MALDI-TOF MS质谱技术在疑难血型标本鉴定中的应用

目的探讨基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术在临床疑难血型标本基因分型中的应用,为临床输血工作提供依据。方法3例标本均为上海地区医院送检至上海市血液中心的疑难血型标本,其中1号标本包含先证者及其父母血样。利用血清学方法对标本进行血型鉴定、直抗试验、意外抗体筛查及鉴定试验。利用由本实验室建立的MALDI-TOF质谱检测体系对标本进行血型基因分型。利用Sanger测序验证标本基因突变位点,并利用血清学或流式方法验证部分标本表型。结果血清学结果提示,1号先证者及其母亲、2号和3号标本均存在抗高频抗原抗体。MALDI-TOF MS质谱分型结果显示,1号标本先证者为Di(a+b+),其父为Di(a-b+),其母为Di(a+b-),2号标本为p,3号标本为Jr(a-)。3例标本测序结果与质谱分型结果一致。血清学结果提示,2号标本为p表型。流式结果提示,3号标本为Jr(a-)表型。结论首次将MALDI-TOF MS质谱技术应用于国内临床疑难标本血型基因分型。相较于PCR-SSP等分型手段,MALDI-TOF MS具备快速、高通量、高特异性等优势,有助于辅助开展疑难血型鉴定,并有助于稀有血型筛选等工作。

疑难ABO血型标本的表型与相应等位基因的检测

目的探讨分析疑难ABO血型标本与其等位基因的检测,为临床遇到的疑难ABO血型标本提供可靠的血型鉴定方法。方法选取2013年8月到2014年8月期间在笔者就职医院各科室送检的临床病人血液样本9例,首先按照常规血型检测技术进行ABO血型血清学试验,确定ABO正反定型,再采用盐酸胍/蛋白酶K裂解提取法对ETDA抗凝处理后的静脉外周血进行DNA提取,再使用聚合酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)对9例血样进行ABO血型基因分型检测。结果 9例临床病人血清学表型为:AxB 2例、AB亚1例、A亚B亚1例,Ax 2例,B亚3例,9例患者基因型分别为为:A/B 4例,A/O 2例,B/O 3例,通过PCR-SSP检测所得基因型与血清学表型结果相一致。结论利用聚合酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)对血清学方法鉴定ABO血型结果为正反不定型的疑难血型标本进行基因型检测,能准确地确定患者的血型抗原,为临床疑难ABO血型患者制定安全有效的用血方案提供保障。

疑难ABO血型标本的表型与相应等位基因的检测分析

文章选取某医院2019年1月到2020年1月间的患者血液样本8例,按照常规血型检测技术进行血清学试验,确定ABO正反定型,随后采用盐酸胍/蛋白酶K裂解提取法从抗凝处理后的静脉外周血中提取DNA,最后采用聚合酶链反应-序列特异性引物法对该8例血样进行ABO血型的基因分型检测,检测结果与血清学表型相同。这说明,使用聚合酶链反应-序列特异性引物法,可以对血清学方法难以鉴定的疑难血型进行基因分型检测,准确确定血型抗原,为临床患者的用血方案提供保障。