测定血浆皮质酮水平应用放射免疫法。抽血后,开颅取大鼠脑,采用光镜及透射电镜检测大鼠脑海马的形态结构。结果:56只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①各组大鼠血浆皮质酮水平比较:哮喘组和应激组大鼠的血浆皮质酮水平均较正常组显著升高犤(532.48±115.28),(323.32±100.40),(235.27±46.64)μg/L,(P<0.01,0.05)犦。疏肝理肺方组大鼠较哮喘应激组显著降低犤(309.50±46.52),(569.89±72.32)μg/L(P均<0.01)犦。疏肝理肺方组较理肺组(528.60±130.72)μg/L显著降低(P<0.01)。②各组大鼠光镜下脑海马形态结构的比较:正常组大鼠脑海马锥体细胞排列规则,细胞核圆而大,核仁清晰。哮喘应激组、地塞米松组和理肺组大鼠相似脑海马锥体细胞排列不规则,在CA3区可见大量的锥体细胞核固缩。疏肝理肺组大鼠脑海马锥体细胞排列比较规则,在CA3区核固缩神经元明显减少。③各组大鼠电镜下脑海马形态结构的比较:正常组大鼠脑海马锥体细胞核形态规则,核膜光滑,核异染色质分布均匀,线粒体丰富,嵴排列规则。哮喘应激组和理肺组大鼠相似,脑海马锥体细胞核形态不规则,核异染色质明显增多,胞浆疏松,多数线粒体扩张,出现空泡、嵴排列紊乱。地塞米松组大鼠脑海马锥体细胞形态不规则,细胞器变性。疏肝理肺组大鼠脑海马锥体细胞核形态较规则,核膜光滑,核异染色质分布较均匀,胞浆疏松,线粒体丰富但致密。结论:慢性束缚应激会诱发或加重哮喘,导致哮喘大鼠血浆皮质酮水平升高,从而损伤脑海马神经元形态。疏肝理肺方可以通过抑制应激条件下哮喘大鼠的血浆皮质酮分泌,对脑海马神经元形态起一定的保护作用。