HPLC测定疗癣卡西甫散中盐酸小檗碱的含量

目的建立HPLC测定疗癣卡西甫散中盐酸小檗碱的含量测定。方法色谱柱:大连依利特C18(4.6×200mm,5μm);流动相:乙腈-0.05mol/l磷酸二氢钾溶液(30:70);流速:0.8ml/min;检测波长:349nm;以盐酸小檗碱为对照品,采用外标法定量。结果盐酸小檗碱在0.059～0.531μg范围内呈良好线性关系(r=0.9999),平均回收率为100.01%,RSD为0.10%。结论本法结果准确,方法简便,易于操作,重现性好,可用于该药品的质量控制。

疗癣卡西甫散提取物对肿瘤坏死因子-α诱导角质形成细胞增殖的影响

目的观察疗癣卡西甫散提取物(LE)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导角质形成细胞株HaCaT细胞增殖及白细胞介素-8(IL-8)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)m RNA表达的影响,探讨其作用机制。方法将培养的HaCaT细胞分为正常组、TNF-α组和LE低、中、高剂量组。除正常组外,其余各组细胞均给予40 ng/m L TNF-α诱导,各给药组再分别给予8、40、200μg/m L LE作用48 h。MTT法检测HaCaT细胞增殖;ELISA检测HaCaT细胞IL-8和ICAM-1含量;PI和Hoechst33342荧光染色观察HaCaT细胞凋亡;半定量RT-PCR检测HaCaT细胞IL-8和ICAM-1的m RNA表达。结果与正常组比较,TNF-α组HaCaT细胞吸光度、IL-8和ICAM-1含量及其m RNA表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与TNF-α组比较,LE各剂量组HaCaT细胞吸光度、IL-8和ICAM-1含量及其m RNA表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论 LE通过促进HaCaT细胞凋亡及抑制HaCaT细胞IL-8和ICAM-1基因表达,从而维持皮损处HaCaT细胞的正常水平。