响应面法优化疏螺旋体素发酵培养基

目的提高链霉菌BOR-0331发酵液中的生物活性成分疏螺旋体素(borrelidin)含量。方法采用单因素实验、Plackett-Burman实验、最陡爬坡试验、中心组合设计实验等方法优化发酵培养基组成及比例。结果当黄豆饼粉2.4%,甘露醇3.2%,可溶性淀粉1.8%,甘油0.7%,氯化钠0.1%时,效价最高。结论经过发酵培养基优化,效价从2.2mg/L提升至35.3mg/L,提高了1504%。

HPLC法测定Streptomyces sp.BOR-0331发酵液中疏螺旋体素的含量

目的:建立放线菌Streptomyces sp. BOR-0331发酵液中疏螺旋体素含量测定的方法。方法:采用高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(HPLC-Q-TOF-MS)分析技术进行定性鉴别;高效液相色谱(HPLC)法进行含量测定,采用Agilent ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相为乙腈-0.1%三氟乙酸溶液(50∶50),流速为1.5 mL·min^(-1),检测波长为257 nm。结果:疏螺旋体素浓度范围在12.5～200μg·mL^(-1)线性良好,相关系数为0.9997(n=5);平均回收率为102.8%(RSD为0.86%),精密度RSD为1.3%;3批发酵液中疏螺旋体素的含量分别为61.18、69.92、61.08μg·mL^(-1)。结论:方法准确可靠,可以用于疏螺旋体素发酵、提炼及纯化过程的含量测定。

海洋链霉菌Streptomyces sp.MCCC 1A09830抗菌成分的分离与鉴定

目的:研究海洋链霉菌Streptomyces sp.MCCC 1A09830与其它菌种的亲缘关系,并分离纯化Streptomyces sp.MCCC 1A09830产生的抗菌成分,鉴定抗菌成分的结构。方法:通过构建系统发育树研究Streptomyces sp.MCCC 1A09830与其它菌种的亲缘关系;采用甲醇提取、硅胶柱层析、高效液相色谱法等分离技术纯化抗菌成分,鉴定抗菌成分的结构。结果:Streptomyces sp.MCCC 1A09830与Streptomyces sp.NEAE-126存在很近的亲缘关系;Streptomyces sp.MCCC 1A09830产生的抗菌成分得到了纯化,获得了化合物1。化合物1经高分辨质谱(High Resolution Mass Spectrometry,HRMS)、一维及二维核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)分析鉴定为Borrelidin A(疏螺旋体素)。结论:从Streptomyces sp.MCCC 1A09830的发酵液中分离得到1种抗菌成分,丰富了Borrelidin的生产菌库,为海洋菌株活性产物的分离提供了支持。

苏氨酰-tRNA合成酶的功能及其在药物开发中的应用

苏氨酰-tRNA合成酶(ThrRS)的经典功能是负责合成苏氨酰-tRNA (Thr-tRNA^(Thr)),后者被延伸因子转运到核糖体上参与蛋白质合成。随着生命体的不断进化,ThrRS不断获得蛋白质合成之外的新功能,统称为非经典功能,多与细胞存活和营养压力有关,对于真核生物细胞稳态至关重要。基于看家蛋白质的重要地位,ThrRS基因突变会导致严重的功能异常,对生命体的正常生命活动造成严重的损伤;同时,ThrRS也成为疾病治疗的有效靶点。关于ThrRS抑制剂的研究也在不断进行,尽管广谱抑制剂疏螺旋体素(borrelidin)抑制效果明显,但较大的细胞毒性导致其临床应用受到限制。开发新一代有效的低毒性抑制剂成为现阶段研究者们致力完成的目标。