电刺激大鼠疑核对胸腺中胸腺素和TGF-β mRNA水平的影响

通过急性电刺激大鼠疑核,利用Real-time PCR方法研究了胸腺中胸腺素、TGF-βmRNA在刺激前后的变化规律。结果表明:急性电刺激大鼠疑核后,胸腺中胸腺素与内参的比值从(1.46±0.98)×10-6降低至(2.65±0.31)×10-7,TGF-βmRNA从(3.67±0.86)×10-6降低至(1.92±0.66)×10-7,电刺激组mRNA水平明显低于假刺激对照组。研究结果提示,疑核对大鼠胸腺组织的功能有重要的调节作用。

急性电刺激疑核对TNBS诱导的IBD大鼠IL-6 mRNA表达的影响

目的:探讨疑核对炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)相关细胞因子IL-6的调控作用,以及在IBD发生发展过程中发挥的作用.方法:三硝基苯磺酸(TNBS)诱导IBD大鼠动物模型,采用脑立体定位技术和电生理方法,应用Real-time PCR方法来检测急性电刺激疑核前后IBD大鼠结肠、胸腺、脾脏、外周血淋巴细胞中IL-6mRNA表达水平的变化.结果:经急性电刺激疑核后,IBD模型大鼠结肠、胸腺、脾脏及外周血淋巴细胞中IL-6的mRNA转录水平均显著升高(3.26E-02±5.83E-03vs5.12E-03±6.86E-04,5.52E-02±9.56E-03vs2.04E-02±3.58E-03,3.42E-02±7.19E-03vs2.91E-03±3.41E-04,8.12E-03±4.24E-04vs3.74E-03±5.73E-04,均P<0.01),而假刺激组和对照组没有明显变化(P>0.05).结论:疑核对IBD大鼠相关细胞因子IL-6具有一定的调控作用,且以正调控作用为主,并且在IBD发生发展过程中可能发挥着重要的作用.

疑核内有关神经元在机体细胞免疫调节中的作用

研究了疑核内胆碱能神经元、去甲肾上腺素能神经元、脑啡肽能神经元对机体细胞免疫机能的影响 ,并对疑核内 3种神经元之间的相互关系进行了探讨。实验用麻醉家兔 ,分 6组进行 ,分别在疑核处通过微量注射器注入氯化乙酰胆碱 ( Ach)、密胆碱 -3( HC-3)、酒石酸去甲肾上腺素 ( NA)、6-羟基多巴胺 ( 6-OHDA)、盐酸吗啡 ( MP)、盐酸纳络酮 ( NX) ,并分别于注射前和注射后不同时间取外周血 ,测定 T细胞百分率及PHA诱导的有丝分裂原反应。结果 :Ach组上述免疫指标比注射前明显升高 ;HC-3组上述免疫指标比注射前明显降低 ;NA组上述免疫指标在注射后 30、60 min时明显低于注射前 ;6-OHDA组上述免疫指标在注射后 1 0～ 1 2 0 min时明显升高 ;MP组上述免疫指标在注射后 60、1 2 0 min时明显降低 ;NX组上述免疫指标注射前、后无明显变化。提示 :疑核增强机体细胞免疫的作用可能是通过胆碱能神经元实现的 ;疑核内的去甲肾上腺素能神经元与胆碱能神经元的作用相拮抗 ;

疑核的研究进展(英文)

疑核是重要的内脏运动核和躯体运动核 ,它与中枢神经系统和外周器官建立了广泛的神经联系。疑核 ,迷走 孤束复合体 ,最后区 ,腹外侧延髓和中间网状结构共同组成了延髓内脏带。疑核内含有大量的神经递质 ,如乙酰胆碱 ,生物胺 ,神经肽 ,氨基酸等及其受体。疑核在调控呼吸、心血管活动、免疫、消化和内分泌功能中起重要作用。

生长抑素调节疑核神经元兴奋性氨基酸受体介导的兴奋

在含有孤束核中央亚核（ＮＴＳｃ）疑核神经元密集区（ＡＭＢｃ）及孤束─疑核传导束的脑片，注射生长抑素（ＳＳＴ）于ＡＭＢｃ区，对Ｎ—ｍｅｔｈｙｌ—Ｄ－ａｓｐａｒｔａｔｅ（ＮＭＤＡ）引起的疑核神经元膜电位去极化有易化作用，而注射ｃｙｓｔｅａｍｉｎｅ耗竭内源性ＳＳＴ后，ＮＭＤＡ的去极化作用减弱；ＮＭＤＡ受体阻断剂Ｄ，Ｌ—２—ａｍｉｎｏ—７一ｐｂｏｓｐｈｏ－ｎｏｈｅｐｔａｎｏｉｃａｃｉｄ（ＡＰ─７）使疑核神经元兴奋性突触后电位（ＥＰＳＰ）幅度降低，而ＳＳＴ可翻转ＡＰ—７的抑制效应；对ｎｏｎ—ＮＭＤＡ介导的疑核神经元膜去极化，ｃｙｓｔｅａｍｉｎｅ亦对其有明显抑制作用；甘氨酸（ｇｌｙｃｉｎｅ）可阻断ＳＳＴ易化疑核神经元的去极化作用。这些结果表明，ＳＳＴ对疑核神经元兴富性氨基酸（ＥＡＡ）受体介导的兴奋起重要的调节作用。

睫状神经营养因子在喉返神经损伤及修复中疑核神经元内的表达

目的 揭示喉返神经损伤及修复后疑核运动神经元睫状神经营养因子 (Ciliaryneurotrophicfactor,CNTF)的表达及分布。方法 实验犬分为喉返神经损伤组和损伤修复组 ,采用原位杂交及免疫组织化学技术 ,结合图像分析技术测定疑核CNTFmRNA及其蛋白表达呈阳性反应的神经元胞体灰度、体积及数量。结果 疑核运动神经元自分泌CNTF ,神经损伤后早期胞体内CNTF基因表达下降而CNTF蛋白表达增强。 4周后基因表达迅速增强 ,而CNTF蛋白表达减弱 ,但 6周后基因及其蛋白表达和神经元胞体数及体积均始终低于健侧。 12周后CNTF表达、神经元形态、胞体数及体积趋向稳定。神经修复早期 ,CNTF表达与神经损伤相似 ,但基因表达恢复较神经损伤组快 ,CNTF蛋白高表达维持时间较神经损伤组长 ,尽管 12周后表达的神经元较正常减少 ,但表达强度及体积与正常无明显差异。结论 运动神经元表达CNTF ;表达程度与神经损伤及再生有关 ,提示CNTF在神经损伤再生中起重要作用。

疑核注射L-精氨酸和7-硝基吲哚对大鼠心率变异性的影响

目的研究大鼠疑核(NA)心抑制区的一氧化氮(NO)对心率(HR)和心率变异性(HRV)的影响。方法Wistar大鼠20只,随机分为两组,对照组脑干NA心抑制区右侧注射L-精氨酸(L-arg)5.0nmol/L和生理盐水各0.5μL;实验组脑干NA心抑制区单侧注射L-arg5.0nmol/L和7-硝基吲哚(7-NI)2.0nmol/L各0.5μL,分析HRV的变化。结果NA心抑制区微量注射L-arg后与给药前相比,HR显著降低(P<0.01),时域指标:24h正常R-R间期标准差(SDNN)和24h相邻R-R间期标准差值的均方根(rMSSD)升高(P<0.05),频域指标LF和HF升高(P<0.01);LF/HF降低(P<0.01)。微量注射7-NI和生理盐水后与注射L-arg后相比,实验组HR升高(P<0.05),时域指标SDNN、rMSSD和频域指标LF和HF降低(P<0.01或P<0.05),LF/HF升高(P<0.05)。结论大鼠脑干NA心抑制区产生的NO可增强心迷走神经的活性。

外周有关递质对疑核(AMB)调节细胞免疫机能的影响

本实验研究了三种受体拮抗剂对电刺激疑核调节细胞免疫机能的影响,并对疑核调节机体细胞免疫的机制作了探讨。实验用麻醉家兔,分3组进行。分别在静注阿托品、酚妥拉明或心得安后电刺激疑核,并分别于注射前及刺激后不同时间取外周血,测定T细胞百分率及对PHA的反应。结果:阿托品组上述免疫指标比注射前明显降低;酚妥拉明组上述免疫指标在刺激后60分钟时比注射前有所升高;心得安组上述指标在刺激后120分钟时比注射前明显降低。提示:疑核对细胞免疫机能的调节可能是通过迷走神经末梢释放乙酰胆碱,作用于免疫器官及免疫细胞上的M型胆碱能受体实现的。

孤束核向疑核投射的光、电镜观察

本实验采用HRP顺、逆行标记法及神经溃变技术,用光、电镜同时观察了大白鼠孤束核向疑核的纤维投射。结果表明:孤束核向疑核有明显的纤维投射,这些纤维与疑核细胞形成Gray’sⅠ型轴-体、轴-树突触。提示疑核及其所在的延髓腹外侧网状结构区可能是某些内脏反射的重要整合中枢。

疑核咽肌运动神经元中SOM和NOS的共存—PRV、SOM、NOS三标记法研究

用ＰＲＶ、ＳＯＭ及ＮＯＳ三标记方法研究了ＳＯＭ和ＮＯＳ样神经元在疑核咽肌运动神经元中的共存。将ＰＲＶ注射入大鼠咽肌后，先进行ＰＲＶ和ＳＯＭ免疫荧光双标记，再进行ＮＡＤＰＨ反应。结果在疑核半致密部中观察到有少量细胞呈ＰＲＶ、ＳＯＭ和ＮＯＳ三标记。ＳＯＭ和ＮＯＳ样神经元在疑核咽肌运动神经元中共存的意义还不清楚。

家禽疑核向脊髓的直接投射及细胞构筑——HRP微电泳法研究

采用微电泳技术，将３０％辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）分别引入北京鸭、麻鸭、鹅、鸡、鸽和鹌鹑的脊髓颈中部、颈膨大部和腰膨大部的一侧灰质中，灌流固定，冰冻连续切片，ＢＤＨＣ法显色，中性红复染，明视野显微镜下观察并摄影。研究结果：家禽的疑核位于延髓的近腹外侧网状结构中，纵贯延髓的全长，尾端与副神经的脊髓核相连续，细胞呈弥散性分布，多数为大型神经元。在延髓的尾端，闩以后的部分，双侧疑核内出现了许多标记细胞。这些酶标细胞与副神经的脊髓核神经元混杂在一起，标记细胞的胞体直径为２１～４０μｍ，突起很明显，为典型的星形多极运动神经元。胞体和突起内聚积了大量的深蓝色酶标反应产物。在颈中部引入ＨＲＰ后，出现的标记细胞数量最多，在颈膨大和腰膨大引入ＨＲＰ后依次减少。６种家禽的种间差异不显著。研究结果表明，家禽疑核的传出纤维可以直接下行投射到脊髓各段。

疑核在中脑导水管周围灰质(PAG)调节细胞免疫机能中的作用

本研究旨在探讨PAG的细胞免疫调节作用及其调节通路。实验用麻醉家兔,分两组进行。分别将其左侧疑核电解损毁(疑核损毁组)及在其左侧小脑或延脑背侧作电解损伤(对照损毁组)后,电刺激PAG,并分别于刺激前及后不同时间取外周血,测定T细胞百分率及对PHA的反应。发现刺激PAG可使对照损毁组外周血中的T细胞百分率及对PHA的反应均比刺激前升高或增强,而疑核损毁组外周血中的T细胞丰分率在刺激PAG前后无显著变化,对PAG的反应在刺激后比刺激前有所增强,但不如对照损毁组强烈。结果提示,PAG可由疑核介导参与调节细胞免疫机能。

曲马多中毒死亡后GABA_A受体α1和GABA_B受体1亚型在延髓孤束核和疑核中的表达

目的观察曲马多中毒死亡后人脑延髓孤束核和疑核中γ-氨基丁酸(gamma-amino butyric acid,GABA)A受体α1亚型(GABAAα1)和B受体1亚型(GABAB1)的表达变化,探讨曲马多中毒死亡的机制。方法应用免疫组织化学方法,观察比较曲马多中毒死亡人脑与非中毒原因死亡人脑延髓孤束核和疑核的GABAAα1和GABAB1的变化,并用图像分析系统进行分析。结果非中毒原因死亡人脑延髓孤束核和疑核有低水平的GABAAα1和GABAB1表达,曲马多中毒死亡人脑延髓孤束核和疑核的GABAAα1和GABAB1表达明显增加。结论曲马多中毒死亡的机制可能是由于人脑延髓孤束核和疑核GABAAα1和GABAB1表达增加所致的呼吸抑制。

家兔疑核内P2X受体在急性低氧中的作用

目的研究疑核(nucleus ambiguous,NA)处P2X受体在急性低氧中的作用。方法实验采用电生理和微量注射相结合的方法,以膈神经放电为观察指标,观察呼吸变化。通过吸入10%氧气(10%O2,90%N2)引导出低氧外周化学感受性反射。在NA处分别微量注射P2X受体的激动剂三磷酸腺苷(ATP)和阻断剂磷酸吡哆醛(PPADS),观察这些药物对急性低氧呼吸的影响。结果吸入低氧混合气后,动物呼吸加深加快;在NA处微量注射ATP增强了急性低氧呼吸频率,微量注射PPADS部分阻断了ATP对低氧通气的兴奋效应。结论NA处P2X受体对急性低氧通气反应具有一定的调节作用。

疑核在下丘脑外侧区微量注射IL-6调节机体细胞免疫过程中的作用

为探索外源性ＩＬ－６可否通过反馈作用调节机体的免疫反应，选用３～４月龄、体重１．５～２．５ｋｇ的健康青紫蓝家兔，麻醉后固定于脑立体定位仪上。试验组Ⅰ动物（ｎ＝８）在下丘脑外侧区注射２．５ｐｍｏｌ／ＬＩＬ－６２μＬ；试验组Ⅱ动物（ｎ＝５）在疑核处注入２％盐酸利多卡因０．５μＬ后，再在下丘脑外侧区注射２．５ｐｍｏｌ／ＬＩＬ－６２μＬ；对照组动物（ｎ＝４）在下丘脑外侧区注射人工脑脊液２μＬ。分别在注射前及注射后不同时间无菌采血作细胞免疫指标测定。结果：试验组Ⅰ动物的Ｔ细胞百分率和ＰＨＡ诱导的淋巴细胞转化率，在注射ＩＬ－６后６０ｍｉｎ显著升高；试验组Ⅱ动物的Ｔ细胞百分率和ＰＨＡ诱导的淋巴细胞转化率，在注射ＩＬ－６后１２０ｍｉｎ出现显著升高；对照组动物在注射前后无明显变化；由此证明，下丘脑外侧区一定量的ＩＬ－６具有增强机体细胞免疫功能的作用，而这种细胞免疫的调节作用至少有一部分是通过疑核到达免疫系统的。疑核是下丘脑外侧区ＩＬ－６调节机体细胞免疫的通路之一。

大鼠疑核对内毒素炎症反应的影响及机制研究

为了探究大鼠疑核(NA)在炎症反应中的作用,选取大鼠腹腔注射内毒素(LPS)的方法来构建大鼠炎症模型,同时电损毁左、右侧的NA,采用免疫组织化学技术和酶联免疫(ELISA)实验技术,检测NA中即刻早期基因(Fos)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,以及血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素4(IL-4)的含量。结果表明:与对照组相比,LPS炎症组NA、迷走神经背核(DMV)、孤束核(NTS)中Fos和GFAP的表达具有显著的统计学意义,血清中TNF-α和IL-4的含量有明显的增大趋势;与假损毁左侧NA组相比,被损毁左侧NA组LPS炎症大鼠血清中IL-4以及TNF-α的水平具有显著统计学意义,同时大鼠NTS中的Fos的表达量明显增加;与假损毁组相比较,损毁右侧NA组血清中细胞因子TNF-α的含量没有显著变化,而IL-4含量显著增大,DMV和NTS中的Fos和GFAP表达也无明显变化;NA参与了LPS炎症反应,并通过左侧NA减少抗炎细胞因子的产生,增加促炎细胞因子的产生;右侧NA减少抗炎细胞因子产生,而对促炎细胞因子无调节作用,左右两侧NA在炎症反应中的作用可能有所差别。

奶山羊疑后核、疑核和面后核的形态及构筑

在光镜下,从额状面、矢状面和水平面观察了用Nissl法和Golgi-Cox法染色的奶山羊脑干连续切片,对疑后核、疑核和面后核的形态及构筑进行了研究,结果如下: 一、奶山羊疑后核的形态与构筑与Taber(1961)所述猫的及Breazile(1967)所述家猪的近似;其在延髓内所占的位置相当于脊髓中间外侧细胞柱。 二、奶山羊的疑核可分为一内侧部和一外侧部。内侧部为一不规则的纵细胞柱,相当于Taber(1961)所述猫的疑核;但其中点细胞稀少,因而内侧部又可分为咀侧段和尾侧段。外侧部从外侧、背侧和腹侧将内侧部及面后核包围,因而其全长呈一不封闭的圆筒状,缺口在内侧,这种结构是猫、大鼠等动物所不具备的。 三、奶山羊面后核的位置与猫的相似(Taber 1961),但细胞排列较猫的密集。

电刺激兔疑核对胃运动影响的初步观察

本文采用立体定位电刺激兔疑核(NA)(150μA,50HZ,1ms,30s),同步记录胃综合肌电、胃电压、动脉血压和心率的方法,初步探讨了NA在胃运动调节中的作用。结果表明:电刺激兔一侧NA(n=16)可使胃电快波簇发放频率。