川藏高原的两种疣柄牛肝菌

川藏高原的两种疣柄牛肝菌李泰辉章卫民（广东省微生物研究所广州５１００７０）戴贤才（四川甘孜州农科所康定６２６０００）戴安国（西藏蔬菜研究所拉萨８５０００２）作者等曾受到四川省甘孜州科委食用菌资源调查项目资金和广东省科委援藏项目资金的资助，在有关单位、...

远东疣柄牛肝菌的化学成分

从远东疣柄牛肝菌 (Leccinumextremiorientale)子实体中提取分离得到 13个化合物 ,通过理化常数和波谱数据分析 ,它们的结构被鉴定为 :麦角甾 7,2 2 二烯 3 β ,5α ,6β 三醇 ( 1) ,麦角甾醇过氧化物 ( 2 ) ,麦角甾醇 ( 3 ) ,麦角甾 4,6,8( 14 ) ,2 2 四烯 3 酮 ( 4 ) ,麦角甾 5 ,7 二烯 3 β 醇 ( 5 ) ,棕榈酸 ( 6) ,( 2S ,3S ,4R ,2′R) 2 ( 2′ 羟基二十四碳酰胺 )十八烷 1,3 ,4 三醇 ( 7) ,脑苷脂B ( 8) ,脑苷脂D ( 9) ,尿嘧啶 ( 10 ) ,肌苷 ( 11) ,腺苷 ( 12 ) ,D 阿洛醇 ( 13 ) .利用 2DNMR ( 1H 1HCOSY ,HMBC ,HMQC)技术首次对化合物 8和 9的氢谱和碳谱数据进行了全归属 .在浓度为 10 0 μg/mL时 ,化合物 2 ,7和 8表现出选择性地抗蛇毒Crotalusadamenteus分泌的磷脂酶A2 活性 ,而对蜂毒Apismellifcra磷脂酶A2 却无活性 .此外 ,远东疣柄牛肝菌提取物对粘虫拒食率和小菜蛾死亡率分别为 67%和 5 5 % .

热水法提取黄皮疣柄牛肝菌多糖工艺研究

探讨热水法提取黄皮疣柄牛肝菌多糖,选择液料比、提取温度和提取时间进行单因素试验,应用响应曲面法进行优化,优化后的提取工艺条件为:液料比34∶1(mL/g),提取温度51℃,提取时间3.1 h,多糖的提取率为16.67%,与预测值接近,表明响应面优化的模型参数准确可靠。

黄皮疣柄牛肝菌多酚提取及对Caco-2结肠癌细胞抑制作用研究

以黄皮疣柄牛肝菌为原料,乙醇为提取溶剂,采用Folin-Ciocalteu法测定多酚含量,研究了乙醇浓度、提取温度、料液比和提取时间对多酚得率的影响。在单因素实验的基础之上,通过正交实验优化提取工艺参数,并测定了所得多酚组成及其对Caco-2结肠癌细胞的抑制作用。结果表明,最佳提取工艺条件为:温度为80℃,乙醇浓度为50%,料液比为1∶25 g/m L,提取1 h。在此提取工艺条件下,最佳提取次数为2次时,黄皮疣柄牛肝菌多酚的得率为5.46%±0.04%;在18种酚类物质中,在黄皮疣柄牛肝菌中检出5-磺基水杨酸、儿茶素和肉桂酸等8种多酚类物质,其中5-磺基水杨酸含量最高为779.00 mg/100 g;黄皮疣柄牛肝菌多酚对Caco-2结肠癌细胞产生一定程度的抑制作用,当其浓度为175μg/m L时,抑制率达55.07%。

不同产地皱盖疣柄牛肝菌中矿质元素含量测定及特征分析

采用微波消解-电感耦合等离子体发射光谱法测定5个产地皱盖疣柄牛肝菌中10种矿质元素含量,并用SPSS软件进行方差分析和主成分分析。结果显示:该方法标准物质(GBW 07605)回收率在91%~101%之间,检出限在0.000 1~0.616 5 mg/kg范围,表明该方法准确、可靠;皱盖疣柄牛肝菌中Mg、Cu、Ca、Na、Zn等矿质元素的含量较高,不同产地皱盖疣柄牛肝菌中矿质元素含量具有差异;主成分分析的前3个主成分累积贡献率达到87.87%,能表达大部分信息,主成分综合得分可以反映出不同产地皱盖疣柄牛肝菌对10种矿质元素的富集情况。

远东疣柄牛肝菌仿生栽培

在来舟林场一片13年树龄的人工壳斗科林中人工接种远东疣柄牛肝菌、正红菇和满山红.1a后,在接种远东疣柄牛肝菌的3个小区内均发现其子实体,但正红菇和满山红接种小区及对照区均未发现它们的子实体.接种材料的试验表明,孢子接种较菌丝及子实体组织接种易获得成功.

远东疣柄牛肝菌化学成分分析

目的:研究远东疣柄牛肝菌子实体的化学成分。方法:采用Sephadex LH-20凝胶色谱柱和硅胶色谱柱进行分离纯化,通过波谱数据和理化常数鉴定化合物的结构。结果:从远东疣柄牛肝菌中分离鉴定出11种化合物:5-(L)-羰基-四氢吡咯-2-甲酸甲酯(A)、5-(L)-羰基-四氢吡咯-2-甲酸(B)、腺苷(C)、尿嘧啶核苷(D)、α-甲基-D-呋喃核糖(E)、(2R,3R)-2,3,4-三羟基丁酸(F)、2,2,5,5-四甲基四氢呋喃(G)、D-阿拉伯糖酸-1,4-内酯(H)、2-乙酰胺基-1,6-脱水-2-脱氧-D-吡喃型葡萄糖(I)、2-乙酰胺基-1,6-脱水-2-脱氧-D-吡喃型半乳糖(J)和麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(K)。结论:化合物A、B和E^J为首次从远东疣柄牛肝菌中分离得到的化合物。

云南疣柄牛肝菌属真菌中汞含量及食用健康风险分析

汞(Hg)对人类健康有明显的毒害作用,多数野生食用菌对Hg有很强的富集能力,测定野生食用菌中总Hg含量,并对其进行食用安全评估有重要意义。采用冷原子吸收光谱法测定云南常见疣柄牛肝菌属真菌菌盖、菌柄中总汞(Hg)含量,分析样品对Hg的富集特征;以FAO/WHO现行每周Hg允许摄入量(provisional tolerable weekly intake,PTWI)标准,评估疣柄牛肝菌属真菌的食用安全性。结果显示,不同产地、种类及不同采集时间疣柄牛肝菌属真菌的总Hg含量差异明显,菌盖中总Hg含量在0.54~4.80 mg·kg-1dw之间,菌柄总Hg含量在0.32~2.80 mg·kg^(-1)dw之间,同一种牛肝菌菌盖总Hg含量均大于菌柄(Q(C/S)>1),表明疣柄牛肝菌属真菌对Hg的积累量与生长环境、种类、部位等有关。根据FAO/WHO暂行的每周Hg允许摄入量标准(0.004 mg·kg-1bw),成年人(60 kg)每周食用300 g(鲜重)采自云南的疣柄牛肝菌属真菌,Hg摄入量远低于PTWI标准,对人体Hg暴露风险较低。

新疆橙黄疣柄牛肝菌菌丝对Cu、Zn和Pb的耐受性研究

在固体和液体静置纯培养条件下,研究了3种重金属Cu、Zn和Pb在不同浓度处理下对橙黄疣柄牛肝菌菌丝生长的影响,并利用EC50值评价真菌对Cu,Zn和Pb的耐性。结果表明:通过半致死浓度评价橙黄疣柄牛肝菌耐受性发现,橙黄疣柄牛肝菌对Zn的耐受性强于Cu和Pb;菌根真菌培养后,基质pH降低与真菌生物量有关,说明菌根真菌在重金属胁迫下能通过调节自身pH环境缓解压力。

西藏野生变色疣柄牛肝菌粗多糖提取及单糖组成研究

采用正交实验优化西藏变色疣柄牛肝菌粗多糖提取工艺条件,并应用气相色谱法对变色疣柄牛肝菌多糖中单糖的组成进行分析。结果表明,西藏变色疣柄牛肝菌粗多糖最佳提取条件是:提取时间3 h,温度80℃,料水比1∶15,乙醇沉淀浓度85%,此条件下多糖得率为5.008%,提取粗多糖含量为47.995%;气相色谱分析得出组成该多糖的单糖分别是葡萄糖(G lc)、半乳糖(Gal)、甘露糖(M an)、木糖(Xyl)和岩藻糖(Fuc),其摩尔比为Fuc∶Xyl∶M an∶G lc∶Gal=0.32∶0.26∶1∶14.7∶1.67。

黄皮疣柄牛肝菌营养成分分析

对黄皮疣柄牛肝菌中宏量营养成分、常量及微量元素、氨基酸组成进行了较为全面的分析测定。测定结果表明 :黄皮疣柄牛肝菌中蛋白质含量 35 10 % ,脂肪 1 4 0 % ,粗纤维 12 5 3% ,总糖 9 33% ;元素钙的含量较低为 12 6mg/kg ;氨基酸组成中谷氨酸的含量最高为3 80 %。

IC法快速测定皱盖疣柄牛肝菌中5种阴离子含量

利用超声波(UAE)辅助提取-离子色谱(IC)法检测皱盖疣柄牛肝菌(Leccinum rugosiceps)中F-、Cl-、NO2-、NO3-、PO43-5种阴离子。采用NaOH溶液(3.0mmol/L)超声渗提30min后进样100μL,通过流速为1.2mL/min的淋洗液Na2CO3+NaHCO3(3.5mmol/L+1.0mmol/L)洗脱。结果表明,F-、Cl-、NO2-、NO3-、PO43-5种离子线性范围分别为2～25、2～20、2～100、10～55、10～100mg/L,峰面积RSD分别为0.58%、1.27%、0.73%、0.92%、2.33%,检出限在0.0976～1.0984 mg/L之间,加标回收率在87.50%～110%之间。皱盖疣柄牛肝菌样品中未检出NO2-。该方法简单快捷、精密度好、准确度高,可用于测定皱盖疣柄牛肝菌中5种阴离子含量。

新疆北屯橙黄疣柄牛肝菌生境调查研究

对新疆阿勒泰地区北屯市郊橙黄疣柄牛肝菌发生地植被特征、土壤理化性质等进行初步研究,结果表明,适宜橙黄疣柄牛肝菌发生的生境条件是海拔在450 m～600 m,以银白杨为主的树林,郁闭度在0.7左右,树龄在20年～40年,树高15 m～30 m,胸径25 cm～45 cm,在橙黄疣柄牛肝菌生长的土壤A层(0～20 cm),pH值偏酸性,土壤含水量为20%左右,地温为19℃左右,有机质、速效氮、速效钾含量一般,全氮(0.44 g·kg-)1和速效磷(9.77 mg·kg-)1含量高的地方。

皱盖疣柄牛肝菌多糖LRP-Ⅰ和LRP-Ⅱ结构表征及抗氧化活性分析

采用热水浸提皱盖疣柄牛肝菌多糖,纯化后得到两种精制多糖LRP-Ⅰ和LRP-Ⅱ,用多种色谱手段对两种多糖进行结构表征,并探索两种多糖的抗氧化活性差异。结果表明:红外光谱显示多糖LRP-Ⅰ和LRP-Ⅱ在构型上属α型吡喃己糖,具明显多糖吸收峰;水解后高效液相色谱显示LRP-Ⅰ单糖组成为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、木糖和岩藻糖,单糖摩尔比为0.68∶0.10∶2.87∶0.28∶0.12,LRP-Ⅱ单糖组成为甘露糖、葡萄糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖,单糖摩尔比组成为1.69∶2.30∶2.06∶0.10∶1.04;高效凝胶渗透色谱检测LRP-Ⅰ分子量为1.98×10^4 Da,LRP-Ⅱ分子量为8.38×10^6 Da;甲基化衍生物气质联用分析LRP-Ⅰ和LRP-Ⅱ糖苷键类型,主要连接键型均有→1,4)-葡聚糖、→1,3)-甘露聚糖和→1,3)-木聚糖;扫描电镜显示,LRP-Ⅰ呈散片状、带状和丝状,LRP-Ⅱ呈致密网孔状。抗氧化活性表明,在多糖浓度为1~10 mg/mL时,LRP-Ⅰ和LRP-Ⅱ对ABTS和DPPH自由基有良好清除作用,LRP-Ⅰ的清除效果优于LRP-Ⅱ。本研究为了解皱盖疣柄牛肝菌多糖的活性机制提供了重要参考。

新疆橙黄疣柄牛肝菌分离培养研究

研究以橙黄疣柄牛肝菌的子实体作为分离材料,采用组织分离方法,在不同配方的培养基上培养,筛选出适合橙黄疣柄牛肝菌菌丝生长的基础培养基,其中菌盖和菌柄两者交接处的分离成功率达60%以上。以菌丝生长速度、生长状况为参照标准,对橙黄疣柄牛肝菌的生物学特性进行研究,确定其最适生长温度、pH值、葡萄糖含量以及氮源。结果表明,橙黄疣柄牛肝菌为中温型菌根真菌,在25℃下长势良好,最佳pH值为6,最佳葡萄糖含量为0.5%,最佳氮源为蛋白胨。

变色疣柄牛肝菌子实体水溶性粗多糖的提取方法

试验就变色疣柄牛肝菌多糖的提取方法进行了初浅探索,结果表明变色疣柄牛肝菌干燥子实体萃取粗多糖较佳的条件为：粒度以粉碎60目筛、提取剂为蒸馏水、选择菌盖、选择料水比为1∶35（W/V）、沉淀剂达到85%的乙醇浓度、萃取温度选择在80 ℃、萃取时间为 3 h、提取2次可得到粗多糖3%～5%.正交试验表明影响变色疣柄牛肝菌多糖得率的主次因素为乙醇浓度、提取温度、提取时间、料水比,各因素的最佳配合、最优工艺为A3B2C1D3,即乙醇浓度为85%、温度80 ℃、时间 3 h、料水比为1∶15,在此条件下多糖得率为5.008%,提取粗多糖含量在47.995%.

水-碱连续提取黄皮疣柄牛肝菌粗多糖的理化性质及抗氧化活性研究

以黄皮疣柄牛肝菌Leccinellum crocipodium(Letellier.)Watliag为原料,采用水提醇沉法从黄皮疣柄牛肝菌子实体中提取得到水提粗多糖(LPS),再用碱提醇沉法从菌渣中提取得到碱提粗多糖(LPJ),研究两种黄皮疣柄牛肝菌粗多糖理化性质与抗氧化活性。结果表明:水提粗多糖LPS与碱提粗多糖LPJ得率分别为18.44%±1.30%与5.50%±0.69%。LPS呈海绵状,颜色呈浅咖色;LPJ呈蓬松粉末状,颜色呈黄褐色。LPS多糖含量、糖醛酸含量、硫酸根含量、总酚含量均显著高于LPJ(P<0.05)。LPS与LPJ抗氧化活性随着浓度的增加而逐渐增强。LPS、LPJ浓度为4 mg/m L时,DPPH自由基的清除率(87.55%±0.51%、54.31%±2.72%)、羟基自由基清除率(54.53%±1.61%、46.50%±0.64%)、ABTS阳离子自由基清除率(81.56%±4.43%、68.79%±1.23%)、还原力吸光度值(1.41±0.02、1.16±0.01)均达到最大值,而浓度为3 mg/m L时,超氧阴离子自由基清除率(89.16%±2.42%、85.94%±2.98%)达到最大值。说明LPS与LPJ具有较好的抗氧化能力,且LPS优于LPJ。

云南产黄皮疣柄牛肝菌基本营养成分和抗氧化活性

对采集自云南省25个产地的29个黄皮疣柄牛肝菌(Leccinum crocipodium)样本的基本营养成分、多酚含量及其抗氧化活性进行了测定和分析。结果表明,菌体粗蛋白含量为24.54%DW^37.25%DW,粗脂肪含量为0.88%DW^3.78%DW,可溶性总糖含量为7.03%DW^19.03%DW,粗灰分含量为4.31%DW^7.07%DW;多酚含量丰富,为12.25 mg GAE/g DW^24.44 mg GAE/g DW;多酚粗提物表现出很好的DPPH·、ABTS+·清除活性、FRAP还原能力以及Fe2+螯合能力;总酚含量与ABTS+·清除活性和FRAP还原能力的显著正相关(p<0.01),表明黄皮疣柄牛肝菌粗多酚可能是其抗氧化活性的主要因素之一。云南产黄皮疣柄牛肝菌营养组成丰富,具有高蛋白低脂肪,粗多酚提取物抗氧化活性强的特点。

黄皮疣柄牛肝菌多糖对小鼠通便作用及血清指标的影响

以黄皮疣柄牛肝菌[Leccinellum crocipodium(Letellier.)Watiog]多糖为材料,研究其对小鼠通便作用及血清生化指标的影响。将60只雄性BALB/C小鼠随机分为5组:空白组(蒸馏水)、低聚果糖组(80 mg/kg)、黄皮疣柄牛肝菌多糖高、中、低剂量组(160、80、40 mg/kg)。连续灌胃30 d后,分别测定各组小鼠的粪便含水率、pH值、排便时间、小肠蠕动功能、结肠指数、结肠长度、血清蛋白质组分、血清脂质组分及血清葡萄糖含量。结果表明,连续灌胃不同剂量的黄皮疣柄牛肝菌多糖对小鼠体重不会产生影响,但可以使受试小鼠的粪便含水率、墨汁推进率、结肠长度、结肠指数显著提高(P<0.05),粪便p H值、排便时间显著降低(P<0.05),且呈剂量依赖性;当黄皮疣柄牛肝菌多糖浓度为160 mg/kg时,可降低小鼠血清中甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,CHOL)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量。黄皮疣柄牛肝菌多糖对小鼠具有润肠通便的作用,能降低小鼠粪便pH值,促进肠道发育,并且可以促进小鼠的脂类代谢。

黄皮疣柄牛肝菌多糖结构鉴定及对小鼠盲肠与粪便中短链脂肪酸的影响

本实验采用水提醇沉法从黄皮疣柄牛肝菌中提取粗多糖,经脱色、脱蛋白后得到黄皮疣柄牛肝菌多糖(polysaccharides from Leccinum crocipodium(Letellier.)Watliag,LCP),凝胶渗透色谱法测定LCP分子质量,高效液相色谱法测定LCP单糖组成,紫外光谱鉴定LCP纯度,红外光谱分析LCP结构,动物实验研究LCP对小鼠盲肠内容物及粪便中短链脂肪酸的影响。结果表明,该多糖单糖组成为甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖,其物质的量之比为4.34∶0.35∶0.08∶13.39∶3.35∶0.75∶1.80;重均分子质量为1.540×10^(5) Da;红外光谱分析表明LCP是含有α-(1→6)糖苷键以及β-型糖苷键的吡喃型多糖;动物实验表明LCP对小鼠盲肠及粪便中乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸的产生都有较大影响,不同的灌胃剂量对小鼠产生短链脂肪酸的影响有较大差异,以高剂量LCP对短链脂肪酸的产生影响最大。