模拟失重大鼠肝组织中NF-κB的表达及意义

目的:研究模拟失重环境下大鼠肝脏组织中NF-κB的表达及意义.方法:成年♂Wistar大鼠84只,随机分为模拟失重组和对照组,每组又分别设1、2、3、4、5、6和7d共7个时相点,每时相点模拟失重和同步对照各6只大鼠.采用尾悬吊法建立模拟失重动物模型.各组大鼠肝组织中NF-κB表达分别应用Western blot和免疫组化PV-6001法进行检测.结果:在尾悬吊1-2d期间,大鼠焦躁不安,饮食量减少,精神较差,活动减弱,2-3d后有所适应,逐渐恢复稳定状态.模拟失重环境下大鼠肝脏NF-κB表达水平明显升高,1、2d悬尾组大鼠肝组织中NF-κB表达率明显高于对照组(F=271.36,P<0.01),其后,NF-κB表达水平呈明显下降趋势(F=60.68,P<0.05),5-7d悬尾组NF-κB表达水平接近对照组,差异无统计学意义.NF-κB阳性产物主要见于实验大鼠肝细胞内,亦见于炎细胞及Kupffer细胞内,可分为胞质型、核型、核浆型等三个类型,单独或混合存在.结论:模模拟失重使大鼠肝脏组织中NF-κB表达发生明显变化,提示在失重环境中肝脏NF-κB的早期高表达和逐渐恢复过程与失重应激反应及失重耐受有密切关系.

前扣带皮层中碱性成纤维细胞生长因子及其受体在慢性炎症性疼痛中的表达变化

目的探讨完全弗氏佐剂(CFA)外周注射诱导的碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)及其受体在大脑前扣带皮层(ACC)中的表达变化。方法单侧足底注射CFA 150μl诱导大鼠慢性炎症性疼痛,在不同时间点取前扣带皮层(每组3只动物),通过RT-PCR和Western blotting方法分别检测FGF-2及其主要受体FGFR1-4mRNA和FGF-2蛋白的表达变化。结果大鼠单侧足底皮下注射CFA诱导了慢性炎症性疼痛。注射对侧脑区中,在注射后6 h、3 d、7 d、14 d,ACC中FGF-2和FGFR1的mRNA表达相对于正常组明显增加,FGFR2 mRNA在3 d、7 d、14 d表达增加。注射同侧脑区中,FGF-2和FGFR1mRNA的表达在注射CFA后6 h、3 d、7 d、14 d相对于正常组明显增加。双侧脑区的FGF-2蛋白表达在注射CFA后6 h、3 d和7 d明显增加。结论 CFA诱导的慢性炎症性疼痛状态下,FGF-2可能通过受体FGFR1参与疼痛在高级中枢部位的信号调节。

双链断裂修复蛋白hKu70缺陷细胞株的建立及其生物学特性

目的 建立并鉴定DNA双链断裂 (DSB)修复蛋白hKu70缺陷细胞株 ,并观察该缺陷细胞的某些生物学效应 ,用于hKu70基因功能及职业有害因素对DNA双链断裂修复影响的研究。方法 用构建的hKu70基因反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体 (pEGFP C1 K)转染人胚肺成纤维细胞 (HLF) ,用蛋白免疫印迹法鉴定转染细胞中hKu70基因的表达水平。同时观察转染细胞生长形态 ,绘制生长曲线 ,软琼脂培养法鉴定恶性程度。结果 pEGFP C1 K载体在转染细胞内可较稳定表达 ,hKu70蛋白缺陷细胞株hKu70基因的蛋白表达水平下降了 42 % ,转染后hKu70蛋白缺陷细胞生长形态、生长速度无明显变化 ,软琼脂培养未见细胞集落。结论 成功建立和鉴定了hKu70蛋白缺陷细胞株 。