疏调经筋推拿可维持膝骨关节炎软骨损伤兔软骨细胞内环境的稳定

背景:在前期应用中发现疏调经筋推拿法能有效改善膝骨关节炎的临床症状,但其治疗机制有待验证。目的:探讨疏调经筋推拿法对膝骨关节炎的干预作用及其可能的作用机制。方法:34只雄性新西兰兔随机分为空白组(9只)及造模组(25只),造模组膝关节腔内注射4%木瓜蛋白酶溶液建立膝骨关节炎兔模型。6周后两组各随机挑选1只进行软骨苏木精-伊红染色及Mankin’s评分,模型评估后,造模组随机分为模型对照组、推拿组及氨糖组,每组8只。推拿组采取“疏调经筋推拿法”,隔日1次;氨糖组采用硫酸氨基葡萄糖胶囊水溶液灌胃,每日1次;共干预4周。干预结束1周后,番红O-固绿染色镜下观察软骨病理形态;Western blot、免疫组织化学染色法检测软骨组织中细胞外信号调节激酶1/2、核转录因子κB p65、Bcl-2、Bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达水平;ELISA法测定外周血清和关节液中白细胞介素1β的质量浓度。结果与结论:①软骨切片镜下观察:模型对照组软骨表面缺损、破坏,软骨层变薄,软骨细胞异常簇状聚集,潮线破坏;推拿组软骨表面无明显缺损、破坏,软骨细胞排列基本正常,无明显异常聚集,潮线较规整;氨糖组与模型对照组相比未见明显改善;②与空白组相比,模型对照组细胞外信号调节激酶1/2、核转录因子κB p65、Bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达水平升高(P<0.01),Bcl-2表达降低(P<0.01);推拿组兔细胞外信号调节激酶1/2、核转录因子κB p65、Bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达水平明显低于模型对照组(P<0.01),稍低于氨糖组(P<0.05);Bcl-2表达明显高于模型对照组(P<0.01),稍高于氨糖组(P<0.05);③与空白组相比,模型对照组关节液、外周血清中白细胞介素1β质量浓度显著增高(P<0.01);与模型对照组相比,推拿组白细胞介素1β质量浓度降低(P<0.01);氨糖组白细胞介素1β质量浓度高于推拿组(P<0.01);④提示“疏调经筋推拿法”可以抑制软骨退变,延缓膝骨关节炎进展,可能是通过调节白细胞介素1β的分泌及释放、并通过白细胞介素1β与细胞外信号调节激酶1/2-核转录因子κB信号通路相互作用、抑制软骨细胞过度凋亡、维持软骨细胞内环境稳定、修复损伤软骨来实现的。